目前已知在乙型肝炎病毒(HBV)的致癌过程中，HBV X基因及其产物X蛋白(pX)具有重要意义。虽然X基因的转基因小鼠可诱发肝癌(HCC)的发生[1]，pX对多种癌基因均具反式激活作用[2]，且pX有与p53蛋白结合的作用，在蛋白水平使靶细胞中抑癌基因及其产物的功能发生改变，但迄今为止pX的确切致癌机制仍不清楚。由于DNA的复制与转录、蛋白质的翻译和信号的传导等诸多代谢过程都是各种蛋白相互作用的结果，因此，寻找鉴定细胞内能与HBV pX相互作用的X相关蛋白(X-associated protein XAP，或X-interacting protein xIP)成为目前探讨HCC与pX关系研究的热点之一，并已取得初步结果。

一、XAP筛选的方法

迄今为止，有关XAP筛选的方法多采用酵母双杂交体系(yeast two-hybrid system)，其基本原理是将HBV X基因与酿酒酵母GAL4蛋白的结合结构域基因融合构成杂交体，将来自人体细胞的cDNA文库同转录激活结构域基因融合成一个杂交体cDNA文库，然后将含X基因的杂交体和杂交体文库一起转化酵母，通过检测酵母中报告基因是否表达及其表达水平，从而在cDNA文库中筛选出与pX相互作用的XAP基因。

目前酵母双杂交体系的实验方法已逐渐成熟，主要步骤包括构建并检测钓饵质粒，筛选作用融合蛋白的质粒库，排除假阳性及对真阳性分析测序等[3]，其中假阳性的排除与真阳性的鉴定至为重要。由于酵母双杂交体系研究蛋白之间相互作用的整个过程只对核酸进行操作，不需分离纯化蛋白的过程，且蛋白之间的相互作用发生在酵母细胞这一自然的状态下，因此反应的灵敏度较高。

二、XAP的研究现状

运用酵母双杂交体系，迄今已筛选出多个能与pX相互作用的XAP，并对其序列与性质进行了初步分析。……

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收稿日期：1999-08-13