【摘要】目的缺血预适应是指心肌短暂缺血再灌注后，使心肌产生适应性反应，对随后持续缺血的耐受能力明显增强，使持续缺血造成的心肌梗塞范围缩小，减轻缺血再灌注心律失常和心功能异常。我们用在体兔心脏缺血预适应模型，初步观察了预适应心脏保护的电生理基础，探讨其在减少恶性心律失常中的可能作用。方法将30只健康家兔随机分成对照组、缺血组、预适应组，运用Franz心外膜MAP探针记录技术，观察约40分钟稳定的心电图和MAP图形，此后行程序期前刺激测定心室肌有效不应期。结果缺血组缺血1分钟内，即出现心肌细胞MAPA和dv/dt max明显下降(P＜0.01)。此后，随缺血时间延长，MAP形态逐渐变小。分别于再灌注5、10和20分钟，MAPD₅₀、MAPA和dv/dt max才逐渐恢复接近正常(P＞0.05)。缺血组持续缺血前5分钟和整个再灌注期，MAPD₉₀和基础值比较变化不大(P＞0.05),而持续缺血5～20分钟，才发现MAPD₉₀明显缩短。持续缺血早期，ST段逐渐升高，但随缺血时间的进一步延长，至缺血15分钟后，ST段反而下降。在上述参数动态变化过程中，预适应可明显减轻缺血造成的MAPA、dv/dt max下降程度，相对延长MAPD₅₀和MAPD₉₀，减少ST段升高幅度。各实验组ERP/MAPD₉₀分别为：C组1.05±0.03;IS组0.77±0.01;IPC组0.94±0.01。缺血组ERP/MAPD₉₀较其他两组显著降低(P＜0.05)。结论预适应可使MAPA和dv/dt max相对增加，MAPD₅₀和MAPD₉₀相对延长，ERP/MAPD₉₀比值增大，表明预适应可以改善缺血心肌间传导特性，减轻正常和缺血心肌间复极的不均匀性，从而可能降低折返性心律失常的发生率。

Effect of ischemic preconditioning on rabbit cardiac electrophysiologic parameters

Liu Jinghua, Ren Ziwen, Wang Lihui, et al.

（Department of Cardiology, the First Teaching Hospital of Beijing Medical University, Beijing 100034）

【Abstract】ObjectiveA brief coronary occlusion before a more prolonged occlusion, termed ischmic preconditioning, can induce changes in the heart that make it more resistant to subsequent ischemic exposure. It can also reduce the infarct size, preserve the postischemic cardiac function and protect the heart against the appearance of subsequent arrhythmia in ischemic tissue. We employed an anaesthetised open chest rabbit model of ischemic preconditioning to preliminarily observe the protective electrophysiologic basis, and approached the possible roles on reducing the appearance of lifethreatening arrhythmias.Methods We randomly devided 30 rabbits into control (C) group, ischemic (IS) group and ischemic preconditioning (IPC) group. With the recording techniques of monophasic action potential (MAP), we continually monitored the stable ECG and MAP for 40 minutes, and then examined the ventricular effective refractory period by programmed extrastimulation.Results In 1-minute ischemic period, MAPA and dv/dt max in IS group rapidly decreased (P＜0.01). Thereafter, the form of MAP became smaller with the prolongation of ischemia. MAPD₅₀, MAPA and dv/dt max gradually reverted close to normal levels in 5-, 10- and 20-minute reperfusion period (P＞0.05). In IS group, the differences between MAPD₉₀ and its baseline were no significant during the 5-minute ischemia and the whole reperfusion period (P＞0.05). MAPD₉₀ did not markedly shortened until 5～20 minutes occlusion. ST segment gradually elevated in early ischemia, but with the prolongation of ischemia to 15 minutes, ST segment inversely depressed. During the dynamic changes of parameters as mentioned above, the preconditioning may markedly diminish the decreasing degree of MAPA and dv/dt max, relatively prolong MAPD₅₀ and MAPD₉₀, and reduce the elevating degree of ST segment due to ischemic insult. ERP/MAPD₉₀ in C group, IS group and IPC group was 1.05±0.03, 0.77±0.01, 0.94±0.01, respectively. ERP/MAPD₉₀ in IS group was markedly smaller than other groups (P＜0.05).Conclusions Preconditioning relatively increased MAPA,dv/dt max and ERP/MAPD₉₀,prolonged MAPD₅₀ and MAPD₉₀.It indicated that preconditioning could improved the conductive ability of ischemic myocardium, diminish the irregular repolarization between normal myocardium and ischemic myocardium. Thereby, ischemic preconditioning could reduce the incidence of reentrant arrhythmias.

