材料和方法
1研究对象
1.1病例选择:AIHA患者24例,其中男13例,女11例;未缓解16例,缓解8例;年龄15~55岁,中位32岁。均符合张之南主编《血液病诊断及疗效标准》所制定的诊断标准[1]。
1.2正常对照组:正常人24名,其中男14名,女10名,年龄18~54岁,中位33岁。
2NK细胞活性测定按125I-UdR释放法[2],先用125I-UdR标记K562细胞作为靶细胞,取外周血4ml,肝素抗凝,用聚蔗糖-泛影葡胺分离液所分离的淋巴细胞作为效应细胞。效靶比例为100∶1,混匀后置37℃、CO2中孵育18小时,加入胰酶及DNA酶(置37℃水浴30分钟,中止反应。用γ计数器测定上清液细胞管的放射性核素每分钟计数值(c),按下列公式计算NK细胞活性(%)(即125I-UdR释放%):
结果
1正常对照组24名正常人外周血NK细胞活性为34.26%±8.97%。
2AIHA组24例AIHA患者外周血NK细胞活性为21.64%±9.73%,显著低于对照组(P<0.001)。
316例未缓解AIHA患者外周血NK细胞活性为16.27%±5.98%,显著低于正常对照组(P<0.001);缓解8例AIHA患者外周血NK细胞活性为31.98%±9.65%,与正常对照组相比,无显著差异(P>0.05),未缓解期患者外周血NK细胞活性也显著低于缓解期的NK细胞活性(P<0.001)。
讨论
AIHA是通过免疫机制而发生的一种获得性溶血性贫血,其发病系由于体内产生自身抗体和(或)补体吸附于红细胞表面,导致红细胞破坏。NK细胞是一种重要的免疫细胞,它在抗病毒感染中起着关键作用,AIHA的发病可能与病毒感染有关,AIHA患者NK细胞活性减低,将增加对病毒感染的敏感性,可能促使AIHA的发病。另外,AIHA的发病主要是由于红细胞表面产生了抗红细胞的抗体,而NK细胞具有抑制B细胞表面分泌抗体的功能[3],NK细胞活性减低,B细胞分泌抗体增多,有可能促使AIHA的发病。
Conte[4]等研究了9例AIHA患者NK细胞活性及表面标记情况,发现AIHA患者NK细胞活性显著低于正常对照组,与我们测定结果一致,并发现外周血标记leu7 (CD57)和CD16抗原的细胞数目在正常范围,推测AIHA患者NK细胞活性减低的原因是由于NK细胞功能异常,而NK细胞数目在正常范围。
AIHA患者NK细胞活性随病情而变化,未缓解者外周血NK细胞活性明显低下,缓解者外周血NK细胞活性上升至正常水平。我们认为NK细胞活性的变化可作为了解AIHA患者病情变化的指标。
参 考 文 献
1张之南主编.血液病诊断及疗效标准.天津:天津科学技术出版社,1991.101-104.
2王球达,全宜德,林飞卿.天然杀伤(NK)细胞的研究.125I-UdR释放试验和正常人外周血淋巴细胞的NK活性.上海免疫学杂志,1983,3:272-276.
3Brieva JA,Jargan S,Stevens RH.NK and T cell subsets regulate antibody production by human in vivo antigen induced lymphoblastoid B cells.J Immunol,1984,132:611-615.
4Conte R,Dinota A,Jazzari PI,et al.Analysis of NK cells in patients with idiopathic autoimmune hemolytic anemia.Vox Song,1989,56:270-273.
(收稿:1996-12-23)
(校对:王汝瑞)
