肠出血性大肠杆菌(EHEC)O₁₅₇：H₇被认为是九十年代最重要的食源性病原菌之一。自1982年美国在一次汉堡包集体中毒中，首次确定EHEC O₁₅₇：H₇为致病菌以来。世界各地均有关于该菌引起食物中毒的报道。^〔1〕1996年在日本暴发O₁₅₇：H₇食物中毒，引起世界各国极大关注。我国也有自急性腹泻病人便中检出O₁₅₇：H₇的报道。^〔2〕EHEC O₁₅₇：H₇主要经食物传播，牛、绵羊、鸡为本菌贮存宿主，可成为O₁₅₇：H₇肠炎的传染源。为了解O₁₅₇：H₇在我市肉类食品中分布情况，我们采集70份试样行检查，其中宰鸡肉20份，鸡便20份，市售鸡肉、猪肉各15份。从宰鸡肉、市售鸡肉中各分离出一株O₁₅₇：H₇。现将结果报告如下。

1材料和方法

1.1试样来源宰鸡肉、鸡便(棉拭子涂抹后直接置于10 mL MEC肉汤)均采自北京某肉鸡厂。冷冻鸡、猪肉各15份采自某超市，试样包装良好，在保质期内。

1.2菌株EHEC O₁₅₇：H₇标准菌株由中国预防医学科学院微生物流行病研究所提供。

1.3培养基M(EC)n：改良EC增菌肉汤添加新生霉素，新生霉素终浓度为20 μg/mL。CT-SIB培养基：头孢拉定(C)终浓度0.05 mg/L。亚碲酸钾(T)：2.5 mg/L。LIG(MUG)干燥培养基：均由北京市生物制品研究所提供。新生霉素(Sigma)。

1.4检验无菌称取25 g试样于225 mL M(EC)n增菌液，便涂抹直接置温箱41℃增菌24 h，取一环增菌液转种CT-SIB培养基37℃ 18～24 h，挑取典型菌落转种LIG培养基，同时接种肠系杆菌科综合培养基^〔3〕36±1℃，培养24 h，在365 nm紫外光下观察荧光反应以及初步生化反应，如MUG酶检测阴性且基本符合大肠杆菌特征者做血清凝集和系统生化鉴定。

2结果

2.1分离菌株在CT-SIB平板上呈圆形，扁平，中等大小，无色透明，中心灰褐色菌落，涂片染色镜检为G^-杆菌，无芽孢。LIG斜面高层黄色，斜面红色，有动力，365 nm紫外照射无荧光。

2.2生化反应应用Vitek全自动微生物鉴定系统对可疑菌株做系统鉴定，结果如下：OFG(葡萄糖氧化)、GC(生长控制)、LAC(乳糖)、MLT(麦芽糖)、MAV(甘露糖)、XYL(木糖)、ADO(侧金盏花醇)、ONPG、RHA(鼠李糖)、ARA(阿拉伯糖)、GLU(葡萄糖发酵)、LYS(赖氨酸)试验阳性，ACE(乙酰胺)、ESC(七叶苷)、URE(尿素)、CIT(枸橼酸盐利用)、MAL(丙二酸盐)、TDA(色氨酸)、PXB(多粘菌素B)、RAF(棉子糖)、SOR(山梨醇)、SUC(蔗糖)、INO(肌醇)、H₂S、ARG(精氨酸)、ORG(鸟氨

酸)、OXI(氧化酶)试验阴性。

2.3血清学试验所分离的两株菌与EHEC O₁₅₇：H₇诊断血清做玻片凝集，均为阳性反应。生理盐水对照阴性。

菌株做生化，单克隆抗体及肠溶血素基因HIyAB PCR检测，证实自宰鸡肉，市售鸡肉中所分离到的2株菌均为肠出血性大肠杆菌O₁₅₇：H₇。

3讨论

3.1应用改良EC肉汤添加新生霉素，41℃增菌培养，可有效抑制食品中其它杂菌生长，提高阳性检出率，与以往报道相符。^〔5〕

3.296%的大肠杆菌具有葡萄糖醛酸酶，故水解4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)，产生荧光，而O₁₅₇：H₇则为阴性反应。^〔4〕依据这一特点采用LIG培养基做快速MUG试验，做为初筛，能大大减少工作量，提高方法特异性及阳性检出率。菌株应用Vitek做系统生化鉴定，增加了实验科学性及结果的可靠性。

3.3此次从市售鸡肉和宰鸡肉中各分离到一株EHEC O₁₅₇：H₇，检出率分别为3.3%(1/30)和5.0%(1/20)。猪肉和鸡便中未检出。说明我市生禽中存在O₁₅₇：H₇大肠杆菌，应予以重视。证明鸡确是O₁₅₇：H₇贮存宿主之一。加强食品卫生管理，控制可能出现的传染源，切断传播途径，提高群众防范意识，是杜绝O₁₅₇：H₇食物中毒爆发流行的关键所在。

(菌株承蒙流行病研究所景怀奇老师协助鉴定，特此感谢!)

4参考文献

[1]徐建国，祁国明.出血性大肠杆菌的微生物学.流行病学和临床特症.中华流行病学杂志，1988，9(特刊4号)：174

[2]贾力敏，等.从一名腹泻病人分离出一株O₁₅₇：H₇大肠杆菌的初步鉴定及分析.中华流行病学杂志，1998，19(4)：66

[3]北京市卫生防疫站.卫生防疫微生物检验操作规程(下册).北京：北京出版社，1991：977

[4]李景学，等.肠出血性大肠杆菌O₁₅₇：H₇的实验室诊断.国外医学：微生物学分册，1993，(2)：76～79

[5]F J Bolton, L Crozier, J K Williamson. Isolation of Escherichia Coli O₁₅₇ from raw meat products. Letter in Applied Microbiology, 1996,23:317～321

[6]江成博，岛田园子，荻原博和，等.肠道出血性大肠菌的检索次序的试行案.第六次日本临床微生物学会，1995