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Subject headingsliver neoplasms; p53 gene; p21 gene; nm23 gene; gene expression; prognosis; proliferating cell nuclear antigen
用免疫组化方法检测P53、P21、nm23和PCNA在原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma, PHC)中表达与预后的关系，并探讨PHC的某些致癌机制.
1材料和方法
1.1材料 由浙江医科大学病理学教研室提供PHC根治手术切除并经病理学证实为PHC标本共31例.另取正常对照6例(因胆囊炎或其他胃肠肿瘤手术的肝活检并经病理证实)；不伴PHC的肝硬变6例及癌旁肝硬变20例作肝硬变对照；空白对照为一抗以TBS代替(余步骤完全相同)；已知PCNA，P53，P21和nm23标记阳性的大肠癌切片作阳性对照.
1.2方法用S-P法检测PCNA，P53，P21和nm23蛋白.结果判断：①整个切片中癌组织观测10个高倍镜视野发现表达的阳性细胞≥5个的列为P53和P21阳性.②P53和PCNA只有核染色者定为阳性，nm23和P21胞质染色定为表达阳性.③肿瘤细胞染色强度明显大于周围非瘤组织为nm23阳性；染色比周围非瘤组织要低为nm23阴性.④PCNA标记指数(LR)≥40%作为PCNA LR高表达组，＜40%作为PCNA LR低表达组.
2结果
原发性肝细胞癌PCNA LR, P21,P53和nm23表达与肿瘤大小、Edmondson分级、HBsAg,AFP,癌周肝硬变、术后复发、肿瘤大小及有无转移无明显关系，除nm23与PHC转移有关(P＜0.05)和PCNA与PHC术后复发相关(P＜0.05)外. pHC患者PCNA LR与P21相关生存曲线见图1，PHC患者P53与nm23相关生存曲线见图2.
图1PHC高PCNA LR与低PCNA LR组和P21阳性与阴性组生存率曲线.
图2PHC患者nm23阳性与阴性组和P53阳性与阴性组的生存率曲线.
3讨论
分析生存率曲线，发现单独检测P53虽然P53阴性患者生存率一般要高于P53阳性者，但检验无显著性差异，联合检测P53和P21则两组差别经检验有显著性差异，这对提高PHC预后判断有一定的临床意义.本文研究表明：①PCNA与PHC术后复发相关，与术后生存率负相关.②P53阴性者生存率一般要高于P53阳性者，联合检测可提高对PHC的预后判断能力.③P21与PHC的术后生存率负相关. ④nm23表达与PHC转移呈负相关，与术后生存率正相关.
通讯作者叶晟
收稿日期1998-08-27
