关键词： 肺腺癌；树突状细胞；预后

【摘要】目的研究肺腺癌组织中树突状细胞（DC）的浸润程度及对预后的影响。方法将S-100蛋白作为DC特异性标记物，应用免疫组织化学方法检测肺腺癌组织中DC分布。结果46例肺腺癌中，DC显著浸润者19例，5年生存率61％，无或轻度浸润者27例，5年生存率21％。低分化腺癌26例，显著浸润者10例，5年生存率57％，轻度浸润者16例，5年生存率16％。经Log-rank检验，在显著浸润和轻度浸润组二者之间差异有显著性。结论肺腺癌组织中树突状细胞显著浸润的预后明显好于轻度浸润的病例。

Dendritic cell infiltration in lung adenocarcinoma and its effect on prognosis

GONG Xuanju，YAN Yuhu，WU Jianping.

（Department of Pathology, Cancer Hospital of Hubei Province, Wuhan 430070,China）

【Abstract】ObjectiveTo study the infiltration degree of dendritic cells in lung adenocarcinoma and its effect on prognosis.Methods S-100 protein was used as the specific marker for dendritic cells,and immunohistochemistry was employed to detect the distribution of dendritic cells in lung adenocarcinoma. ResultsAmong 46 cases of lung adenocarcinoma, 19 were markedly infiltrated by dendritic cells,the five-year survival rate being 61%;27 showed slight infiltration,the five-year survival rate being 21%.Among the 46 cases of adenocarcinoma, 26 were low differentiated adenocarcinoma, in which 10 were infiltrated markedly by dendritic cells,five-year survival rate being 57%;and 16 were slightly infiltrated,five-year survival rate being 16%. These data were evaluated with the log-rank test,which showed a significant difference between the markedly infiltrated group and the slightly infiltrated group.Conclusion The prognosis of lung adenocarcinoma which markedly infiltrated by dendritic cells is better than that of slightly infiltrated by dendritic cells .

【Key words】Lung adenocarcinoma;Dendritic cell;Prognosis

对于树突状细胞（DC）的实验和临床研究，国外甚热，国内近年来开始涉足这一领域^［1-3］。S-100蛋白阳性标记的DC主要于肿瘤组织内和癌性间质中散在分布，很少见于周围肺组织。这种细胞同肿瘤细胞紧密接触，呈褐黑色。其形态学上有一个不规则的核，胞浆呈分枝状突起，形似树突状，因此而得名树突状细胞。我们对手术切除的肺腺癌组织中DC的浸润程度及对生存与预后的影响，作了如下研究。

材料与方法

一、材料

材料来源于1978年～1994年间湖北省肿瘤医院手术切除的肺腺癌病例共46例。为了便于分析比较，选择的病例在治疗方式及临床分期上均一致（T₂N₀M₀）^［4］。所有病例都获得随访及生存时间的统计。全部病例的组织切片均为原发肿瘤病理切片。

二、方法

对肿瘤组织中DC的标记，采用免疫组织化学的方法即S-100蛋白阳性的方法进行研究。由于DC内也存在S-100蛋白，因此，将S-100蛋白作为DC的特异性标记物^［5］。免疫学方法采用链霉生物素-过氧化物酶连结法。首先切片脱蜡至水；然后通过3％H₂O₂在室温下5 min以灭活内源性酶；经血清封闭组织；然后依次滴加S-100抗体，室温下2 h；羊抗IgG室温下15 min；链霉亲和素复合物室温下15 min；每步后经磷酸缓冲液反复冲洗，最后经3，3-二氨基联苯胺显色、封片。所有试剂采用武汉博士德生物公司提供的即用型试剂盒。S-100蛋白阳性标记的树突状细胞在肿瘤组织中的浸润程度是依据Furukawa等^［6］提出的分级标准：0～20个阳性细胞为无或轻度浸润；20个以上为显著浸润。生存曲线是通过Kaplan-Meier方法获得^［7］。预后因素通过Log-rank检验分析^［8］。

结果

46例肺腺癌中，依据DC浸润的程度分为2组。即DC在瘤组织内显著浸润组和DC在瘤组织内无或轻度浸润组。DC显著浸润者19例,占41%。存活最长8年，最短2年，平均4.3年，5年生存率为61％。DC无或轻度浸润者27例，占59%。存活最长5年，最短不到1年，平均存活2.9年，5年生存率21％（χ²＝6.53，P＜0.05）。46例腺癌中高分化腺癌20例，其中显著浸润者9例，占45％，5年生存率为62%。无或轻度浸润者11例，占55％，5年生存率为33%（χ²＝1.80，P＞0.05）。低分化腺癌26例，其中显著浸润者10例，占38%，5年生存率为57%。无或轻度浸润者16例，占62%，5年生存率16％（χ²＝4.70，P＜0.05）。

