关键词: TT病毒；血浆置换；聚合酶链反应

【摘要】目的研究血浆置换患者人群中经输血传播TT病毒的感染状况及临床意义。方法用聚合酶链反应（PCR）方法检测45例血浆置换患者和慢性肝炎患者的TT病毒(TTV)感染情况，分析TTV感染的致病力。结果TTV在45例血浆置换患者中的感染率为15.6%（7/45），在87例慢性肝炎患者中的感染率3.4%（3/87），经统计学处理，两组感染率比较差异有显著性（χ²＝4.60，P＜0.05）。7例TTV阳性患者中，6例有输血史。且TTV阳性和TTV阴性两组之间病死率差异无统计学意义。结论输血、血浆在传播TTV感染有重要意义，TTV是否导致或促进重型肝炎肝衰竭的因素，有待深入研究。

Observation of TTV infection in patients of plasma exchange

JIANG Yuansen, HUANG Yangsu, YAO Jilu， et al.

The 3rd Affiliated Hospital Sun Yat-Sen University of Medical Sciences, Guangzhou 510630

【Abstract】ObjectiveTo study the infection and clinical investigation of transfusion transmitted virus (TTV) in plasma exchange patients.Methods PCR was used in the detection of TTV infection in 45 cases of plasma exchange and 87 cases of chronic hepatitis and to evaluate its virulence.Results The positive rate of TTV were 15.6%(7/45) in 45 cases of plasma exchange and 3.4%(3/87) in 47 cases of chronic hepatitis. The difference between them was significant(χ²＝4.60，P＜0.05). Of the seven TTV-positive patients, 6 had blood transfusion. There were no significant differences in the case fatality rate between TTV positive and TTV negative patients.ConclusionResults suggested that blood transfusion might be one of the critical routes to transmit TTV. But the role of making it the important cause of fulminant hepatitis needs further study.

【Key words】Transfusion transmitted virusplasms exchangepolymerase chain reaction

1997年10月，日本学者Nishizawa等报道发现一种名为“输血传播病毒”（transfusion transmitted virus,TTV）。初步研究表明，该病毒为一单股DNA病毒。为了解该病毒的流行情况及致病性，我们对45例接受血浆置换（Plasma exchange, PE）治疗的重型肝炎（重肝）患者进行了TT病毒检测，发现7例TTV阳性，并对TTV阳性病例进行临床资料分析。

材料和方法

一、研究对象：1998年10月～1999年7月在本院传染病科住院受血浆置换（PE）治疗的重肝患者45例为受血浆组，年龄9～62岁，平均年龄41.3岁。受血浆组患者每次血浆分离器、血液灌流器、血浆胆红素吸附器、血液回流管均一次性应用。治疗前后双份血清分装在灭菌试管后-30℃以下保存，统一检测TTV及其它血清学检测。选择同期住院以慢性肝炎患者87例为对照组，年龄25～48岁，平均年龄37.5岁。受血浆组及对照组的重型肝炎分型及诊断标准按1995年全国第五次传染病寄生虫病学术会议制定的标准。

二、检测方法：血清肝炎病毒标志物的检测：①抗-HAV和抗-HGV采用中山生物工程公司试剂，血清HBV标志和抗-HCV采用美国Abbott试剂，抗-HEV采用新加坡Genelabs公司试剂进行检测。②HCV-RNA和HGV-RNA采用巢式RT-PCR进行检测。③肝功能生物化学指标采用日本全自动分析仪检测。

三、TTV-DNA检测：用热变性法制备裂解上清，5′-GCAGCAGCAATAGGATAT

GT-3′（TTV1，正义）和5′-TGACTGTCG

TAAAGCCTCTA-3′(TTV2，反义）为外引物进行第1次扩增，PCR反应条件：94℃，40s，55℃，40s，72℃，lmin,共35个循环，产物为270bp。第1次产物再以5′-CATACAC

ATGAATGCCAGGC-3′（TTV3，正义）和5′-GTACTTCTTGCTGCTGAAAT-3′（TTV，反义）为内引物进行第2次扩增PCR条件同第1次PCR，产物为197bp，20g/L琼脂糖凝胶电泳分析结果。

四、统计学分析：采用χ²检验进行统计学处理。

结果

一、TTV在血浆置换患者及慢性肝炎患者中感染情况：45例血浆置换的重肝患者（受血浆组）中，TTV阳性7例，阳性率15.6%（7/45）。87例慢性肝炎患者（对照组）中，TTV阳性3例，阳性率3.4%（3/87）。受血浆组与对照组感染率比较差异有显著性（χ²＝4.60，P＜0.05）。

