摘要目的：格林-巴利综合征(GBS)病因及发病机制探讨。方法：ELISA法测定49例GBS病人血清抗空肠弯曲菌抗体(Cj-Ab)及GM₁-IgG抗体，并与临床严重程度、预后、电生理进行相关分析。结果：GBS组血清Cj-IgA、IgG，GM₁-IgG阳性率与对照组存在显著差异；而GBS组血清Cj抗体、GM₁抗体与临床严重程度、预后及电生理均无相关性。结论：Cj近期感染与GBS发病相关；GBS病人血清GM₁-IgG亦有显著升高，但与Cj感染无关，可能只是一种神经损害后继发免疫改变，反对Yuki关于Cj感染后自身免疫引起GBS学说。

Relationship between Clinical Features and Antiboides

to C-jejuni,GM₁ in Gullan-Barre Syndrome

Xin Qijun,Chen Yuanshen

Department of Neurology,the 2nd Affillated Hospital

of Zhejiang Medical University,Hang Zhou,310009

Objective:Study on etiology and pathogenesis of Guillain-Barre Syndrome.Methods:ELISA assay was adopted to investigate antibodies of Campylobacter jejuni antigens and glycoconjugates GM₁ in the serum of GBS patients. Interelate analysis was made between those antibodies with clinical severity,prognosis and electrophysiology in GBS. Result:Significant difference was found in positive rate of Cj-IgA、Cj-IgG and GM₁-IgG between GBS group and the controls,but there was no relation among Cj antibodies,GM₁ antibody and clinical severity,prognosis,electrophysiology.Conclusion:There existed relationship between recent Cj infection and GBS,but no relation between GM₁-Ab and Cj infection was found. Positive rate of GM₁-Ab was higher in GBS group,suggested that secondary immune reaction after neural demage propably exist.We opposed Yuki′s theory of pathogenesis of GBS.

Key WordsGuillain-BarreSyndrome AntibodyGM₁C-jejuni

格林-巴利综合征(Guillain-Barre Syndrome,GBS)是一种周围神经急性炎症性脱髓鞘疾病，其病因及发病机制还不明确，目前倾向认为感染及自身免疫机制与它的发病有关。国外部分学者认为空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,Cj)是GBS病前主要的感染因子之一。感染后主要通过交叉反应导致周围神经损害而导致GBS。国内对GM₁抗体、Cj抗体及临床关系的综合研究尚在起步。

本文拟就Cj抗体、GM₁抗体与临床、电生理的关系问题进行研究，对GBS病因及发病机制进行讨论。

材料和方法

空肠弯曲菌标准菌株ATCC-1114557(浙江省防疫站)；GM₁(Sigma,美国)；GM₁-IgG；HRP标记兔抗人IgG抗体(DOKA)。

临床资料GBS组49例，来自1996年4月～1998年1月我院及兄弟医院病人。根据Asbury诊断标准^［1］纳入本组。排除有糖尿病史及服药后引起的周围神经炎。其中男35例，女14例，平均年龄(36.0±16.8)岁；平均病程(22.7±16.4)d。病前有上感史15例；腹泻史或腹痛，呕吐者10例；风疹病史1例；水痘病史1例；急性无黄疸型乙肝史1例；急性甲肝史1例；服中药史1例；不明原因发热3例；病前无明显诱因者16例。根据1988年Winer JB^［2］提出的临床严重程度评分标准：属重型者(4～5分)20例，轻型者(1～3分)29例。伴有颅神经障碍41例，其中IX，X对18例(43.9%)，Ⅶ对11例(26.8%)，Ⅺ对7例(17.1%)，XII对4例(9.8%)，Ⅴ对3例(7.3%)；43例有感觉主诉，其中41例查到痛觉异常客观体征，34例伴有音叉震动觉异常，其程度和部位与浅感觉障碍一致，其中2例还伴有位置觉、运动觉障碍；四肢腱反射消失35例，降低12例；有呼吸肌麻痹6例，其中3例做了气管切开，5例行人工呼吸；有小便潴留5例，尿失禁1例；死亡1例。入院后病程5～90 d内收取血清，部分收取CSF标本，均新鲜分离，放入-37℃冰箱储存备用，入院后2d内做电生理NCV、F波及H反射潜伏期测定。

对照组(1)Cj抗体血清对照组39例，皆为健康助血员。男27例，女12例，平均年龄(33.6±13.1)岁，其中35.5%来自农村；CSF对照组20例，男12例，女8例，平均年龄(41.2±12.9)岁，均为住院的功能性病损病人，农村来源占54.0%。(2)GM₁抗体血清对照组94例，亦为健康助血员。男65例，女29例，平均年龄(35.3±17.3)岁；CSF对照组20例，来源同Cj抗体CSF对照组，其中38.0%来自农村。(3)电生理对照组38例，男26例，女12例；平均年龄(31.6±12.9)岁。其中正常志愿者28例，余也均为住院的功能性病损病人。

