国外医学病毒学分册1999年第6卷第3期

河南焦作矿务局中心医院（河南454150） 程书权 常克宏综述

上海第二医科大学瑞金医院（上海 200025） 周霞秋审校

关键词：乙型肝炎病毒复制调节免疫新药

乙型肝炎病毒（HBV）感染是当今国际公认的防治难题，据WHO估测，全球至少有3.5亿人携带HBV，有3亿肝硬化与HBV感染有关，HBV自婴儿期感染后90%以上经40年左右衍化为肝硬化，50年发展为肝癌，25%～40%的感染者因之而致命，为此疲WHO列为第9死因。鉴于病毒持续感染与机体的免疫功能失调是乙型肝炎发病的主要环节，因而抗病毒治疗被推崇为肝炎治疗的最根本方法。干扰素（IFN）做为这一疗法的主力军，因复发率高，价格昂贵，副作用大等诸弊端而难以推广，故而国内外医药学家倾注极大的精力和财力，主要通过干扰病毒复制和调节免疫、促进宿主细胞毒性作用两个环节积极保护探索与开发新的抗病病毒措施^[1]，极大地丰富了乙肝的治疗学内容，现就近年的研究进展综述如下：

1腐败菌素 b^[2]：腐败菌素 b（ destruxin b）为1997年台湾 huachien-chen自金龟子绿僵菌培养液中分离出的一种环缩酚肽。实验研究发现本品可抑制 hBsAg基因在人体肝细胞瘤 hepsB细胸的表达，半数有效液度为0.5umol/L。 northern印迹分析表明，腐败菌素 b主要作用于 mRNA水平，不仅抑制在 hepsB细胞中内源性 hbsAg表达，而且抑制另一种不带内源性 hBV基因组的人肝细胞瘤 huH-7细胞瘤 huH-7细胞系中有稳定转染的 hBV dNA所产生的 hbsAg，有望成为一种全新抗病毒药物。

2 乌笨美司(Ubenimex)^[3]：系1966年Umezawa自橄榄网状链霉菌的培养液中发现的一种小分子多肽，又称Bestatin，最初观察到的生物学活性是对细胞膜上的亮氨酸氨基肽酶和氨基肽酶B有抑制作用，后来的研究表明，Bestatin有明显的抗肿瘤活性，在体内主要通过促进肿瘤免疫反应来实现，对免疫低下的老龄动物，应用后可使其免疫功能得到较快恢复，1995年周善学发现本剂对HBV亦有抑制作用，能使鸭血清中HBV dNA浓度极显著降低，鸭肝脏病理学及应用前后的血清转氨酶检查对比显示，Bestatin对肝组织学无影响，而治疗期间同一时间内能使ALT、AST明是下降，Southern blot检查提示Bestatin 能抑制鸭HBV DNA的肝内复制，治疗后1个月肝组织内HBV dNA的松弛环状DNA，超螺旋DNA，单链DNA均有下降。Fukuda观察到，Bestatin还可显著降低四氯化碳中毒小鼠的血清ALT活性，太田和雄用于23例HBsAg及HBV dNA均阳性的慢性乙肝患者，单独应用Bestatin 30mg/d，连报12周，HbeAg阴转69%，HBV DNA阴转25%，与IFN相当而优于阿昔洛韦等抗病毒药物，不良反应的发生率约为5.6%～9.6%，多为一过性皮肤瘙痒、皮诊，1.5%ALT升高0.51出现低热。

3 硫普罗宁（Tiopnonin）^[4]:硫普罗宁为一种新型含游离巯基的甘氨酸衍生物，可使肝细胸线粒体内的ATPase活性降低，ATP含量增高，电子传递功能恢复正常，对各类肝损伤的负效应的抵抗能力增强，动物实验表明，本剂可促进肝细胞再生，使乳酸脱氢酶活性、果酸酶活性、DNA含量升高，对内源性和外源性毒性物质如乙硫氨酸、乙醇、乙醛、四氯化碳、扑热息痛等所致的肝脏损害有明显保护和对抗作用。据新近一组多中心Ⅲ期临床报告，387例急慢性HBV感染者，300～600mg/d，分次口服，12周一疗程，急、慢性肝炎功能改善率分别为81.2%和84.3%，HBsAg阴转率分别为32.4%和28.6%，HBV DNA阴转率为19.4%和21.2%，用药安全性高，偶见皮疹、低热等不良反庆。

