缺血/再灌注时，活性的中性白细胞聚集在缺血区，附着心肌细胞并释放血小板活化因子。近期研究已证实，血小板活化因子可诱发心律失常，血小板活化因子可能为缺血/再灌注心律失常的重要诱发因素之一。尽管血小板活化因子的生理和药理作用已被广泛研究，但其电生理作用及其机制尚存在争议。本研究通过观察血小板活化因子的电生理作用以及格列本脲对血小板活化因子诱发的电生理作用的影响，探讨血小板活化因子引起电生理作用的可能机制。

一、材料与方法

1．实验方法：豚鼠（350～450g）经硫喷妥钠腹腔麻醉后，开胸摘取心脏。心脏被置于充满Tyrode′s液（成分为:NaCl 129mmol/L,KCl4mmol/L,NaHCO₃ 20mmol/L,NaH₂PO₃ 0.9mmol/L, CaCl₂ 1.8mmol/L, MgCl₂ 0.5mmol/L, D-glucose 10mmol/L）的恒温槽中（95%O₂,5%CO₂,T36℃），然后迅速分离左心室乳头肌，将分离的乳头肌移入2ml的灌流槽中，用Tyrode′s液平衡＞1小时，灌流速度5ml/min。标本通过刺激电极诱发动作电位（持续时间1毫秒，2倍阈刺激强度，频率1Hz），采用标准微电极技术获取动作电位，信号经放大器（日本光电MFZ-8300）放大后传送至示波器（日本光电VC-11），最后通过计算机贮存和分析动作电位参数。

首先观察血小板活化因子的电生理作用，然后在同一组标本中先采用格列本脲灌流15分钟后，再改用格列本脲和血小板活化因子的混合液灌流，格列本脲对血小板活化因子的电生理作用的影响将被进一步观察。

2.药物：血小板活化因子溶解于50/50的蒸馏水和二甲基亚砜混合液，制成1mmol/L浓度的原液；格列本脲溶解于二甲基亚砜混合液中，制成2mmol/L浓度的原液，在实验开始之前稀释成实验浓度。

3.统计学：数据表示为平均值±标准差，采用标准t检验方法，P＜0.05被认为差异具有显著性。

二、结果

1．血小板活化因子的电生理作用：观察5个不同豚鼠的左心室乳头肌。在血小板活化因子灌流前后，动作电位幅度和静息膜电位无显著性改变，但动作电位持续时间明显缩短。APD₉₀分别为（140.0±8.7）ms和（115.0±5.8）ms，P＜0.01，血小板活化因子诱发的电生理作用开始于灌流后5分钟，10～15分钟时达到稳定状态。这种作用在改用Tyrode′s液灌流15～20分钟后完全消失。

2．格列本脲对血小板活化因子诱发的动作电位持续时间缩短的影响：在同一组标本，待血小板活化因子完全冲洗后，灌流格列本脲(0.5μmol/L)15分钟，然后改用其与血小板活化因子的混合液灌流，尽管格列本脲本身引起了动作电位持续时间的缩短，APD₉₀从（136.8±7.2）ms降低到（129.6±7.2）ms，P＜0.05；但是加用血小板活化因子后未引起进一步缩短，APD₉₀分别为（129.6±7.2）ms和（127.2±5.7）ms，P＞0.05。在未用和使用格列本脲灌流后,血小板活化因子诱发的APD₉₀缩短率分别为17.4%±2.8%和1.7%±1.6%(P＜0.01)，而且血小板活化因子单独灌流时的动作电位持续时间明显短于其与格列本脲混合液灌流时的动作电位持续时间。APD₉₀分别为（115.0±5.8）ms和（127.2±5.7）ms，P＜0.05。

为了排除膜离子通道对血小板活化因子的脱敏感性,2/5的标本在格列本脲被完全冲洗后,再一次观察了血小板活化因子的电生理作用,与格列本脲灌流前的血小板活化因子所致的动作电位持续时间缩短相比,取得了相似的结果。

三、讨论

血小板活化因子引起动作电位持续时间缩短,诱发心律失常已被越来越多的研究所证实。但是血小板活化因子通过与其特异性受体结合后对膜离子通道的作用尚不清楚。本研究不仅显示了血小板活化因子明显缩短了动作电位持续时间，而且还证实了格列本脲（一种强效、特异的ATP敏感性K^＋通道阻断剂）明显抑制了血小板活化因子诱发的动作电位持续时间的缩短,提示血小板活化因子可能具有ATP敏感性K^＋通道兴奋剂的作用,通过促进K^＋外流从而缩短了动作电位持续时间。血小板活化因子通过促进K^＋外流，诱发动作电位缩短，也相应缩短了有效不应期；同时还增加了细胞外K^＋的不均一性,从而提高了对折返性心律失常的敏感性，这可能与其诱发心律失常密切相关。

收稿：1998-11-30修回：1999-02-23