【Key words】Ischemic preconditioningMonophasic action potentialMycoardial protectionElectrophysiology

缺血预适应抗心律失常机制尚未完全明确，各实验结论因动物种属、在离体动物模型、预适应方案等不同而有所差别。本文通过在体兔缺血预适应心脏模型，运用心外膜MAP标测技术，试图阐明缺血预适应抗心律失常可能的电生理机制。

材料和方法

一、研究对象

体重2.5～3.4 kg健康家兔30只，雌雄不拘，随机分为对照组、缺血组和预适应组。以5%戊巴比妥钠静脉麻醉后，将兔固定于兔架上，四肢及胸部皮肤刺入9号金属针头，尾端与多导电生理记录仪(Migograf,Siemens Elema)心电图导线连接，观察并记录二个肢体导联和三个胸导心电图，确保图形稳定无干扰或伪差。剪去颈胸部兔毛，切开颈正中皮肤，钝行分离皮下组织至气管，行气管切开并插管，与人工呼吸机连接。呼吸机工作方式为IPPV，频率30～35次/分，潮气量15～25 ml,呼吸正压为2～4 cmH₂O,吸氧浓度100%。调整呼吸机工作参数，使血气稳定在正常生理范围。

选心尖搏动最强处沿胸骨左缘做4～6 cm长切口，逐层钝行分离皮下组织，剪断二根肋骨并结扎止血，用开胸器撑开胸腔，剪开心包膜暴露整个心脏。使用3/0绦纶线距冠状动脉左前降支(LAD)根部2～3 mm处穿过，线两端进入2 cm长6 F硬塑料套管形成一个圈，抽紧后以纹氏钳夹闭或松解，可造成LAD完全阻塞和再灌注模型，心肌缺血靠体表心电图上ST-T改变、局部心肌变暗红色及节段运动不良确认。缺血前及缺血和再灌注过程中每小时给肝素钠500 IU/kg。

二、方法

1.Franz心外膜MAP探针准备：Franz心外膜MAP探针材料为非极化Ag-AgCl,探针顶端是一直径为1 mm的半球形电极，距顶端5 mm凹陷处是一直径1 mm参考电极，由替换海绵吸附体液组成容积导体。操作前，将导管置于生理盐水浸泡1小时左右，使其短路，以达到电极电位预平衡，减少记录中基线漂移。保持10～30 g的恒定接触压力，在LAD与第一对角支分叉处左心室外膜轻放MAP探针，探针尾端与高阻抗(100 MΩ)差分前置放大器相连，输入多导电生理记录仪(频响范围0.05～1!000 Hz)。调整放大器增益，必要时可使用输入定标钮(5 mv)，自动调输出为零(offset)钮，观察5～10 s可获稳定MAP图形，以100 mm/s纸速记录。

2.电生理检查方案：将自制心外膜起搏电极放置于右室心尖部，无关电极与皮肤相连，以脉宽2 ms、2倍于舒张期阈电压的刺激强度在上述部位行S₁S₂刺激。200/150 ms开始以5 ms步长负扫，直至S₂达心室肌有效不应期。

3.各电生理参数测定方法：①单相动作电位振幅(MAPA)：指从MAP去极化顶端至基线的垂直距离，单位mv。②单相动作电位间期(MAPD)：指从去极化起点至下降支终点间的水平距离，单位ms。MAPD₅₀和MAPD₉₀分别指复极达50%、90%时，该点至上升支起点的水平距离。③单相动作电位0相最大上升速率(dv/dt max)：指0相除极速率，单位V/S。④ST段：指J点后0.08秒处各导联抬高总和，单位mv。

4.实验方案：①对照组(C组)：n=10,LAD根部穿线后，连续记录心电图、MAP 40分钟，此后行S₁S₂电刺激。②缺血组(IS组)：n=10,LAD完全闭塞20分钟后，再灌注20分钟，此后行S₁S₂电刺激。③预适应组(IPC组)：n=10，LAD完全闭塞5分钟后，再灌注5分钟，如此再重复2个周期，此后同IS组实验方案。

5.统计学处理：所有数据以均数±标准误表示，使用Stata软件，根据不同资料分别进行方差分析，q检验。以P＜0.05为差异具有显著性，P＜0.01为差异具有高度显著性。

结果

一、单相动作电位振幅(MAPA)的变化

各实验组MAPA随时间变化见表1。如表中所示，对照组MAPA随时间延长而轻度下降，但各时间点比较差异无显著性(P＞0.05)。缺血组缺血1分钟，MAPA下降约51%，此后随缺血时间延长，MAPA进行性降低，至缺血20分钟，MAPA仅为基础值的33.2%。再灌注期5分钟内，MAPA虽上升至基础值的63.5%，