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乳牛血清中类人HBV调查研究

2022-07-29
来源:求医网
人乙型肝炎病毒(HBV)与鸭、土拨鼠、地松鼠肝炎病毒同属嗜肝DNA病毒科(Hepadinaviridae)[1~3]。在乳牛中调查类人HBV国内曾有报道[3~6],检测方法较多,但用聚合酶链反应(PCR)检测乳牛血清中类人HBV还未曾见报道。为了进一步弄清乳牛血清中的类人HBV生物学特性,我们用人HBV血清学检测试剂EIA检测了106头乳牛血清HBV标记物,并对阳性血清用人PCR HBV试剂盒作了类人HBV检测,现将调查研究结果报告如下。

1材料与方法

1.1待测乳牛血清106份乳牛血液由我们协同本市畜牧兽医站从乳牛场采集,分离血清置于-30℃冰箱保存。

1.2EIA试剂盒HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc检测试剂盒,由上海实业科华生物技术有限公司生产,批号:960815。

1.3PCRHBV检测试剂盒华运生物技术研究所生产,批号960908。

1.4检测方法EIA方法参照使用说明书,结果经酶标仪检测判断;PCR方法:标本经处理后,选择S基因区a抗原决定簇为引物,将标本置于DNA扩增仪中扩增,点样于琼脂糖凝胶上进行电泳,最后于紫外仪上观察结果。详细参见试剂盒使用说明。

2结果

2.1106份乳牛血清经用EIA检测HBsAg阳性9份,阳性率8.50%;抗-HBs阳性7份,阳性率6.60%,且两种阳性互不交叉;106份血清经HBeAg、抗-HBe、抗-HBc三项指标检测,均为阴性。

2.29份HBsAg阳性乳牛血清经PCR HBV反复检测全部为阴性,后又对抗-HBs阳性的7份乳牛血清作了PCR HBV检测,也均为阴性。

3讨论

乳牛血清中的类人HBV在形态结构和生物学特性等方面,近年来已有许多国内同行作过调查研究[3~6]。HBsAg和抗-HBs阳性的乳牛血清进行PCR HBV反复检测后,全部为阴性,证明这种病毒与人HBV的抗原性虽然紧密,但在DNA核苷酸序列和结构上存在差异,而非人HBV。

这次调查16份HBsAg和抗-HBs阳性的乳牛血清,还不曾发现在同一份标本中同为阳性的结果,这与人HBV标志物的检测结果类似,这种乳牛抗-HBs与相对应的HBsAg可能具有中和作用,是一种保护性抗体。此次调查还发现本地的乳牛HBsAg阳性率与有些文献报道[3,4,6,]相比较低,且乳牛HBeAg、抗-HBe、抗-HBc均阴性,这种情况可能与病毒地区分布差异和病毒型别等因素有关。

(本项工作承蒙淮阴市畜物兽医站俞阿凤、市兽医卫生监督厅王蓓和乳牛场等同志的大力协助,谨致谢意。)

参考文献

1.瞿涤等.七个鸭种携带鸭乙型肝炎病的研究.中华传染病杂志,1986,4(3):133.

2.王培龙等.用人HBV血清学试剂检测143份鸭血清结果分析.中华流行病学杂志,1988,9(1):45.

3.方宇等.乳牛血清中乙型肝炎病毒样病毒颗粒的研究.解放军医学杂志,1998,13(2):98.

4.刘士均等,用EIISA和IEM技术检测257头奶牛血清中类人乙肝病毒的实验研究.中国人兽共患病杂志,1987,3(3):27.

5.王培龙.家畜血清HBsAg调查.中华流行病学杂志,1986,7(4):202.

6.武建国等.乳牛血清中人HBV样颗粒性质的初步研究.中国人兽共患病杂志,1989,5(4).20.