关键词： 猪囊尾蚴；中药；吡喹酮；丙硫咪唑；透射电镜；超微结构

摘要目的观察中药在体外抑制猪囊尾蚴的超微结构变化。方法用透射电镜观察中药灭囊灵醇提取物、吡喹酮和丙硫咪唑体外作用于猪囊尾蚴的变化。结果中药组和吡喹酮组虫体皮层、基底膜、肌层和实质层细胞均明显受损，中药组对神经索的损伤作用强于吡喹酮。丙硫咪唑组虫体各层次细胞损伤均明显低于中药组和吡喹酮组。结论中药灭囊灵对猪囊尾蚴具有明显的杀伤作用。

OBSERVATION ON ULTRASTRUCTURE CYSTLCERCUS CELLULOSAE

TREATED WITH CHINESE MATRIA MEDICA IN VITRO

Chen ZhishuiJia DanbingNie ZhiweiLu Yao

Yan HongSun QiliWang HeZhao FenglianWang Yun xiang

(211 Hospital of PLA,Harbin,150080)

ABSTRACTAim To observe the ultrastructure of Cystlcercus cellulosae with Chinese metria medica(CMM) in vitro.Methods The ultrastructure of Cycticercus cellulosae treated with chinese materia madica(CMM)、praziquantel(PQT) and albendazole(ALB) in vitro was observed by transmission clectron microscopy.Results The tegument、basement membrance muscular layer and parenchyma in the groups of CMM and PQT were all clearly damage,but the harmful effect of CMM to nerve cords is more serious than the PQT.The damage of all layers of the Cysticercus cellulosae in the ALB group is smaller in degree than the CMM and PQT.Conclusion The CMM has marked damaging effect to Cysticercus cellulosae.

KEY WORDSCysticercus cellosae Chinese materia medica Praziquantel Albendazole Transmission electron microscopy Ultrastructure

近年来，我们用中药制剂治疗脑囊虫病取得明显效果，其疗效明显优于丙硫咪唑，本研究在体外抑制实验的基础上，用透射电镜对中药、丙硫咪唑和吡喹酮等作用于猪囊尾蚴后的超微结构进行了观察，现将结果报告如下。

1材料与方法

1.1材料含猪囊尾蚴的猪肉取自屠宰厂。15％猪胆汁培养基，取新鲜猪胆汁，以生理盐水进行配制。灭囊灵（含矾石和全蝎）提取物：称取适量灭囊灵粉剂（由本院中药制剂室提供），以95％乙醇为溶剂，放入索氏提取器中提取，将提取液置水浴中蒸干备用。丙硫咪唑片剂：江苏宜兴制药厂生产，每片含丙硫咪唑0.1g，批号950222。吡喹酮片剂：南京制药厂生产，每片含吡喹酮0.2g，批号960801，均研粉备用。

1.2方法未脱囊猪囊尾蚴，自病猪肉中取出10个，用生理盐水冲洗干净后，以2.5%戊二醛固定，按常规方法制成电镜标本。分别称取12g灭囊灵的提取物、取丙硫咪唑0.6g、取吡喹酮24mg以15％猪胆汁稀释至60ml，倒入各3个平皿中。空白对照组：取15％猪胆汁60ml，分置3个平皿。每个平皿投入10个猪囊尾蚴，在37℃恒温培养箱中14h后，每皿随机取3个囊尾蚴，以2.5%戊二醛固定后按常规制成透射电镜标本，用H-600型透射电镜（TEM）进行观察。

