骨髓增生异常综合征（MDS）是一组以血细胞质、量异常和高风险发展成为急性白血病（主要是髓系白血病）为特征的恶性克隆性造血干细胞病^［1］。CD₃₄（细胞表面磷酸化糖蛋白）选择性地表达于早期造血干(祖)细胞，可能起到使造血干(祖)细胞归巢及粘附的作用^［2］。CD₃₄⁺细胞目前已成为研究某些血液病发病机制的热点，现对近年来MDS患者CD₃₄⁺细胞的研究进展综述如下。

1数量及表型

1.1数量变化：Sawada等^［3］用磁珠法分离13例MDS患者及9名正常人的骨髓CD₃₄⁺细胞（3ml骨髓内），MDS组分离出（4.65±4.03）×10⁵个细胞，正常对照组分离出（0.54±0.51）×10⁵个细胞，RA组分离出（2.49±4.04）×10⁵个细胞，RAEB组为（5.98±3.81）×10⁵个细胞，RAEB-t组为（9.13±4.04）×10⁵个细胞。Oertel等^［4］发现MDS患者骨髓有核细胞中CD₃₄⁺细胞较正常对照增高；而原始细胞中CD₃₄⁺细胞却较正常人减少。Fuchigami等^［5］利用流式细胞仪分析42例MDS患者外周血CD₃₄⁺细胞数量变化，正常人32名作为对照组。RA患者CD₃₄⁺细胞数量比正常人显著减少（P ＜0.001）；RAEB及RAEB-t患者CD₃₄⁺细胞数量较正常人显著增高（P＜0.001）；CMML患者CD₃₄⁺细胞数量中等度增高。

1.2表型变化：Sawada等^［6］应用单克隆抗体及免疫磁珠纯化MDS患者及正常人骨髓CD₃₄⁺细胞并研究其表型。MDS患者CD₃₄⁺细胞纯化率与正常人CD₃₄⁺细胞纯化率相同。MDS CD₃₄⁺细胞CD₁₃阳性率明显高于正常人（P＜0.001）；共同表达CD₃₈、HLA-DR、CD₃₃、CD₁₄、CD₃、CD₁₉与正常人无统计学差异。CD₁₃主要表达于粒单核系祖细胞(CFU-GM)，红系祖细胞不表达，这一结果为MDS是由CD₃₄⁺细胞分化的髓系缺陷提供了直接依据，同时也解释了MDS祖细胞红系中、低水平克隆形成的机制。90年代初期，人们已经认识到MDS细胞表面标记CD₃₄、CD₃₃、CD₁₃均增高，尤其在RAEB、RAEB-t向白血病转化型中尤为突出，提示从RA到RAEB-t预后差。

上述结果表明，MDS患者骨髓及外周血单个核细胞中CD₃₄⁺细胞多于正常人，而原始细胞中CD₃₄⁺细胞较正常人少，提示可能存在异常的细胞群。MDS CD₃₄⁺细胞主要共同表达CD₁₃，提示向髓系分化的趋势占优势。

2核型改变Haase等^［7］在研究MDS CD₃₄⁺细胞核型时发现，有1例RA患者骨髓单个核细胞核型为46,XX,del［15］［3q33］，在CD₃₄⁺/CD₁₁₇^-细胞有正常和异常分裂嵌合体；另1例RA患者骨髓单个核细胞核型为46,XX,CD₃₄⁺/CD₁₁₇^-细胞只有正常分裂相；1例继发性MDS-RA患者骨髓单个核细胞核型为46,XX,del［5］(q15133);46,idem,del(17)(p12);46,idem,17p^-,add(17)(p13);45,idem,17p^-, add(17)，-20; 46, idem, -7,17p^-，add［17］，CD₃₄⁺/CD₃₈⁺及CD₃₄⁺/CD₃₈^-细胞均为异常核型分裂相。Mehrotra等^［8］用免疫荧光原位杂交技术（FISH）分析MDS患者（RA 1例、RAEB-t 2例）核型，其中RAEB-t骨髓单个核细胞核型为47,XX,+8,+9［19］;48,XX,+8，+9［1］，CD₃₄⁺lin^-细胞核型异常者占0.16%；另外1例RAEB-t患者的骨髓单个核细胞核型为45,XY,der［6］×2,inv［16］［p13q22］,-18,-20,-21,+mar1,+mar2［cp20］，CD₃₄⁺lin^-细胞核型异常者占0.01%，CD₃₄⁺lin⁺细胞核型异常者占0.03%；RA患者骨髓单个核细胞核型为45,XX,der［9］t［9;?11］［p22:q23］,-11,del［14］［q24q32］［12］/90,idem×2［1］;46,XX,［12］，CD₃₄⁺lin^-细胞核型异常者占0.05%，CD₃₄⁺lin⁺细胞核型异常者占0.03%。由此表明，MDS CD₃₄⁺细胞存在核型异常且发生在早期。

