induced rat liver injury

Cai DY, Chen JC, Zhao G, Ye GM, Bing FH, Chen jX

Protective effect of zijin capsule on D-galactasamine hydrochloride induced rat liver injury

cAI Da-Yong, CHEN Jia-Chun, ZHAO Gang, YE Gen-Mei, BING Fei-Hong and CHEN Jin-Xing department of Pathology, Hubei College of Traditional Chinese Medicine, wuhan 430061, Hubei Province, China

Subject headings hepatitis, toxic/prevention & control; galactosamine/toxicity; swertiamarin/therapeutic use; oleanolic acid/therapeutic use; disease models, animal

Abstract

AIM To confirm the effect of Zijin capsule in preventing rat liver injury induced with D-galactasamine hydrochloride.

mETHODS Rat liver injury models were induced with D-galactasamine hydrochloride (0.8 g/kg) ip daily for two days. Compared with biphenyl diocarboxylate (40.5 mg/kg) by

liver functions and morphometry on the models, Zijin capsule was given at three doses(2.8,

14.1 and 22.6 g/kg) intragastrically, the others were same as those in the model group.

nS was given to the normal group. The liver functions were examined with biochemistry

and expressed as ±s. The liver morphometry was observed under microscope and

expressed as _i for hepatic lobule ratio or hepatic lamina ratio, as ±s for normal hepatic

nuclear and infiltrated inflammatory cells.

rESULTS Zijin capsule could reduce the TBil from 57.6 μmol/L±4.9 μmol/L to

7.2 μmol/L±0.9 μmol/L or less, Tcoag from 1385s±125s to 1046s±34s or less and

aLT from 337.4±95.3 to 89.3±15.3 μmol/min or less, and maintain the content of total

protein from 49.2 g/L±2.2 g/L to 57.2 g/L±2.1 g/L or more or albumin from 30.0 g/L±1.6 g/L

to 39.7 g/L±1.7 g/L or more in serum. The capsule could reduce the ratio of hepatic

lobule from 73.7 to 71.2 or less or hepatic lamina from 58.8 to 51.4 or less, maintained

the number of hepatocytes from 239.8±62.6 to 306.0±56.6 or more, and minimized the

infiltrated inflammatory cells from 339.1±50.2 to 100.7±23.2 or less.

cONCLUSION Zijin capsule can protect against the rat liver injury induced with

d-galactasamine hydrochloride.

主题词 肝炎，中毒性/预防和控制；半乳糖胺/毒性；獐牙菜苦素/治疗应用；齐墩果酸/治疗应用；疾病模型，动物

中国图书资料分类号 R 575.1

摘 要

目的 研究紫金胶囊对D-氨基半乳糖(D-GlaN)致大鼠肝损伤的保护作用.

方法 Wistar大鼠造型：D-GlaN(0.8 g/kg)，ip，1次/d, 连续2 d；生理盐水

10 ml/kg，ig,2次/d，连续3 d. 设空白组，单纯中药组(14.1 g/kg)，联苯双酯(40.5 mg/kg)阳性对照组，紫金胶囊低、中、高剂量组(2.8、14.1、22.6 g/kg). 自动生化分析仪上检测血清的总胆红素含量、凝血酶原时间、总蛋白含量、白蛋白含量及ALT活性，组间对比t检验.观察形态结构，作肝小叶百分比、肝细胞索百分比、存活肝细胞核和慢性炎细胞核的形态计量，组间对比q检验或t检验.

结果 紫金胶囊明显降低血清总胆红素含量(μmol/L，从57.6±4.9到7.2±0.9以下)，缩短凝血酶原时间(s, 从1385±125到1046±34以下)，升高血清总蛋白含量(g/L，从49.2±2.2到57.2±2.1以上)，升高血清白蛋白含量(g/L，从30.0±1.6到39.7±1.7以上)及降低血清ALT活性(μmol/min,从337.4±95.3到89.3±15.3以下)；紫金胶囊明显降低肝小叶百分比(从73.7到71.2以下)和降低肝细胞索百分比(从

58.8到51.4以下)，增加存活肝细胞数(从239.8±62.6到306.0±56.6以上)并降低炎性细胞数(从339.1±50.2到100.7±23.2以下).

结论 紫金胶囊对D-GlaN致大鼠肝细胞损伤具有保护作用.

0 引言

全以肝功能生化检测及形态计量方法观察了紫金胶囊对D-GlaN致大鼠肝损伤的保护作用.