2结果

2.1未脱囊猪囊尾蚴虫体体壁由皮层、基底膜、皮下肌层和实质层组成，层次分明完整，结构清晰。皮层最外层为外质膜，其上有许多指状微毛。向下为基质，内含较多的线粒体和管样及囊泡样滑面内质网，囊泡中含有不同密度的物质，皮层的内界为基底膜，基底膜电子密度低且较均匀。基底膜下为肌层，由环形肌和纵行肌组成（图1）。实质层可见实质细胞和细胞器退化的成石灰小体细胞，有的石灰小体呈电子密度很高的颗粒体。此外，可见3～5个成群的焰细胞出现在实质中，胞体有突起，核较大；胞质中有多聚核糖体，内质网、线粒体等；核前方有成排的根丝体，其伸出质膜后为纤毛，横断面为“9+2”结构（图2）。

图1未脱囊尾蚴皮层、基底膜及肌层4000×

Fig 1 The tegument,basement membrane and muscular layers of cysticercus cellulosae to had not excystated 4000×

图2未脱囊尾蚴实质层焰细胞25000×

Fig 2 Flame cells of parenchyma layer 25000×

2.2空白对照组囊尾蚴变化皮层完整，外质膜上有许多指状微毛；基质内含较多的线粒体和管状样和囊胞样滑面内质网，泡中含有不同密度的物质。基底膜电子密度均匀。肌层外环、内纵，走行规则（图3）。实质层肌丝发达，呈大小不等的囊状或索状散布于细胞周围。石灰颗粒细胞内可见形成的板层样石灰小体或被以细胞膜的钙质颗粒（图4）。此外，可见神经索，呈椭圆形，外被质膜。

图3对照组皮层、基底膜及肌层3000×

Fig 3 The tegument,basement membrane and muscular layers of cysticercus of control group 3000×

图4对照组实质层成石灰小体细胞10000×

Fig 4 Calcareous corpuscle forming cells of control grup 10000×

2.3灭囊灵作用后变化皮层变薄，外质膜明显受损，线粒体凝聚或溶解（图5）基底膜厚薄不均；皮下层肌丝结构不清。实质细胞层疏松，成石灰颗粒细胞内出现大小不等空泡及板层样石灰小体（图6）；神经索变形，外鞘凸凹不整。

图5灭囊灵作用后猪囊尾蚴皮层损伤12000×

Fig 5 Lesion tegument of cysticercus to be trteated with CMM 12000×

图6成石灰小体细胞受损15000×

Fig 6 Lesion calcareous corpuscle forming cell 15000×

2.4丙硫咪唑作用后变化皮层质膜基本完整，但微毛脱落减少，滑面内质网与线粒体结构基本正常，基底膜界限不尽清晰，肌束间隙增大，排列不规则（图7），实质层石灰小体细胞肿胀（图8）；神经索外鞘不尽规则。

图7丙硫咪唑作用后囊尾蚴皮层、基底膜、肌层、实质层受损5000×

Fig 7 Lesion tegument,basement membrane and muscular layers of cysticercus to be treated with ALB 5000×

图8石灰小体细胞肿胀20000×

Fig 8 Swelling calcareous corpuscle forming cell 20000×

2.5吡喹酮作用后变化皮层变薄，外质膜受损，微毛变短或脱落，皮层基质正常的囊状结构减少，而出现许多大空泡（图9）。基底膜电子密度增大；肌束稀疏，肌丝溶解、坏死，有的仅残存些肌膜结构。实质层细胞结构疏松，石灰小体细胞可见石灰小体正以分泌颗粒的形式形成。神经索未见明显异常。

图9吡喹酮作用后囊尾蚴皮层、基底膜及肌层受损4000×

Fig 9 Lesion tegument,basement membrane and muscular layers of cysticercus to be treated with PQT 4000×

3讨论

近年来，一些学者用电子显微镜观察了丙硫咪唑和吡喹酮对猪囊尾蚴超微结构的影响^〔1，2〕，但对中药抑制猪囊尾蚴的电镜观察，报告很少。本研究用透射电镜观察了中药和丙硫咪唑、吡喹酮对猪囊尾蚴的作用。结果表明：未脱囊尾蚴和空白对照组脱囊尾蚴的皮层、基底膜、肌层和实质层均分明，上皮微毛清晰