二、TTV合并其他病毒感染情况：45例血浆置换患者中HAV、HBV、HCV、HEV、NA-G的感染阳性率分别为4.4%、86.7%、15.6%、11.1%、2.2%。7例TTV阳性患者中，HBV与TTV重叠感染5例，HBV、HCV与TTV重叠感染2例，未发现单纯TTV感染者。7例TTV阳性者，3例为亚急性重型肝炎，4例为慢性重型肝炎。

三、TTV感染与输血、血浆置换的关系：TTV阳性组患者血浆置换次数为5～10次，平均7次（其中1例为等待肝移植进行血浆置换20次治疗），6例有输血史，输血次数为2～3次，平均2次。TTV阴性组患者血浆置换次数3～6次，平均3次，2例有输血史，每例输血1次。

四、TTV阳性与TTV阴性组病死率情况：血浆置换组7例TTV阳性患者中，死亡3例，病死率42.8%（3/7），死亡病例均为慢性重肝合并多器官感染，肝衰竭。治疗好转出院后病例随访，2例TTV-DNA随肝功能恢复而阴转。TTV阴性组38例患者中，死亡18例，病死率47.4%（18/38）。血浆置换患者TTV阳性组与TTV阴性组之间的病死率差异无显著性（χ²＝0.04，P＞0.05）。

讨论

目前的临床病例中，可检测肝炎病毒有甲～戊和庚型及EBV、CMV，但仍有约10%肝炎病例的病原学诊断未明，推测存在可导致人类肝炎的新型病毒^［1，2］。TTV是新近发现的一种病毒，主要通过输血传播^［3］。血液透析和血浆置换患者是经输血、血浆传播肝炎病毒的高危人群，选择血液透析、血浆置换人群对通过输血、血浆传播肝炎病毒TTV、HBV、HCV、GBV-C等感染状况进行研究，对预防该病毒的感染有十分重要意义。

本组资料在重型肝炎血浆置换患者和慢性肝炎患者中TTV-DNA检出率分别为15.6%和3.4%，重肝血浆置换组与慢性肝炎组比较，前者TTV阳性率显著高于后者，且差异有统计学意义（P＜0.05）。慢性肝炎患者TT病毒检出率3.4%，与目前国内有关报道^［4］健康体检人群2.2% 和肝病患者4.4% 检出率相似。TTV检出率相对比较低，目前只能采用PCR方法直接检测TTV核酸，代表现行感染，而TTV的病毒血期可能较短，这样既往感染率可能会高一些，因此，需要解决研制（ELISA法）抗体检测方法，以提高检测的敏感性，对阐明TTV总感染率非常重要。

分析45例重肝血浆置换者TTV感染与输血、血浆置换的关系，血浆置换次数及输血次数越多，TTV检出率就越高，在7例TTV阳性者中，6例有输血史，其中1例反复输血三次，血浆置换20次，反复多次输血在传播肝炎病毒有重要意义，同时重型肝炎自身免疫功能低下，营养状态较差，血浆置换过程中，医护人员消毒不严格，操作时不及时更换手套，血透消耗品重复使用，均能增加交叉感染的机会。做好献血员的筛选、确保血源质量，严格执行无菌技术操作，加强预防措施将有助于降低肝炎病毒的感染率。

本文重肝血浆置换组HBV、HCV、HEV感染分别为86.7%，15.6%，11.1%，7例TTV阳性者，5例重叠或合并HBV感染，2例重叠或合并HBV、HCV感染。HBV、HCV、HEV仍是重型肝炎的主要病因^［5］，经临床观察及肝功能检测结果分析，TTV存在与HBV、HCV重叠或合并感染后未见病情明显加重，且TTV阳性组与TTV阴性组之间病死率差异无统计学意义。经治疗好转出院病人随访，2例TTV-DNA随肝功能恢复而转阴。输血在传播TTV感染有重要意义，TTV是否是导致或促进重型肝炎肝衰竭的因素，有待更深入研究。

基金项目：本课题为广东省自然科学基金资助〔批号：（1998）0095〕

参考文献

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3Nishizawa T, Okamoto H, Konishi K, et al. A movel DNA virus(TTV) associated with elevated transaminase levels in post transfusion hepatitis of unknown etiology. Biochem Biophy Res Com, 1997，241∶92-97.

4陈雪娟，彭晓谋，高志良，等.健康人群和肝病患者中检测TTV的意义.世界华人消化杂志，1999，7∶5-7.

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