1研究对象病例组60例再障患者均符合第四届全国再障学术会议修订的诊断标准^［1］。其中男32例,女28例,年龄1～70岁;儿童(＜14岁)38例,成人22例;急性再障33例,慢性再障27例。所有病例均排除氯霉素及苯接触史。病例来自1995年4～12月第四军医大学西京医院等6所医院收治的住院患者。对照组为同期正常儿童10名、健康献血员20名,其中男16名,女14名;年龄3～42岁。

2试剂与方法

2.1试剂:巢式聚合酶链反应(PCR)特异性内外引物及B₁₉阳性对照模板由沙特皇家医院研究中心提供。Taq聚合酶系美国Promega公司产品。EBV-DNA、CMV-DNA pCR试剂盒及HBV五项血清标志物酶联免疫试剂盒均购自华美生物工程公司。

2.2DNA提取:同文献［2］。

2.3巢式PCR扩增B₁₉-DNA：同文献［2］。

2.4EBV-DNA、CMV-DNA及HBV五项标志物检测:按试剂盒说明书进行操作。

2.5统计学分析：采用Fisher's精确概率检验和校正χ²检验,经美国SAS统计软件包完成数据处理。

结果

1血清标本B₁₉-DNA检测结果

病例组60例再障患者中16例B₁₉-DNA阳性,阳性率为26.7%。对照组所有标本B₁₉-DNA均为阴性,两组比较，差异有非常显著性意义(P＜0.001)。将B₁₉阳性的16例患者按年龄和诊断分型进一步分组比较。儿童再障38例中阳性9例,阳性率为23.7%；成人再障22例中阳性7例,阳性率为31.8%,两组比较,无显著性差异(χ²=0.147,P＞0.05)。急性再障33例中阳性7例,阳性率为21.2%;慢性再障27例中阳性9例,阳性率为33.3%,两组比较,无显著性差异(χ²=0.582,P＞0.05)。各组与正常对照组比较,均有显著性差异(P均＜0.05)。

2EBV-DNA、CMV-DNA及HBV抗原检测结果

60例再障患者血清中1例EBV-DNA阳性(骨髓EBV-DNA亦为阳性),1例CMV-DNA阳性(骨髓标本未采集到)，2例儿童患者HBsAg和HBeAg同时阳性。该4例患者B₁₉-DNA均为阴性。对照组所有标本均未作EBV和CMV检测。

讨论

近年来病毒感染与再障的关系受到广泛关注。业已证明,与再障发生有关的人类病毒有10余种,其中以肝炎病毒、B₁₉和EBV尤为重要^［3］。最近的国外研究进一步证实,成人及儿童纯红细胞再障的发生均与B₁₉感染密切相关^［4，5］。我们对60例再障患者的外周血进行了B₁₉、EBV、CMV及HBV的系列检测，4种病毒的总阳性率为33.3%,其中B₁₉的阳性率为26.7%，与国外报道一致^［4，5］,明显高于其他病毒,表明B₁₉感染与再障的关系最为密切。将B₁₉阳性的16例按儿童和成人再障及急性与慢性再障进一步比较,无显著差异,而与正常对照比较均有显著差异,提示B₁₉感染有可能是人类再障的重要病毒病因之一。

EBV相关性再障是传染性单核细胞增多症或其他急性EBV感染的少见并发症之一,主要侵犯儿童及年轻人^［3］。我们从1例7岁急性再障患儿的血清和骨髓中均检出EBV-DNA。该患儿发病2个月前有2周持续高热伴咽炎、颈部淋巴结肿大的病史,其后发生血小板减少性紫癜,进而发展为再障,4个月后死亡。本典型病例与Weinblatt^［6］报道的2例颇为相似,提示EBV可能为儿童获得性再障的又一重要病因。我们仅从1例成人慢性再障患者血清中检出CMV-DNA,不能说明再障发生与CMV感染有关,可能系再障患者因免疫功能低下继发CMV感染。

病毒性肝炎相关性再障(HAAA)近年国内外屡见报道,但究竟何种肝炎病毒为HAAA的直接病因目前尚未确定。我们通过检测发现2例急性再障伴HBV活动性感染(HBsAg和HBeAg均阳性),且均为儿童,表明HBV仍为我国儿童HAAA的重要病因之一。

参 考 文 献

1中华医学会血液学会第四届全国再生障碍性贫血学术会议.再生障碍性贫血诊断标准.中华血液学杂志,1987,8(8):封四.

2钱新宏,郑跃杰,焦西英,等.急性特发性血小板减少性紫癜患儿血清人微小病毒B₁₉检测.中华血液学杂志,1997,18:160.

3钱新宏,郑跃杰.病毒相关性骨髓衰竭.国外医学儿科学分册,1997,24:175-177.

4Frickhofen N,Chen ZJ,Young NS,et al.Parvovirus B19 as a cause of acquired chronic pure red cell aplasia.Br J Haematol,1994,87:818-824.

5Kynaston JA,West NC,Reid MM.A regional experience of red cell aplasia.Eur J pediatr,1993,152:306-308.

6Weinblatt ME.Immune thrombocytopenic purpura evolving into aplastic anemia in association with Epstein-Barr virus infection.Am J Pediatr Hematol oncol,1991,13:465-469.

(收稿:1997-09-15修回:1998-03-25)

(校对:张吉贤)