1.研究对象:1990年初至1995年底,在我院神经内科住院的126例脑血管疾病(脑梗塞和脑出血)患者,年龄27~76岁,分成4组:青年组(27~34岁)6例,中年组(35~44岁)6例,老年前期组(45~59岁)50例,老年组(60~76岁)64例;40例健康人作为对照组,为1990~1993年我院健康职工及其家属,年龄2~75岁,分成5组:幼年组(2~8岁)8例,青年组14例,中年组5例,老年前期组10例,老年组3例。
2.仪器及方法:采用REIX型自旋共振谱仪(日本产)自旋捕捉法(spin trapping);电磁场为X波段,调制频率为100kHz;试剂DMPO(5,5-dimethylpyrroline-1-OXide)、黄嘌呤、黄嘌呤氧化酶均为美国Sigma公司产品。在室温下,采用通用的黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生超氧自由基。对照组加pH值为7.4的缓冲液。超氧化物歧化酶(SOD)活性计算:用黄嘌呤和黄嘌呤氧化体系产生超氧自由基为对照,以谱峰值计算,定义使峰高下降到1/2为SOD抗超氧自由基的一个活性单位,由此推导出待测样品的SOD活性公式〔1〕为:
SOD(U/L)=〔(对照组峰值-样品峰值)÷对照组峰值÷0.5〕×(1000÷5)。
统计分析:通过线性最小二乘拟合,得到两组血清SOD活性随年龄变化的解析式;对各组分别计算SOD活性并进行比较。
二、结果
1.超氧自由基电子自旋共振(ESR)图谱峰值的线性最小二乘拟合解析式分别为:脑血管疾病组:SOD(U/L)=232.51-1.43×年龄(岁);健康组:SOD(U/L)=209.04-0.52×年龄(岁)。以上解析式表明,人体血清SOD活性随增龄缓慢下降,每10岁分别降低6.1%和2.5%。脑血管疾病组与健康组SOD活性比较,仅老年前期组、老年组间差异有显著性(分别为P<0.05及<0.01)。分别对脑血管疾病组及健康组SOD活性与年龄间作相关分析(相关系数分别为r=-0.37及-0.41,分别为P<0.01及<0.05),表明两组的SOD活性与年龄均呈显著性负相关。
2.SOD检测结果:脑血管病患者中,青年、中年、老年前期及老年组分别为204±24、167±52、151±44及140±36U/L;健康组中,幼年、青年、中年、老年前期及老年组分别为206±25、195±22、204±26、181±30及178±1U/L。结果表明,脑血管疾病组与健康组差异有显著性,(t检验,下同,P<0.01)。在脑血管疾病患者中,青年组与老年前期组、青年组与老年组,差异有显著性(P<0.01);在健康人中,只有幼年组和老年组间差异有显著性(P<0.05)。
三、讨论
采用ESR自旋捕捉法检测血清SOD活性,具有电子自旋共振波谱技术直接测量及快速敏捷的优点,又有误差小、灵敏度高、检测样品不受破坏和对化学反应无干扰等优点。本组检测结果表明,脑血管疾病患者和健康人血清SOD活性随年龄增长逐渐下降,表明衰老是一个多因素的综合表现。
参考文献
1田亚平,沈文海.用ESR自旋捕捉技术研究健康人和病人血清中的SOD活力.生物物理学报,1991,7(1):37-39.
(收稿:1997-02-21修回:1997-12-17)
