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材料和方法：雌性SD大鼠24只，体重160～180 g, 行双侧卵巢摘除术。术后随机分为正常对照组（1组）；CL致癫痫组（2组）；应用E2后致癫痫组（3组）；应用孕酮后致癫痫组（4组）。1、2组术后第8d开始每日腹腔注射生理盐水1 ml；3、4组分别注射E2(20 mg/kg体重)、孕酮(100 mg/kg体重)，连续3 d。立体定位仪下行右侧侧脑室注药致癫痫。1组注入生理盐水2 μl，2～4组按50 μl/kg体重注入CL(5 g/L)。注药后60 min快速断头取脑,分离注药对侧额叶皮层和海马。按1∶10(mg:μl)的比例加入0.3 mol/L的蔗糖溶液匀浆1 min。于200 μl 匀浆液中加入0.4 mol/L的过氯酸200 μl，10 000×g离心20 min。取100 μl上清液，调pH值为5.0～6.0。取10 μl上机进样。HPLC测定采用柱前衍生法及法国Gilson-715-User 高效液相色谱仪和荧光检测器，定量为内标法。氨基酸含量以每克蛋白质中的氨基酸μmol值表示(μmol/g蛋白)。采用配对t检验。
结果：给予E2后致癫痫组与单纯CL致癫痫组相比， Glu、Asp含量增加，GABA减少,差异有极显著及显著意义(P＜0.01,P＜0.05)。给予孕酮后致癫痫组与CL致癫痫组相比， GABA含量增加， Glu减少,差异有极显著意义(P均＜0.01)。
讨论：雌、孕激素为小分子脂溶性神经活性甾体激素,易于透过血脑屏障, 进入脑后对脑的结构和功能产生影响。中枢神经系统存在雌、孕激素受体及其mRNA。皮层、海马是中枢神经系统内对癫痫最敏感的脑区，人们常选择其作为研究癫痫的靶区。已经发现,雌二醇增加NMDA受体激动剂结合点的数量,孕酮升高海马GABAA受体γ2亚单位mRNA的转录水平,此被认为是通过经典的细胞内基因组机制调节神经细胞的效应。
本实验结果显示，给予雌二醇后使癫痫大鼠大脑皮层、海马Glu含量增加， GABA含量减少;与之相反,孕酮使脑组织内GABA含量增加,Glu降低。说明雌、孕激素不仅对神经递质受体具有调节作用,而且对递质本身也有调节作用。已经证明GABA和Glu可以共存于大脑皮层和海马细胞。谷氨酸脱羧酶(GAD)为GABA合成的限速酶,而GABA转氨酶(GABA-T)为GABA代谢酶，同时也是Glu合成酶。因此，推测雌激素可能通过基因组机制上调 GABA-T或下调 GAD，孕激素上调 GAD或下调GABA-T而间接影响GABA、Glu的含量,这有待于进一步证实。
基金项目：国家自然科学基金重点资助项目(39330210)
(收稿日期：1999-05-13)
