缺血预处理诱导大鼠海马CA1区神经元HSP70提前表达
2022-07-29
来源：求医网
目的前脑缺血再灌注可引起大鼠海马迟发性神经元死亡。但若在致死性缺血前，预先给予短暂的非致死性缺血刺激，即缺血预处理（ischemicpreconditioning，IPC），则可对其后的长时间致死性缺血产生耐受，此现象称为缺血耐受。HSP70基因的转录被认为是细胞应激反应的基因标志，其基因产物HSP70具有细胞保护作用。本研究旨在探讨缺血预处理引起的缺血耐受中HSP70表达的变化。方法（1）建立动物模型： 选用健康成年雄性Wistar大鼠，参照Pulsinelli的四血管阻断法建立前脑缺血模型。动物分三组：单纯缺血再灌注组（IR组），给予假手术3d后行8min致死性缺血；缺血预处理组（IPC组），先给予3min非致死性缺血，3d后再给予8min缺血；对照组，只给予假手术，不给予缺血刺激。（2）免疫组化检测： 于缺血再灌注2h，取脑制备冰冻切片，用SABC法检测各组海马CA1区神经元HSP70的表达。（3）流氏细胞术检测： 于缺血再灌注24h，迅速取两背侧新鲜海马组织，用流氏细胞仪检测海马CA1区神经元HSP70的阳性表达率。（4）病理学检查： 再灌注7d时取脑制备石蜡切片，行尼氏染色，光镜下观察海马CA1区神经元形态学改变。结果免疫组化检测显示，对照组及IR组在前脑缺血8min再灌注2h时，海马CA1区神经元未见HSP70表达。而IPC组该区神经元HSP70强烈表达。免疫活性颗粒分布于胞核及胞浆中。流氏细胞术检测显示，对照组、IR组及IPC组缺血再灌注24h时，海马CA1区HSP70阳性细胞率分别为4.10±1.60％，7.03±2.11％和39.28±11.14％。IR组及IPC组均显著高于对照组（P＜0.05，P＜0.001）。而IPC组HSP70阳性细胞率明显高于IR组（P＜0.001）。病理学检查显示，缺血再灌注7d时，IR组海马CA1区锥体细胞大部分死亡，而IPC组该区神经元大部分存活，神经元密度显著高于IR组（P＜0.001）。结论（1）缺血预处理可在缺血再灌注早期诱导海马CA1区缺血敏感神经元HSP70提前表达，增强了神经元对缺血损伤的耐受性。（2） hSP70的提前表达是预示缺血损伤神经元能够存活的一个敏感指标。
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