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材料与方法：(1)选用250～300 g的雄性SD大鼠20只，分5组，建立大鼠全脑缺血模型，取脑冰冻切片；对照组同样手术但四动脉均不予以阻断；(2)LAB-SA免疫组化：Ⅰ抗为HSP70单抗；(3)阳性结果判断：胞浆内出现棕褐色颗粒者为阳性。统计方法用Ridit分析。
结果：大鼠全脑缺血6分钟再灌注2小时内，在海马CA3区及齿状回颗粒细胞胞浆内即见有HSP70免疫活性。随着再灌注时程延长，在皮质、海马CA2区、杏仁核、尾壳核、缰内侧核及丘脑腹侧核群等解剖部位依次出现HSP70阳性神经元，于48小时达到高峰。这些阳性标记颗粒以海马CA3区与齿状回表达最多(图1)，在海马CA1区最少(图2)。经Ridit分析，不同解剖部位神经元在缺血后不同时间HSP70表达有统计学差异(P＜0.01)。在对照组中，未见有HSP70阳性神经元。
讨论：本组研究结果显示，全脑缺血再灌注后2小时内，海马CA3区中即有HSP70的表达。说明HSP70基因对神经元缺血反应极为敏感，可立即诱导并合成蛋白，参与缺血后神经元的病理生理反应。在本实验中，多数HSP70阳性神经元所在部位与近年来文献报道的相似。但在皮层及尾壳核处，文献报道HSP70阳性细胞为血管周围胶质细胞，而我们发现这些区域的阳性细胞为神经元，这可能与缺血的严重程度不同有关。较严重的缺血可抑制神经元内包括HSP70在内的几乎所有蛋白的合成，而胶质细胞和血管内皮可表达HSP70。HSP70表达后分别在胞浆与胞核中同变性蛋白结合，防止变性蛋白进一步折叠，失去功能，维持神经元内蛋白自稳。实验结果表明，HSP70在不同时程、不同的解剖部位及不同的细胞类型中表达有差异。这种差异可能是引起神经元对缺血性损伤耐受性不同的原因之一。HSP70表达的速度及数量在一定程度上影响神经元对缺血的耐受性，表现在各神经元表达HSP70的先后、持续时间的长短及表达量的多少。在对缺血的耐受性强的海马CA3及齿状回等处的神经元中HSP70表达明显多于对缺血极为敏感的海马CA1区等处的神经元。可以看出，HSP70与神经元对缺血的耐受性关系密切，可能具有重要的保护作用。
图1大鼠全脑缺血48小时后，海马CA3区与齿状回中HSP70蛋白的过量表达情况×100图2大鼠全脑缺血24小时后，海马CA1区未见明显的HSP70蛋白表达×100
(收稿：1997-02-14修回：1997-11-12)
