国外医学病毒学分册2000年第7卷第2期

中山医科大学微生物学教研室（广州 510089）黄俊琪（综述）郭辉玉（审校）

摘要由于HCV在被感染组织和血清中浓度较低，尚无实用的实验动物模型和有效的体外复制系统，对于HCV生活周期的研究比较困难。Abrignani等人发现病毒受体是CD81分子^[1]，为HCV致病研究提供基础。本文就HCV的研究概况、CD81及HCV和CD81的相互关系的研究进展做一综述。

关键词：CD81HCV病毒受体

1989年克隆出HCV使肝炎病毒的研究跨上了一个新的台阶，但由于HCV在被感染组织和血清中浓度较低，尚无实用的实验动物模型和有效的体外复制系统，因此对于HCV生活周期的研究有很大进展。1989年Abrig-nani等人从A2R细胞中找到了病毒E2抗原结合的细胞表面分子就是DC81分子^[1]。1999年8月Flint等人证明可溶性HCV e2糖蛋白能特异地与细胞表达的人CD81结合^[14]，进一步证明CD81是HCV的受体。本文就HCV的研究概况、CD81及HCV和CD81的相互关系的研究进展做一综述。

1 HCV的研究概况

1.1 HCV的发现：科学家发现除了HAV、HBV以外还有一些引起肝炎的因素，称为NANBV，后又发现NANBV并不是均一类型的肝炎病毒，其中有经血传播的，也有消化道传播的，但用病毒分离，抗原抗体检测等传统的方法经过十几年的研究，进展甚微。1989年美国Chiron公司和美国疾病控制中心通力合作，摒弃传统的病毒学研究方法，将分子克隆技术首先引入到肝炎病毒的研究领域中，终于，Choo和kuo等人成功地从HCV感染的黑猩猩血液标本中克隆出HCV。

1.2 HCV的分子生物学特征:HCV属于黄病毒科的成员,球形,有包膜,包膜上有刺突,基因组为+ssRNA,全基因组约含10kb,编码约10000个氨基酸。HCV基因组有一个大的开放读码框架,由5＇端编码结构蛋白的核心区及包膜区和3＇端编码非结构蛋白的7个区构成,其完整解读框为NH2-C-E1-E2-NS1-NS2-NS3-NS4A-NS4B-NS5A-NS5B-COOH。HCV的RNA和蛋白变异性很大，至少存在6种基因型和2～3型血清型，彼此之间可能没有交叉保护力。HCV的E基因的变异较大，很容易形成免疫逃脱突变体，使HCV感染得容易形成持续性病毒感染的携带者。

1.3 HCV的传播方式：HCV经血传播为主，美国80%～90%的输血后肝炎为HCV所致。近几年发现，HCV和HBV一样也可通过性接触、家庭内接触以及垂直传播，所以HCV感染的高危人群与HBV和HIV相似。

1.4 丙肝流行情况：丙型肝炎呈世界分布，目前全世界有1亿7千万人感染HCV，占全世界人口的3%^[1]。我国约有4千万HCV携带者，平均感染率为3.2%。丙型肝炎较乙型肝炎更易发展成慢性肝炎甚至发展肝硬化和肝癌,据报道,急性丙型肝炎约50～60%发展成慢性肝炎,其中20%最终可发展为肝硬化和肝癌。正因为HCV对人类健康有极大的危害性，因此越来越受到重视。

1.5 HCV的致病机制：HCV的致病机理尚未十分明了，大多数学者认为，HCV感染后所诱导的免疫病理反应可能起重要作用。E蛋白是病毒的主要包膜糖蛋白，含有病毒血凝素和中和抗原决定簇，在HCV的致病性和免疫性中有十分重要的作用，有人推测蛋白HCV的E2蛋白可能含CD8+AT细胞识别的重要肽段。

2 CD81的研究现状

对于TM4SF家族中的作用的研究90年代才刚刚开始，其成员有特殊的四次跨越细胞膜结构，并能与HLA抗原以及整合素相连，从而能促细胞生长、传导信息、并可能与病毒的粘附与进入机制有关。