本组研究的结果显示，DC显著浸润组与DC无或轻度浸润组5年生存率比较，经Log-rank检验，二者差异有显著性。46例腺癌中低分化腺癌26例，其中显著浸润者与无或轻度浸润者5年生存率比较，经Log-rank检验二者差异有显著性。高分化腺癌20例，其中显著浸润者与无或轻度浸润者5年生存率比较,经Log-rank检验，二者差异无显著性。本研究还对手术切除肺腺癌患者清扫的区域淋巴结进行了研究。结果显示区域淋巴结内DC反应的情况，无论在高分化腺癌或低分化腺癌中对病人的生存均无明显影响（P＞0.05）。

讨论

能够手术切除的肺癌病人，尽管其病理类型及临床分期一样，但术后病人的生存时间却明显不同。这提示机体内部的免疫功能对肿瘤的发生、发展及限制有一定的作用，这一作用随着免疫学研究的不断深入而进一步得到证实。较多的研究发现，大部分外科切除的实体瘤内的DC浸润程度与患者的预后有关。瘤内浸润的DC数量多，则患者的预后好，反之亦然。提示瘤内DC与肿瘤的发生、发展有密切的关系。Tsujitani等^［9］研究了210例手术切除的胃腺癌患者，结果表明DC即S-100蛋白阳性显著浸润的82例患者5年生存率为60.4%，而轻度浸润的128例患者5年生存率为18.8%^［6］。类似的结果也见于对结、直肠腺癌及食道癌的研究^［5］。Furukawa等^［6］研究了40例手术切除的肺腺癌组织内DC的浸润情况，结果显示，显著浸润的22例患者中，其5年生存率为86.4%，而无或轻度浸润的18例患者5年生存率为38.9%^［5］。

关于DC参与肿瘤免疫的机制，据目前研究的材料提示，DC不能直接杀伤肿瘤细胞，但它的最大特点是能够显著刺激初始型T细胞(native T cells)增殖。在机体的细胞免疫和体液免疫中起重要的调控作用^［3］。

综上所述,研究结果显示，瘤组织内DC显著浸润的病例其生存与预后要比轻度浸润的病例好，在低分化腺癌更为明显。虽然影响肿瘤病人的预后有诸多因素，但DC的浸润及其对肿瘤的影响，从目前的研究资料来看可能是一个重要的因素。当然对DC的研究还处于实验阶段，进一步的研究将揭示其真正面目。

参考文献

［1］Schuler G,Steinman RM.Dendritic cells as adjuvants for immune- mediated resistance to tumor.J Exp Med, 1997,186：1183-1188.

［2］Adema GJ,Hartgers F,Verstraten R,et al.A dendritic-cell-derived c-c chemokine that preferentially attracts native T cell. Nature, 1997,387:713-718.

［3］曹雪涛.树突状细胞的基础与临床研究新进展. 中国免疫学杂志,1998 ,3：161-168.

［4］中华人民共和国卫生部医政司,主编.中国常见恶性肿瘤诊治规范. 第2版.北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社出版,1991.17.

［5］Lu L,Qian S,Hershberger PA,et al.Fas ligand(CD95L) and B7 expressoin on dendritic cells provide counter-regulatory signals for T cell survival and proliferation. J Immunol,1997,158:5676-5680.

［6］Furukawa T,Watanabe S,Kodama T,et al.T-zone histiocytes in adenocarcinoma of the lung in relation to postoperative prognosis. Cancer, 1985,56:2651-2657.

［7］Kaplan EL，Mejer P. Nonparametric estimation from incomplete observations. J Am Stat Assoc，1958,53:457-481.

［8］Peto R,Pike MC,Armitage P,et al. Design and analysis of randomized clinical trials requiring prolonged observation of each patient. Bri J Cancer,1977,35:31-39.

［9］Tsujitani S,Kakeji Y,Watanabe A,et al. Infiltration of dendritic cells in relation to tumor invasion and lymph node metastasis in human gastric cancer. Cancer, 1990,66:2012-2016.

(收稿日期：1999-12-17)