摘要: 目的对含碘消毒剂安尔碘实验室杀菌效果的初步观察。方法以安尔碘为研究对象,将其采用对倍稀释法,以不同浓度对临床耐药菌株作用不同时间,观察灭菌效果。结果安尔碘的有效碘含量为7.81ug/ml,作用1分钟时,可将所有检测菌全部杀灭。结论安尔碘为强而有效的杀菌剂。
分类号: R187+.2文献标识码: A
文章编号: 1005-4529(2000)01-0054-02
安尔碘是一种含0.2%的有效碘、缓释剂、催干剂、增效剂、护肤剂等形成的含碘络合物。我们以其为研究对象,观察不同浓度对临床耐药菌株作用不同时间的灭菌效果。
1材料与方法
1.1研究对象的选择选取临床耐药菌株(多重耐药株),以皮肤消毒剂安尔碘(上海利康消毒高科技有限公司生产,批号:990316)进行最小杀菌浓度(MBC)测定。
1.2有效碘含量的测定有效碘含量的测定参照卫生部1997年10月消毒与灭菌技术规范[1]。
1.3中和剂选择实验以金黄色葡萄球菌ATCC6358第三代菌悬液为实验菌株,采用菌悬液定量测定法。在20±2℃水浴条件下,用含0.5%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温80的PBS作为中和剂,实验分以下8组进行:(消毒剂+菌液)+PBS;(消毒剂+菌液)+中和剂;(消毒剂+中和剂)+菌液;(中和剂+菌液)+PBS;(PBS+菌液)+PBS(正常菌液对照);实验用PBS接种于营养琼脂平皿;中和剂接种于营养琼脂平皿;未接种营养琼脂平皿。结果第6、7、8组不长,第3、4、5组组间菌落数差不超过10%,第2组长菌,第1组不长菌或菌落数远少于第2组时,表明所用的中和剂及使用浓度适宜。
1.4临床耐药菌株MBC测定
1.4.1测定菌株来源金黄色葡萄球菌(ATCC6538),大肠埃希菌(ATCC8099为标准菌株);MRSA(2、4),MRCNS(1、6、7、8),为本实验室新鲜收集菌株;大肠埃希菌(4540、4593、4603),铜绿假单胞菌(4547、4999、4950);克雷伯肺炎杆菌(4954)系从我院细菌培养室获得新鲜菌株。所有临床菌株均为对两类或两类以上抗菌药物耐药,为多重耐药菌株。
1.4.2菌悬液的准备分别从血营养琼脂平皿内将上述菌株接种于营养琼脂斜面上,培养20小时左右,用PBS洗下,吸取适当菌液比浊至0.5麦氏(相当于3.0×108CFU/ml)浊度,用1%蛋白胨PBS将菌液稀释为含菌浓度为106CFU/ml~107CFU/ml,同时用PBS作101、102、103、104、105倍稀释,将菌悬液的104、105倍稀释液作活菌计数。
1.4.3消毒剂的稀释以消毒剂原液为第1管,每管为3ml,作对倍稀释至第15管,其有效碘含量依次为2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、15.62、7.81、3.90、1.95、0.97、0.48、0.24ug/ml,每管分别加菌液0.1ml混匀,作用1分钟、2分钟、5分钟各取0.5ml加入1.5ml中和剂中混匀,作用10分钟后接种于营养琼脂平皿内,整个实验过程中实验温度控制在20℃。35℃孵育20~24小时,以未见菌落生长的最低消毒剂浓度为最小杀菌浓度。
2结果
2.1安尔碘皮肤消毒剂的有效碘含量安尔碘皮肤消毒剂的有效碘含量为0.2416%。
2.2安尔碘皮肤消毒剂中和剂鉴定结果所选中和剂,能有效去除安尔碘皮肤消毒剂,对ATCC 6538作用1分钟后的残余作用,且中和剂、中和剂产物对受试菌恢复生长无明显影响。
2.3安尔碘对各菌株的MBC值安尔碘对各菌株的MBC值:安尔碘有效碘含量7.81μg/ml时,作用1分钟,可将本次检测的所有菌株全部杀灭。
3讨论
碘及其复合物对革兰阴性、阳性菌、结核杆菌、真菌和病毒具有广谱抗菌作用。其作用机理是碘元素可直接卤化菌体蛋白质,产生沉淀,同时具有细胞壁穿透氧化作用和游离碘替代微生物的内容物,从而导致微生物的死亡。碘溶液中的含碘量是指游离碘的浓度,它是主要的杀菌因子,随稀释度的变化而变化。并且随着溶液的稀释,游离碘的含量会有一定程度的增加[2]。
目前广泛运用于临床的碘及其复合物主要有碘酊、碘伏,均属于广谱速效杀菌剂。但碘酊着色深,必须脱碘,故无持续杀菌作用,且操作繁琐。市场广泛使用的碘伏粘稠度大,对皮肤有刺激性,并且碘伏是水溶液,稳定性差,挥发慢,有一定的持续杀菌作用。安尔碘是一种含0.2%的有效碘及缓释剂、催干剂、增效剂、护肤剂等的含碘络合物。具有对皮肤无刺激性、速干、着色浅、无需脱碘、持效的杀菌作用等特点。本实验将抗菌药物的药敏稀释法运用于消毒剂的最低杀菌浓度的测定中,将不同浓度的消毒剂作用菌株于不同的时间,观察杀灭效果,所获取的结果直观,易于比较。在临床运用中,可将耐药菌株进行定时监测,能发现耐药菌株,了解医院、病区的细菌耐药情况,具有一定的实用价值。
本实验安尔碘的有效碘含量为7.81ug/ml,作用1分钟时,可将所有检测菌包括标准菌株和临床耐药株全部杀灭。而市售安尔碘使用剂量有效碘含量为2000ug/ml,而且据彭向欣报道:50ug/ml的碘伏作用8分钟,可杀灭大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌[3]。故此实验证实安尔碘为强而有效的杀菌剂。在检测中,尚未发现耐安尔碘的菌株,适宜临床推广应用。
参考文献:
[1]卫生部. 消毒与灭菌实验技术规范(试行)[S].中华人民共和国. 北京: 卫生部, 1997. 102
[2]薛广波. 实用消毒学[M]. 北京: 人民军医出版社, 1986. 403~411
[3]彭向欣. 碘伏类消毒剂在临床上的应用[J]. 中国消毒学杂志, 1992, 9(1): 40
收稿日期:1999-04-25
修稿日期:1999-10-27