2.1 CD81的结构：CD81是TM4SF成员,为分子量为25kD的跨膜四分子蛋白,它表达广泛^[1,2,6],在90%Burkitt淋巴瘤细胞株细胞表现有表达^[10]。它四次跨越细胞膜，在细胞外形成大小两个环状结构。CD81在细胞内和跨细胞膜区域成分高度保守，而其大的细胞外环区域（EC2）具有易变性，在不同种属中氨基酸序列不同，但在人类和黑猩猩中CD81的细胞外大环区高度保守，这可能与HCV感染具有种属特异性的特性有关。

2.2 CD81的功能：TM4SF成员CD9，CD37、CD53、CD63、CD81、CD82在不同细胞中对细胞生长、动力、信号传导和粘附效应有关^[4，8]。CD81在胸腺基底细胞上的表达对胸腺细胞的成熟有重要作用，CD81不是TB和B细胞成熟所必须，但对B细胞上CD19的表达和抗体产生很重要，它可以促进IL-4和抗体的产生，在T细胞上与CD4、CD8有关，它可以根据刺激物的不同来源以不同的方式调节淋巴细胞的增殖，从而控制淋巴细胞自身稳定^[2,3,6,11]。CD81在B细胞中与CD21、Leu13和CD19相连，形成信号传导复合物，可以降低B细胞激活阈值^[2]，从而促使自身抗体的产生，形成相应的免疫病理损伤。B淋巴细胞发育及功能调节也部分信赖于CD19/CD21/CD81/Leu13细胞表面受体复合物^[5,6]。CD81在不同的细胞中参与不同的分子复合物，它可能参与介导HCV粘附，并将信号传导给靶细胞。CD81/CD21/CD19其它TM4SF蛋白（CD53、CD37、CD82）与GGT（γ-谷氨酸转肽酶）形成复合物，调节细胞内氧化还原反应^[12]。TM4SF成员CD9、CD63、CD81、CD82与HLA-DR及整合素相连，形成细胞膜四分子蛋白交联联网^[4]。整合素属于细胞粘附分子中的整合素家族，其功能是参与细胞识别、粘附和信号传递，与细胞生长、免疫细胞活化、自身免疫反应等有关。有人报道在上皮细胞和造血细胞中CD81与整合素VLA4相连^[9]，VLA3与基它表面分子包括TM4SF蛋白如CD9、CD53、CD63、CD81、CD82形成复合物^[7]，发挥调节细胞增殖分化等作用。CD9与CD81与促肌细胞融合，支持肌小管形成有关^[13]。

3 HCV与CD81的相关关系

1998年，Abrignani等人从E2结合点较多的Molt-4的亚克隆细胞株A2R中，找到了病毒E2抗原结合的细胞表面分子就是CD81分子^[1]，发现人和黑猩猩的CD81 eC2区保守，而与非洲绿猴COS细胞和鼠类的CD81 EC2区的氨基酸残基有不同，从而揭示了HCV感染具有属特异性的分子基因。1999年8月Flint等人证明可溶性HCV e2糖蛋白（E2661）能特异地与细胞表达的人CD81结合，进一步证明CD81是HCV的受体，在鼠RBL与Molt-4细胞上表达的人CD81结合HCV e2661的所需量没有差异，证明在HCV E2与细胞表面开始作用时并不需要人细胞特异因子，E2不与非洲绿猴COS细胞表面CD81作用，因其EC2区有四个氨基酸残基不同（163、186、188、196），这些残基可能有-E2的作用位点，并表明CD81的构型与E2的识别有关，HCV e2与CD81结合可以抑制B淋巴细胞增殖，调节细胞功能^[14]。他们还研究了细胞表面表达的HCV e2糖蛋白的功能进行分析发现，HCV E1、E2在真核细胞的内质网中表达，E2384～661残基与甲型流感病毒的HA跨膜区和胞质区融合，并能锚定在CD81上^[15]。

CD81与HCV感染有关，CD81的种属特异性、结构功能以及与HCV关系的研究有助于解释HCV相关疾病的致病机制，为建立小型动物模型提供条件，并为HCV感染的治疗提供新的思路。目前研究HCV与CD81相互关系的资料甚少，却是HCV研究的潜在热点之一。

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