一、材料与方法:
1.金标免疫斑点法试剂盒购自兰波生物技术研究所。ELISA方法试剂盒购自北京现代高达生物技术有限公司。
2.金标免疫斑点法:加2滴TBS缓冲液于反应板孔中,待液体充分吸入后加0.15ml血清,待充分吸入,去除蓝色过滤盖,加2滴TBS缓冲液待液体充分吸入后加3滴含胶体金标记的抗人IgM抗体3滴,待充分吸入后加TBS缓冲液2滴于反应板孔中,观察结果。ELISA方法参照试剂盒说明书进行。
3.结果判断:金标免疫斑点法阳性结果为反应板中央出现红色圆斑与红色横线为阳性,只出现红色横线为阴性。ELISA方法检测HFRS的IgM抗体的结果判读是通过酶标仪读取各样本检测孔A值,采用cutoff值判读结果。
二、结果与讨论:
1.特异性和稳定性:20例高血脂、高胆红素、溶血、类风湿因子阳性的标本检测结果均为阴性,后经临床诊断验证不是HFRS患者。20例初期HFRS感染者的标本检测结果均为阳性。将标本置-4℃和-20℃分别保存7天和20天,重复检测后得到的结果与初次检验结果完全一致。
2.与ELISA方法比较:金标免疫斑点法与ELISA方法共同检测我院1999年1月至6月间的348例标本,其中两法共同阳性的有61例,共同阴性的有287例,符合率为100%。
3.临床应用:用本法检测的61例阳性血样,均经临床检查证实为HFRS病毒初期感染者并得到及时有效的治疗。
肾综合征出血热是一种自然疫源性疾病,本病发病凶猛,病死率高,对本病的早期快速诊断非常重要。ELISA方法由于操作时间长且需用仪器判读结果,不能提供快速及时的诊断结果。本研究表明金标免疫斑点法检测HFRS-IgM抗体与ELISA方法比较,具有很好的特异性、敏感性、稳定性和操作方便等优点,并且结果容易判读,不需任何设备,在10min内可得到准确的结果,适用于临床对HFRS的快速诊断要求。
收稿:1999-07-20
