关键词： 左室肥厚；肽基二肽酶A；基因；多态现象（遗传学）

【摘要】目的探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与高血压左室肥厚的关系。方法对104例高血压病患者，采用二维引导下的M型超声心动图检测有无左室肥厚（LVH），同时作24小时动态血压监测，采血检测ACE基因多态性（PCR方法）。113例正常人作基因频率检测。结果（1）高血压LVH（＋）与LVH（－）两组动态血压指标除夜间平均SBP、平均动脉压（MAP）差异有显著性外，24小时及白天平均SBP、DBP、MAP和夜间平均DBP两组间差异均无显著性。（2）LVH（＋）组I基因频率明显高于LVH（－）组，LVH（＋）组II基因型明显高于LVH（－）组。（3）113例正常人基因型频率分布：I为0.58，D为0.42。结论本研究提示，ACE基因多态性与左室肥厚明显相关，II基因型者似更易发生左室肥厚。ACE基因型频率分布东方人与西方人不同。

The relationship between the polymorphism of the ACE gene and left ventricular hypertrophy in hypertensive subjectsDENG Juelin, HUANG Dejia, CHENG Yongming, et al. First Hospital, West China University of Medical Sciences, Chengdu 610041

【Abstract】ObjectiveLeft ventricular hypertrophy (LVH) is a major independent risk factor for morbidity and mortality of cardiovascular disease. Studies suggest that angiotensin II may stimulate cardiac protein synthesis, whereas bradykinin may have an antiproliferative effect. Angiotensin converting enzyme (ACE) is a key enzyme in the production of angiotensin II as well as the degradation of bradykinin and thus may participate in the modulation of cardiac growth. In humans, the ACE levels are determined genetically. In the present study, we examined possibility that the genotypes of the ACE gene might influence the development of LVH in hypertensive subjects.MethodsThe study population consisted of 104 hypertensives with LVH or without LVH and 113 normal subjects. LVH was calculated from two -dimensionally guided M-mode echocardiographic measurements. The hypertensive subjects were monitored by ambulatory blood pressure monitoring (ABPM). The genotypes of the ACE gene was determined by the polymerase chain reaction (PCR).Results(1) ABPM: No significant differences in mean levels of SBP, DBP, and MAP of 24 hours and daytime and mean levels of DBP of nighttime between LVH (+) and LVH (-), but mean levels of SBP, MAP of nighttime. (2) The frequency of the I allele was higher in the group of LVH(+) than in the group of LVH (-), the genotype of II was higher in the group of LVH(+) than in the group of LVH (-). (3) I allele frequences were 0.58 and D allele frequences were 0.42 in 113 normal subjects.ConclusionsA significant relationship has been found between the polymorphism of the ACE gene and LVH, the II genotype seems to predispose to LVH. The different frequencies of the ACE genotypes have been found between the East and the West.

【Key words】left ventricular hypertrophypeptidyl-dipeptidase Agene

polymorphism (genetics)

左室肥厚（LVH）是心血管疾病的独立危险因子，高血压病人一旦发生LVH，其心血管事件发生率明显增高。一般认为LVH是左室压力负荷过重的结果，即左心室在过度的压力负荷下产生结构上的适应。但后来观察发现，血压水平与左室大小的关系并不十分密切，动脉血压的变化与肥厚程度不完全一致，不少LVH者血压正常。因而有人提出，在LVH的发生发展中，起重要作用的可能不仅仅是血流动力学因素，更主要还有某些神经内分泌因子参与。实验研究提示血管紧张素II（Ang II）可刺激心脏蛋白的合成，而缓激肽（BK）可能具有抗增生效果。血管紧张素转换酶（ACE）在Ang II的产生和BK的降解中是关键酶，因此可能参与心脏生长的调节。研究表明，ACE水平由遗传决定。本研究试图探讨ACE基因多态性与高血压左室肥厚的关系。

资料与方法

一、研究对象

1996年3月至1996年6月期间，在华西医大附一院就诊的高血压病患者104例，年龄30～80岁。同期113例正常人作基因频率检测。高血压的诊断：以发现血压高时的偶测血压值（主要根据病史提供）为依据，根据1978年世界卫生组织建议的标准：正常血压：SBP≤140 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa），DBP≤90 mm Hg；高血压：SBP≥160 mm Hg及(或) DBP≥95 mm Hg；临界高血压：140 mm Hg＜SBP＜160 mm Hg，90 mm Hg＜DBP＜95 mm Hg。高血压病程的确定：以第1次发现血压升高作为病程起点。