Cj抗体测定ELISA法，在改良Skirrow培养基上收获Cj菌，离心洗涤3次，用0.01 mol/L pH 7.4 PBS稀释成10^7～8/ml超声粉碎(30 s×5，冰水溶)，2 000×1 pm离心弃沉淀，上清液稀释1∶300包被微孔4℃过夜，次日取出洗涤3次，加入10%小牛血清封闭，37 ℃×30 min，洗涤2次，加入标准品及稀释待检样品(血清IgG 1∶200，IgM、IgA 1∶50稀释；CSF皆为不稀释样品)，0.1 ml/孔，37 ℃×30 min，洗涤3次，加入酶标抗体(IgG 1∶1 600，IgM 1∶1 000，IgA 1∶100)0.1 ml/孔，37 ℃×30 min，洗涤3次后用OPD显色，避光置10 min，2 mol/L硫酸每孔0.05 ml终止反应，选波长492 nm，用空白孔调零，测定各孔OD值，根据标准曲线计算各样值。

GM₁抗体测定ELISA法，取GM₁用无水乙醇溶解，包被于96微孔板，每孔各0.35 μg/50 μl，冷风吹干，用2% BSA-pH 7.4 PBS 0.2 ml/孔，于4℃封闭过夜，洗涤3次，加入1∶100稀释待检血清及CSF(1∶1)每孔0.1 ml，37 ℃×60 min，洗涤5次，加入1∶1 000稀释的HPR标记兔抗人IgG抗体每孔0.1 ml，37 ℃×60 min，洗涤5次，加底物OPD每孔0.1 ml显色，避光置20 min，加终止液每孔0.05 ml，选波长492 nm，空白孔调零，测定各孔OD值。

结果判断Cj抗体阳性判断：大于等于血清对照组、CSF对照组OD平均值的2.1倍为阳性。GM₁抗体阳性判断：大于等于血清对照组、CSF对照组OD平均值的2.1倍为阳性。

电生理结果判断38例正常人统计各检神经的运动传导速度(MCV)、感觉传导速度(SCV)、H反射、F波潜伏期的平均值加减2SD作为正常范围。NCV＜+2s为减慢，F波/H反射潜伏期＞+2s为延长。轻度异常：MCV、SCV比正常值减少＜20%；F波/H反射潜伏期延长＜20%；中度异常：MCV、SCV比正常值减少20%～39%；F波/H反射潜伏期延长20%～39%；重度异常：MCV、SCV比正常值减少＞40%；F波/H反射潜伏期延长＞40%。

预后判断预后差：一年内不能独立行走或死亡。预后好：一年内基本恢复，可独立行走。

结果

Cj抗体测定结果：血清中Cj抗体测定：血清Cj-IgG：GBS组49例，对照组39例。GBS组血清中Cj-IgG抗体阳性率为44.9%，与对照组7.7%比较，两者存在显著差异(P＜0.01)；GBS组血清Cj-IgG浓度(44.20±52.09)u/ml，与对照组(11.32±13.70) u/ml比较亦存在显著差异(P＜0.01)。血清Cj-IgA：GBS组45例，对照组39例。GBS组中血清Cj-IgA抗体阳性率24.4%，与对照组7.7%比较，两者存在显著差异(P＜0.05)；GBS组血清Cj-IgA浓度(8.87±9.30) u/ml，与对照组(5.68±4.30) u/ml亦存在显著差异(P＜0.05)。提示Cj近期感染与GBS发病有关。血清Cj-IgM：GBS组49例，对照组39例。GBS组血清Cj-IgM抗体阳性率6.1%与对照组0.0%比较，无显著差异(P＞0.05)；GBS组血清Cj-IgM浓度(18.71±24.03)u/ml，与对照组(11.87±15.93)u/ml比较，亦无显著差异(P＞0.05)。

CSF中Cj抗体测定：CSF中Cj-IgG：GBS组21例，对照组20例。GBS组CSF中Cj-IgG抗体阳性率52.4%，与对照组10.0%比较，两者存在显著差异(P＜0.01)；GBS组CSF中Cj-IgG浓度为(3.81±3.83) u/ml，与对照组(2.01±0.31) u/ml比较亦存在显著差异(P＜0.05)。CSF中Cj-IgA：GBS组21例，对照组20例。GBS组CSF中Cj-IgA抗体阳性率19.0%，与对照组5.0%比较，两者存在显著差异(P＞0.05)；GBS组CSF中Cj-IgA浓度(2.63±1.10) u/ml，与对照组(2.31±0.61) u/ml比较，亦无显著性差异(P＞0.05)。CSF中Cj-IgM：GBS组21例，对照组20例。GBS组CSF中Cj-IgM抗体阳性率14.3%，与对照组10.0%比较，两者存在显著差异(P＞0.05)；GBS组CSF中Cj-IgM浓度(4.01±1.66) u/ml，与对照组(3.62±0.93) u/ml比较，亦无显著差异(P＞0.05)。上述结果提示GBS患者CSF中Cj-IgG抗体的增高可能由于血脑屏障损害所致^［3，4］。

GM₁-IgG抗体测定结果：血清GM₁-IgG：GBS组49例，对照组94例。GBS组血清中GM₁-IgG阳性率24.5%，与对照组2.1%比较，存在显著差异(P＜0.01)，提示GM₁-IgG与GBS相关。CSF中GM₁-IgG：GBS组21例，对照组20例。GBS组CSF中GM₁-IgG阳性率9.5%，与对照组0.0%比较，无显著性差异(P＞0.05)。

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