4 Ampligen ^[5]：为一较新的多聚核苷酸类干扰素诱因剂，做为一种错配双链的RNA聚合体（m-dsRNA）,进入体内降解后成为有生物活性的双链RNA片段，更容易进入细胞，Ampligen较聚肌胞毒性小，酶稳定性高，能很快诱导内源性IFN产生，抑制HBV dNA的表达，据Ijichi新近对鸭乙肝模型治疗实验，按5mg/kg静脉注射，给药后血清IFN于3小时内迅速升高达峰值，2′5′寡腺苷合成酶（2’5’AS）活性逐渐上升，至少保持48小时，HBV dNA水平随之降低，连续给药1周，便可见到HBV水平大幅度下降，至少维持2周，并同步出现肝内抑制HBV复制作用，但停药后血清HBV dNA易于回升，因目前尚无应用于临床的验证报告，人HBV对其反应性有待揭示。

5 日达仙（胸腺素 al,Thymosin）^[6,7] ：为人工合成的28肽化合物，属胸腺肽第5组分之一，能促进T细胞成熟，使细胸在被各种抗原或有丝分裂原激活后产生各种淋巴因子，如；а，г干扰素和白介素2（IL-2）IL-3等，促进抗体形成并抑制肝细胸凋亡。大剂量时还能对抗严重肝脏疾病产生血液免疫抑制因子，活化DNA酶，裂解HBV dNA，效果与IFN相近，但停药后后续作用强，作用持久，停药后24周仍可见到HBV标记转换，作用持久，停药后24周仍可见到HBV标记转换，用药过程中安全性高，无任何不良反应，因之被国内外学者期待为继IFN后的第2个最有效的抗病毒药物。用法：日达仙1.6mg皮下注射，连续4天后改变为每周2次，疗程26周，据国内外多中心观察结果，治疗12～24周ALT复发率：60%～80%，HBV dNA阴转率65.6%，HBeAg阴转率46.3%，对丙型肝炎病毒（HCV）亦有良好应答，HCV rNA阴转率43%～70% ，因而对合并或重叠感染HCV者十分适宜，本剂可与其它抗病毒药物联合应用，如联合IFN后HBeAg阴转率可提高到70.3%，HBV DNA阴转率达64.8%。国产制剂常规用法为每日160mg加入10%葡萄糖液250ml中，静脉滴注，2周后改为每周2次，共26周，HBV dNA阴转率为58%，ALT恢复速度优于常用的保肝药物，停药后38周仍可见到HBV感染标记的阴转。

6 HBsAg 免疫转移因子（HBVTF）：HBVTF是用乙肝疫苗免疫小猪，尔后将其脾脏浸出液纯化提取的一种寡核糖肽.实验证明能激发人体对HBsAg的细胞免疫应答，有助于抑制HBV复制，用法为2mg/d，肌肉注射，12周为一疗程，一组18例乙肝患者，疗程强束时临床症状全部改善，17例ALT恢复正常，44.4% hBeAg阴转，HBV DNA阴转率为24.4% ，经做HbsAg刺激的淋巴细胞增殖试验，刺激指数由1.04升高到1.35。

7 肝灵素(Immulin^AM)^[8] ：为澳大利亚研究开发的一种口含IFN，它依据IFN大剂量抑制免疫，小剂是兴奋免疫的双相调节作用，以200Iu之小剂量制成含片，通过直接兴奋口腔中的IFN受体，激活与提高IFN的作用，且不会被消化道的各种酶所破坏，每日舌下含化200～400Iu，疗程一年，与注射IFN相比价格低廉，使用方便且副作用极为轻微，HBeAg阴转率30%，HBV dNA阴转率16.7%，近年经鼻粘膜吸收的IFN剂型亦在加紧探索。

