摘要为了研究一氧化氮(NO)在抗囊免疫机制中的作用及其与临床症状轻重的关系,本文观察了35例皮肌型或混合型囊尾蚴病病人的囊节数目与其血清中NO水平的关系,分别用Griees法和ELISA法检测其血清中的NO水平和特异性IgG(IgG#)含量,并将两组数据作相关性分析,发现该病病人的皮下囊节数目与血清中NO水平有关,病人血清中NO水平与IgG#含量呈正相关,病人血清中NO水平和特异性IgG水平明显高于正常人(P<0.05)。由此可推测该病病人血清中NO值是反映其免疫反应强弱和临床症状轻重的一个指标,对该病的诊断和治疗具有一定的指导意义。
CLINICAL STUDY OF NITRIC OXIDE(NO)
IMMUNO-MECHANISM OF CYSTICERCOSIS
Chen XueminChen BingQiu Shouyi
(Department of Epidemiology of Jiamusi University Medical College,Jiamusi,154003)
ABSTRACT This paper is for a study of the relation of NO effection in anti-cysticercosis mechanism with clinical symptoms.We examed the serum NO level and special IgG(IgG#) content with Griees and ELISA,and obsered the relation of tubercel number of 35 cases patients of cutaneous muscle cysticercosis of cerebral cysticercosis with serum NO level.By interrelated analysis with the data,the results showed it has a relation between the tubercel number in cutaneous and serum NO level,it is positive correlation between serum NO level and IgG# content,it is singnificantly highter the serum NO level and special IgG# of patients with cysticercosis than normal human(P<0.05).It suggested serum NO value can be as a measure of the intensity and weak of immuno-reaction and light and heavy o clinical symptom.Thus it is very important for clinical diagnosis and therapy.
KEY WORDS Cysticercosis Nitric Oxide Immune Special IgG
一氧化氮作为免疫细胞参与免疫反应的效应分子,可以抑制和杀伤多种寄生虫〔1〕。囊尾蚴病的病人囊节周围可见多种免疫细胞浸润包围,其中可以检测到的巨噬细胞分泌的NO的阳性率为100%〔2〕。为了证明NO参与该病病人的抗囊免疫反应,进行本试验。
1材料和方法
1.1一般资料
选择根据临床症状、囊虫酶联免疫试验、CT改变、皮下活组织病理切片检查确诊的皮肌型、混合型囊尾蚴病,不合并其它系统疾病,急性期但尚未经系统抗囊治疗的病人35例,其中男19例,女16例,年龄在18~52岁,平均36±11岁,作为受试对象。晨起空腹常规采静脉血,分离血清,冻存备用,检测其NO值和特异性IgG(IgG#)。以36名正常献血者血清的NO值作为对照组。将36名正常献血者血清的NO值作为对照组。将35例病人根据全身皮下结节数目分为3组:以囊节数>20、5~19、<5,分别为1~3组。
1.2囊尾蚴病病人血清中特异性IgG含量的检测
本试验采用西安医科大学张永浩等的检测血清中特异性IgG的ELISA间接法〔3〕。
1.3囊尾蚴病病人血清中NO水平的检测
1.3.1原理:根据Griess反应〔4〕的原理,NO半衰期极短,仅30′左右,遇氧及水可生成硝酸及硝酸盐,亚硝酸盐与(硝酸)及萘乙烯二胺盐酸盐反应生成粉红色偶氮化合物,通过比色可间接测知NO浓度。
1.3.2方法及操作步骤取血清0.1ml加0.6ml 0.15%硫酸锌混匀,加双蒸水0.4ml混匀,加0.1ml 4%氢氧化钠混匀,冰上孵育60min,12000r/min,取上清0.6ml加0.4ml双蒸水及0.1ml 0.3%磺胺冰止孵育15min,之后加0.1ml 6mM萘乙烯二胺盐酸盐,室温放置1h,在紫外分光光度计(PERKIN-ELMER Lambda 17 UV/VIS Spectrophotometer)上545nm比色,读取OD值。并以OD值作为NO的水平值。
2结果
2.1囊尾蚴病活动期病人血清中NO水平检测结果
将病人与正常人血清中NO值作t检验,结果可见病人NO值明显高于正常对照(P<0.01)。说明病人血清中NO水平明显高于正常人。35例活动期病人NO值特异性为0.216±0.77,IgG(g/L)为14.96±6.03,与36个正常人比较,OD值0.126±0.002,IgG值12.247±2.57。两者比较,均具显著意义差别(P<0.05)。
2.2病人全身囊节数与其血清中NO值观察比较结果
将3组试验数据做单因素方差分析,各组间作q检验。结果发现各组间差异性显著,F组间=24.968(P<0.01);第一组和第二组间q=23.678(P<0.01);第二组和第三组间,q=4.245(P<0.01)。提示病人血清中NO水平有关与其全身囊节数有关,囊节数越多NO值越高,反之越低。
2.3囊尾蚴病活动期病人血清中IgG#含量与NO水平相关性分析结果
将该病病人血清中IgG#含量与NO水平测定结果作相关性分析发现:二者呈高度正相关,r=0.819(t=8.197,P<0.01)。提示该病病人血清中NO的生成量与IgG#的含量有关。
3讨论
NO可参与人体多种寄生虫的免疫反应,但是否与抗囊免疫有关,尚未见系统试验证明。从本试验结果中可以看出该病活动期病人体内NO水平明显高于正常对照组(P<0.01)。由此可知病人自身可产生超出正常人生理生成量的NO,NO与该病有关,而且病情的轻重也与体内NO的生成量有正相关。我们观察到该病活动期病人全身皮下囊节数越多,血清中NO量就越高;反之则越低。即病情越重,囊节数越高,病人机体通过病理机制产生的NO量就会越多。
现在我们知道,以巨噬细胞(MO)为代表的免疫细胞通过一些免疫因素被激活释放大量NO杀伤病原体(肿瘤细胞、细菌、寄生虫等)〔5〕。蔡连顺〔6〕发现,该病活动期病人血清中IgG#明显高于正常人。为了验证NO与IgG#的关系,将二者作相关性分析发现:二者呈高度正相关,r=0.819(t=8.197,P<0.01)。提示该病病人血清中NO的生成量与IgG#介导的免疫反应有关。以MO为例,通过本文结果和现有的理论分析:囊尾蚴在组织内定植后,进行自身的物质代谢,代谢物作为抗原,刺激机体产生抗体,抗体的主要代表即IgG。特异性IgG与虫体表面抗原结合后,抗体游离的Fc段可与某些免疫细胞表面的Fc段结合,导致能释放NO的免疫细胞与虫体贴近,MO在细胞因子〔7〕(IFM、IL-2、TNF等)的诱导下,释放NO杀伤虫体。
综上所述,NO参与抗囊免疫杀伤囊尾蚴。有人发现:该病活动期病人体内IFN、IL-2明显缺乏〔8〕,这可能与免疫反应激烈两种细胞因子过度耗竭有关。因此,在临术上我们可根据病人血清中NO的量,适当给予细胞因子制剂支持杀虫机制。是否可行尚有待于进一步临床研究。
4参考文献
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2.李颖,等.实用寄生虫病杂志.1995,(3)3:122.
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1998年7月16日收稿1998年10月25日修回