病例组：符合上述高血压诊断标准（包括临界高血压），排除继发性高血压。无下列合并症：糖尿病、冠心病、心肌梗塞、充血性心力衰竭、肥厚性心肌病、瓣膜病、先天性心脏病、持续心房颤动、完全性房室传导阻滞、致心律失常性右室发育不良；神经系统异常（包括意识障碍、瘫痪、癫痫）；肾功不全（血尿素氮、肌酐高于正常范围）。

正常组：符合上述正常血压标准（2周内3次非同日偶测血压均不高于140/90 mm Hg），通过询问病史、查体、常规化验及心电图检查，排除器质性疾病。

二、研究方法

1.动态血压监测：符合纳入标准的患者不停药进行24小时动态血压监测（ABPM），ABPM采用无创性携带式动态血压监测仪（美国太空实验室医学产品有限中心生产的90207型ABP监护仪）。袖带缚于受试者非优势臂，自动充气测量的间期规定如下：白天（6:00－18:00）为15分钟，夜间（18:00－6:00）为30分钟。记录并贮存SBP、DBP、平均动脉压（MAP）和心率（HR）值。统计如下指标：24小时平均SBP、DBP、MAP，白天平均SBP、DBP、MAP和夜间平均SBP、DBP、MAP值。

2.心电图（ECG）检测：标准12导联心电图，统计以下指标：V₄导联R波波幅（R_V4）、 V₅导联R波波幅（R_V5）、 V₅导联R波波幅与V₁导联S波波幅之和（R_V5+S_V1），单位为mV。

3.超声心动图（Echo）检测：ATL MK 500超声扫描仪，二维引导下的M型超声心动图按标准方法测出左室舒张末期内径（LVDd）、舒张末期室间隔厚度（IVS）和舒张末期后壁厚度（LVPW），每个数据测量3次，取平均值计算左室大小。根据Devereux和Reichek方程得出左室重量（LVM）：LVM（g）＝1.04［(LVDd+IVS+LVPW)³-(LVDd)³］-13.6，再按身高体重计算体表面积，最后得到左室重量指数（LVMI）：LVMI（g/m²）＝LVM/体表面积。

4.左室肥厚的标准：Echo标准：LVMI：男≥112 g/m² ，女≥104 g/m²。 ECG标准：R_V4≥2.5 mV、R_V5或R_V6≥2.5 mV、R_V5+S_V1≥4.0 mV （男）或3.5 mV（女）。

5.血液样本的采集：每个受检者从肘前静脉抽血5ml置于肝素化试管，用于聚合酶链反应（PCR）检测ACE基因多态性。

6.ACE基因多态性测定：抽提、纯化DNA用经典方法（即酚、氯仿抽提法）。PCR扩增检测ACE基因多态性：正义引物是5'-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT-3',反义引物是5'-GATGTGGCCATCACATTCGTCAGAT-3'。反应终末体积为25 μl。其中，两种引物分别为10 pmol，MgCl₂终浓度为2.5 mmol/L，KCl终浓度为50 mmol/L，Tris-HCl终浓度为20 mmol/L (pH 8.4)，小牛血清终浓度为50 μl/ml，dNTPs混合物终浓度分别为0.2 mmol/L，Taq DNA多聚酶为0.25 u。扩增30个循环，94℃、60秒变性，65℃、60秒退火，72℃、90秒延伸。PCR产物用2％琼脂糖电泳、溴乙淀染色、紫外光检测并照像。引物由北京赛百盛生物工程有限公司合成。

三、统计学分析

左室肥厚与左室正常两组三种不同基因型分析用行×列表χ²检验和合并后用四格表χ²检验，两组年龄、病程、血压、用药时间、LVMI、ACE水平比较用两组均数比较的t检验，吸烟、饮酒、用药病例数用两组率比较的χ²检验。

结果

1.高血压左室肥厚［LVH(＋)］与左室正常［LVH(－)］两组主要是根据超声心动图标准确定:心电图仅3例达到左室肥厚标准。LVH（＋）组男38例，女14例，LVH（－）组男36例，女16例，两组年龄分别为(61.5±10.4)岁和(60.5±11.2)岁（P＞0.50）、高血压病程分别为(11.2±9.8)年和(11.2±9.3)年（P＞0.50）、有吸烟史者分别为9/52例和8/52例（P＞0.50）、有饮酒史者分别为13/52例和12/52例（P＞0.50）、发现高血压时偶测血压分别为SBP (181±17) mm Hg和(175±17) mm Hg（P＞0.05）；DBP(104±13) mm Hg和(106±13) mm Hg（P＞0.20）、治疗过程中血压分别为SBP (146±15) mm Hg和(143±15)mm Hg（P＞0.20）；DBP( 84±10) mm Hg和(86±12) mm Hg（P＞0.20），差异均无