8 粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）^[9]：源于激活的T细胞、单核巨噬细胞、成纤维细胞与内皮细胞等，能促进造血细胞的增殖成熟，也增强抗体依赖细胞毒活性、细胞表面受体抗原表达，并刺激细胞因子的分泌，尤其是αIFN，IL-1B等抗病毒因子的释放。乙肝患者单用0.5～1mg/kg·d,6周或联合α-2b iFN 5Mu,半数有完全的治疗反应，表现为用后单个核细胞2ˊ5ˊAS活性增强，TNF，IL-1B，IL-6、可溶性IL-2R，可溶性CD₄⁺等因子产生增加,与血清HBV dNA水平呈负相关,Martin单用或联合IFN治疗8例慢性乙肝,4例HBV DNA和HBeAg阴转，有组织学好转，其中2例抗HBe阳转，在1.5mg/kg剂量下可良好耐受，除剂量依赖性的白细胞升高，停药后即可恢复外，少见其它不良反应。

9 乙肝疫苗：Dienstag研究发现，慢性HBV感染者对HBsAg有特异的免疫耐受，清除这种耐受是理想的终止HBV感染方法。乙肝疫苗在制造过程中经过一系列加工处理并添加了佐剂，具有天然HBsAg无法比拟的免疫兴奋作用，诱导特异的细胞免疫及体液免疫，较好地清除HBV携带者的免疫耐受。Pol近年在法国进行的一项预期非随机研究揭示，接受了三个标准剂量乙肝疫苗治疗的14例慢性肝炎，3例HBV dNA完全消失^[10]，随后Pol改用有前S2蛋白的基因工程疫苗治疗32例，用法为20ug每日肌注一次共3次，完成治疗后3个月，31%血HBV dNA消失，13%减少50%以上，有效率44%，与IFN接近^[11]，另有对应用IFN治疗8周后HBsAg仍阳性或治疗12周HBsAg阴转但抗HBs持续不阳转的急性乙肝，加用乙肝疫苗30ug每周一次，连用3周，完全应答率为95%，显示疫苗可解除IFN对抗HBs阳转的抑制，诱生特异性抗体和细胞毒性T淋巴细胞反应，以合成的对HLA特异的表位多肽制成乙肝治疗用疫苗(Theradigm-HBV^TM)2个剂量即能引起T细胞对HBsAg的特异免疫反应，可望不久投入临床验证。闻玉梅等近年还发现，在抗原过量情况下，带有佐剂的人多克隆HBV免疫球蛋白和血源性乙肝疫苗复合物（HBIgHBVac）免疫原性优于单纯的乙肝疫苗。应用含HBsAg38ug的等价 HBVac 60ug肌肉注射，每3月1次，共3次，14例HBeAg阳性的慢性肝炎在疗程结束后26周随访中，9例HBV dNA转阴，6例HBeAg转阴，其中2例抗- HBe阳转，前景十分诱人^[12]。 tabor近年报告，HBcAg疫苗对慢性乙肝有良好的防护性。动物实验还揭示，增强蛋白质-肽类疫苗和DNA疫苗能模拟自然感染HBV的蛋白表达，从而更全面有效地诱导机体的免疫应答，在HBV转基因小鼠中，可克服免疫耐受，激发特异的免疫应答，清除HBV感染，可能是治疗性疫苗的又一热点^[13]。新开发的中药佐剂及细胞因子佐剂疫苗展示的应用前景亦十分诱人。

10 IL-2^[14]：为人体最重要的、作用最强的T细胞生长因子，可提高Th细胞数量和活性以增强机体的免疫功能，同时诱导增强NK细胞、Lak细胞和细胞毒性T淋<