1 材料和方法

1.1 材料 紫金胶囊：用生理盐水溶解紫金胶囊内容物，使每毫升溶液含生药5 g. 联苯双酯：中国医学科学院药物研究所实验药厂产品(批号910743). d-GlaN盐酸盐：广州专利技术开发公司产品(批号8865). 动物处理：Wistar大鼠84只，体重

60 g～120 g，雌雄各半，普通饲养，性别体重分层后随机分7组，每组12只.处理如下：①空白组：生理盐水(NS)10 ml/kg，ip，1次/d，连续2 d；NS 10 ml/kg,

ig,2次/d，连续3 d. ②单纯中药组：NS 10 ml/kg,ip,1次/d，连续2 d；紫金胶囊按生药计14.1 g/kg，ig,2次/d，连续3 d. ③造型组：D-GlaN 0.8 g/kg,ip,

1次/d，连续2 d；NS 10 ml/kg, ig, 2次/d, 连续3 d. ④阳性对照组：D-GlaN

0.8 g/kg, ip,1次/d, 连续2 d; 联苯双酯组：联苯双酯40.5 mg/kg,ig,2次/d，连续3 d，余同造型组. ⑤、⑥、⑦为低、中、高剂量治疗组：D-GlaN 0.8 g/kg,

ip,1次/d,连续2 d；紫金胶囊生药分别为2.8 g/kg, 14.1 g/kg，22.6 g/kg，ig,

2次/d，连续3 d. 第2次ip后3 d，第6次ig后1 d，断头处死动物，留血清检测肝功能指标；取肝脏固定于50 g/L甲醛溶液中，做病理检查.

1.2 方法 ①肝功能检测：在生化自动分析仪上检测血清总胆红素含量(TBil)、凝血酶原时间(Tcoag)、总蛋白含量(TP)、白蛋白含量(Alb)及血清ALT活性.数值作组间对比t检验.②病理观察【大体形态】：处死动物取材固定时进行肉眼观察.

【组织结构】：固定24 h后常规石蜡包埋切片，HE染色.各组织块同步处理，载玻片规格一致，在同一显微镜上观察病变性质，选定形态计量指标.【形态计量】：采用同一目镜测微尺(C⁵ 10×10μm²或100个方格交叉点)，对每一切片随机取6个视野计数. 计数前封组号.重新随机编号观察记录各数值，全部测量完成后，开封对组号进行统计分析. 肝小叶百分比：在10×10倍镜下，分别计数落入肝小叶、汇管区内的方格交叉点，计算肝小叶占肝组织的构成百分比，平方根反正弦变换，方差分析、q检验. 肝细胞索百分比：在40×10倍镜下，计数落在肝细胞索或肝窦内的方格交叉点，计算肝细胞索占肝小叶的百分构成比，平方根反正弦变换，作方差分析和q检验. 存活肝细胞核、慢性炎细胞(包括巨噬细胞、淋巴细胞和浆细胞)核的校正值：在40×10倍镜下，计数每一目镜测微范围内的存活肝细胞核数和慢性炎性细胞核数，将所得数值乘以自身的肝小叶百分比与肝细胞索百分比之积，再除以空白组平均的肝小叶百分比与肝细胞索百分比之积，即为校正值，以消除水肿、充血、变性等占位因素的影响，然后进行t检验.

2 结果

2.1 肝功能生化检测 ①血清TBil(μmol/L)：结果表1与空白组比较，联苯双酯组无差别，单纯中药组和高剂治疗组明显降低，其他各组明显升高.与单纯中药组比较，高剂治疗组无差别，其他各组明显升高.造型组比各组明显升高，统计学差别有高度显著性.联苯双酯组比中、低剂治疗组明显降低，比高剂治疗组明显升高. 低剂治疗组明显高于中、高剂治疗组.中剂治疗组高于高剂治疗组. ②tcoag(s)：结果表2与空白组比较，单纯中药组无差别；造型组、联苯双酯组和低剂治疗组延长，中剂治疗组、高剂治疗组明显缩短.单纯中药组比中、高剂治疗组长，比造型组、联苯双酯组和低剂治疗组短.造型组比各组明显延长. 联苯双酯组比低、中、高剂治疗组明显延长.低剂治疗组比中、高剂治疗组延长. 中剂治疗组与高剂治疗组无差别. ③血清TP含量(g/L)：结果表3空白组与高剂治疗组无差别；明显高于其他各组.单纯中药组与低剂治疗组无差别；低于空白组与高剂治疗组，明显高于其他三组. 造型组比各组明显降低.联苯双酯组低于低、中、高剂治疗组.低剂治疗组明显高于中剂治疗组，同时高于高剂治疗组. 中剂治疗组低于高剂治疗组. ④血清Al