3受体表达造血因子受体共分为三类：①免疫球蛋白超基因家族；②酪氨酸超基因家族；③细胞因子受体超基因家族。正常人骨髓CD₃₄⁺细胞表达flt-3受体、IL-6受体、干细胞生长因子受体（C-kit）及较弱表达粒细胞集落刺激因子受体、单核细胞集落刺激因子受体、血小板生成素受体（TpoR）、红细胞生成素受体（EpoR）^［9，10］。

近来，Shinjo等^［11］应用流式细胞仪通过¹²⁵I-Epo定量测定正常人CD₃₄⁺细胞EpoR，发现CD₃₄⁺CD₃₈^-细胞EpoR含量最高，达1600位点/细胞，其次是CD₃₄⁺CD₃₈⁺和CD₃₄^-CD₃₈^-细胞。

Backx等^［12］对15例MDS患者CD₃₄⁺细胞EpoR进行研究，发现无论在低危组还是高危组中，均有少数患者不能同时表达CD₃₄、EpoR，而另一些患者几乎所有CD₃₄⁺细胞均同时表达EpoR。与正常组比较发现，MDS表达EpoR、CD₃₄⁺细胞数与红系缺陷无明显相关性；MDS CD₃₄⁺细胞所表达EpoR与正常人一样为全长EpoR。这一结果证明MDS红系缺陷不能用EpoR数量异常来解释，而MDS患者表现Epo水平增高可能是由于配体结合信号、受体本身功能缺陷或受体下游信号异常所致^［12］。在这项研究中还发现一例RAEB-t患者CD₃₄⁺细胞同时表达C-kit受体（80%）。

4细胞凋亡的研究

4.1bcl-2与c-myc：bcl-2基因编码细胞浆bcl-2蛋白，此蛋白位于线粒体内质网和核膜内，通过阻断凋亡以延长造血细胞生存。与之相反，c-myc对造血细胞及成纤维细胞有促进凋亡及促分裂作用，在细胞生长因子依赖细胞系，c-myc过度表达促进无细胞因子细胞系凋亡。通过反义寡核苷酸阻止凋亡实验证实，c-myc过度表达是凋亡起始的必要因素^{［13，14］}。

MDS无效造血机制目前尚不清楚，然而在组织学上应用形态学技术及原位末端标记技术证实，MDS患者凋亡细胞数量明显增加。Rajapaksa等^［14］通过流式细胞仪测定sub-G₁ DNA片段及凋亡相关癌基因蛋白在CD₃₄⁺细胞的表达，来推测MDS、正常人群及急性髓系白血病（AML）患者的凋亡水平。结果显示，RA/RAS患者CD₃₄⁺细胞sub-G₁DNA水平较正常人及AML患者增高，RAEB/RAEB-t患者与正常人及AML患者CD₃₄⁺细胞sub-G₁ DNA都呈低水平表达，尽管CD₃₄⁺细胞sub-G₁DNA从RA到RAEB有下降趋势，但不具显著性差异。在CD₃₄⁺细胞表达bcl-2水平顺序为：正常人、AML、MDS、RAEB/RAEB-t之间近似并高于RA/RAS；c-myc表达强弱顺序为：正常人＞RA/RAS＞RAEB/RAEB-t＞AML。c-myc/bcl-2比率顺序为：RA/RAS＞正常人＞RAEB/RAEB-t＞AML。用G-CSF、Epo治疗MDS贫血患者，当血红蛋白及粒细胞上升后再测定sub-G₁DNA，7例接受治疗的患者sub-G₁DNA减少。

Cortelezzi等^［15］利用双重彩色直接免疫荧光法测定MDS CD₃₄⁺细胞bcl-2表达，显示MDS与正常人无差异。但是在低危组与高危组之间存在显著差异，与Rajapaksa的结果相同。

4.2Fas（Apo-1/CD₉₅）表达：Fas（Apo-1/CD₉₅）是细胞表面蛋白，它属于肿瘤坏死因子及神经生长因子受体超级家族，当Fas被Fas配体或抗Fas抗体交叉结合时可以传递细胞死亡信号。Bouscary等^［16］用流式细胞仪检测MDS CD₃₄⁺细胞Fas表达，结果显示：正常人骨髓CD₃₄⁺细胞不表达Fas,而MDS CD₃₄⁺细胞表达Fas高于正常人（P=0.013）；Fas表达与FAB分型及Bournementh评分或与外周血细胞减少情况无相关性；MDS CD₃₄⁺细胞Fas表达与骨髓原始细胞数呈负相关。表明白血病细胞可能在骨髓异常发育过程中丢失了Fas。

5造血因子对CD₃₄⁺细胞的影响

5.1体外培养：Sawada等^［17］用单克隆抗体和免疫微磁珠方法纯化18例MDS患者骨髓的CD₃₄⁺细胞，将这些细胞于无血清含rIL-3、rGM-CSF、rG-CSF、rM-CSF、rEpo条件下培养，发现rM-CSF、rG-CSF、rGM-CSF对MDS非红系祖细胞起到最有效的增殖刺激作用，其中11例高危组患者未分化的原始细胞数增加；在这3种造血因子基础上再加用rIL-3