缺血预处理对大鼠海马CA1区神经元bcl-2表达的影响
2022-07-29
来源：求医网
目的探讨前脑缺血再灌注引起的海马CA1区神经元死亡是否包含凋亡机制的参与以及缺血预处理（IPC）是否通过影响凋亡抑制基因bcl-2及bcl-xl的表达起到脑缺血损伤保护作用。方法（1）动物模型建立及分组； 选用健康成年雄性Wistar大鼠，参照Pulsinelli的四血管阻断法建立前脑缺血模型。动物分为3组：单纯缺血再灌注组（IR组），给予假手术3d后行8min致死性缺血；缺血预处理组（IPC组），先给予3min短暂缺血，3d后再给予8min缺血；对照组，只给予假手术，不给予缺血刺激。（2）结合PI染色的流氏细胞术检测： 于缺血再灌注24h，迅速取两背侧新鲜海马组织，采用流氏细胞仪（FCM）进行海马CA1区神经元细胞凋亡的检测，低于G1期DNA含量的细胞为凋亡细胞。（3）免疫组化检测： 于缺血再灌注2h，取脑制备冰冻切片，采用SABC法检测各组海马CA1区神经元bcl-2及bcl-xl蛋白的表达。结果流氏细胞术检测显示，IR组及IPC组缺血再灌注24h时海马CA1区神经元的凋亡百分率分别为13.11±3.00％和2.40±0.98％，与对照组（凋亡百分率为1.34±0.62％）相比，均有显著性差异（P＜0.001，P＜0.05）。但是，IPC组细胞凋亡百分率显著低于IR组（P＜0.001）。免疫组化检测显示，对照组及IR组前脑缺血再灌注2h时海马CA1区神经元未见bcl-2及bcl-xl蛋白表达。而IPC组在同一时间点，该区神经元bcl-2及bclxl蛋白均强烈表达，且两种蛋白的阳性细胞分布及其在细胞内的定位基本一致。结论（1）细胞凋亡是前脑缺血再灌注损伤中神经元发生死亡的重要形式之一。（2）缺血预处理可诱导缺血再灌注早期缺血敏感神经元中bcl-2及bclxl蛋白强烈表达，抑制凋亡的发生。这可能是缺血预处理能够对脑缺血损伤起保护作用的机制之一。
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