我们在研究鼠伤寒沙门菌(STM)分型噬菌体时,为了准确可靠,不受外界因素的干扰,首先考虑到STM是否产生溶原性噬菌体,因这方面缺乏详细资料。为此对STM分型噬菌体的宿主菌溶原性进行检测。30株STM分别以SS培养基纯化,各挑1个典型光滑菌落于5ml肉汤中,37℃生长4h后,56℃30min灭活,再2 000r/min 20min离心,取上清(含溶原性噬菌体)至另一无菌试管中备用。临用前再用肉汤稀释成10
-1~10
-8,将30株分型噬菌体的宿主菌做为指示菌,分别接种于5ml肉汤中,37℃生长4h后,取1ml菌液放入已烘干的普通琼脂平皿内,待菌液铺满平皿后吸出多余的菌液,再加烘干取出平皿,再滴加10
-1~10
-8的上述灭活的上清液各1滴,每个菌株做一平皿,放37℃4~5h观察1次,18h后根据溶菌程度(>)报告结果。判定结果标准融汇性裂解(#),刚好不呈融汇性裂解(#-),半融汇性裂解(),有20个以上噬斑(),10个以上噬斑(+),无溶菌斑(-)。试验结果:30株分型噬菌体宿主菌中有21株被溶原性噬菌体所裂解,其阳性率为70%,有9株未被裂解占30%,从溶原性噬菌体溶菌情况计算,有9株对30株宿主菌均不裂解,但对30株宿主菌以外的菌株,尚可裂解。其溶菌谱除少数相同外,多数是不相同的,差异较大,从而提示:利用此特性,在固定条件下可做为某些菌株的分型和某些菌株的标志,同时亦可做为溶原性菌株的质控。另对流行病学传染源的调查亦有其重要意义。其次还做了30株分型噬菌体和溶原性噬菌体二者滴度的比较,以了解溶原性噬菌体对STM分型噬菌体在分型过程中有否影响。结果溶原性噬菌体比人工生产的STM分型噬菌体均低2~4个滴度,当分型时要用1个RTD(常规试验滴度)经高倍稀释后,溶原性噬菌体含量已很少,因其滴度低,分型噬菌体滴度高,故对噬菌体分型不会产生任何影响,更不会出现假阳性,因此分型时必须用1个RTD的浓度为前提,才能保证分型的准确性。有关溶原性噬菌体出现产生的机理有待进一步研究。综上所述,经过此项研究,对鼠伤寒沙门菌的溶原性产生的百分比和滴度、溶菌谱等均有了一个科学数据。
(收稿:1997-10-31修回:1997-12-07)