利用多肽合成技术在戊型肝炎病毒(HEV)的结构区内的开放读码框(ORF)-2和ORF-3区合成了P1、P2二条具有明确抗原表位的合成多肽,作为EIA法抗-HEV诊断试剂的固相抗原测定抗-HEV。在78例急性甲型肝炎中抗-HEV检出率为7.8%,慢性乙型肝炎的检出率为2.9%,志愿献血员为1.4%,急性输血性丙型肝炎检出率为0。本室抗-HEV诊断试剂的精密度检测CV值为6.8%~9.1%。优于部颁体外诊断试剂CV值≤15%的标准。抗-HEV的灵敏度测定P1合成肽为1∶1 600,而P2合成肽1∶12 800,P2合成肽的终点稀释度比P1合成肽高出8倍。P1+P2合成肽混合包被检测抗-HEV,经162例血清标本的结果检测与Genelaps抗-HEV诊断试剂的检测结果对比符合率达98.8%。同时在抗-HEV检测中发现了有单独抗P1合成肽和P2合成肽的数例血清样本。上述结果表明①所用P1、P2二条合成肽选择的合成区域ORF-2、ORF-3区最为保守,氨基酸的同源分别达99%~100%,是合成HEV抗原的理想区域;②P1、P2合成肽因合成区域、位点、抗原性、亲水性、片段大小有所不同,而发现数例单独抗-P1或P2合成肽的阳性标本。为此P1、P2二条合成肽应混合配置,使抗不同表位的抗体均能与之结合,反应强度也会相应增大,进一步提高抗-HEV的检出率;③抗-HEV诊断试剂的灵敏度、特异性检测结果满意,精密度检测优于部颁标准,同时在与Genelaps诊断试剂的对比测定也呈高度一致性。
(收稿:1999-01-25)