关键词: 抗生素；菌群失调；耐药菌

摘要目的探讨大量使用抗生素引起菌群失调，导致耐药菌株的产生。方法利用分离于肠道菌交替症患儿排泄物的实验菌，建立小鼠肠道感染模型。结果小鼠脱污染再感染，肠道菌群变化，实验菌感染成立。结论根据动物实验提出临床抗生素的大量使用导致肠道菌交替症及相关表现是临床常见并发症之一，而耐药菌造成肠道菌群失调是肠源性感染的始动因素。

中国图书资料分类法分类号R574

肠道菌群失调是临床常见的并发症之一，在医院感染中也最常见。临床观察和动物实验表明，肠道往往是原因不明感染的原发病灶。我们从1名严重肠道菌交替症的患儿粪便中分离出1株多重耐药的肺炎克雷伯氏菌，通过该菌对实验动物的攻击造成实验动物菌群失调，在应激(失血性休克)情况下，观察了细菌的移居情况即肠源性感染的发生。

许多医院感染是由毒力较低的微生物引起，由于这些细菌获得了多重耐药性，并在抗生素干扰了宿主的正常菌群的情况下，使宿主对其变得更加易感，细菌的毒力也相对增强，在肠道菌交替症中，表现尤其突出。

1实验材料与实验方法

1.1实验菌从临床严重菌群失调患儿的粪便中获纯培养之肺炎克雷伯氏菌。

1.2实验动物昆明小鼠(18～21g)雌雄各半，随机分为两组，实验组8只，对照组4只。

1.3抗生素清洁动物肠道(脱污染小鼠的建立)实验组每日给实验动物灌饲硫酸链霉素(100万u)浓度100mg／ml，每日0.4ml，连续灌注3日。对照组灌饲生理盐水。

1.4建立小鼠实验性肠道感染小鼠肠道“清洁”后，接种实验菌株，实验菌浓度1×10⁵CFU／ml，每日小鼠灌饲0.4ml，连续3日，观察小鼠进食、腹泻、立毛、活动迟缓等表现，同时做大便检查，Gram染色及细菌培养，确定肠道内实验菌呈优势繁殖，造成菌群严重失调即实验菌感染+鼠成立，对照组同样接种实验菌。

1.5实验组和对照组同时实施眼球摘除术造成创伤失血的应激状态，失血量40%～50%(休克失血量)，24小时后剖杀。

1.6细菌学检查方法

1.6.1实验动物的粪便培养及染色分别于小鼠实验前抗生素灌胃3天后及接种实验菌3天后取其粪便制涂片，进行Gram染色，观察菌群情况。

1.6.2实验动物的内脏培养无菌条件下，打开小鼠腹腔，剪取肠系膜淋巴结以及肝、脾、肾、心、心血，剪碎分别放置肉浸液中，37℃孵育24小时，观察有无细菌生长，并做进一步鉴定。

1.7病理学检查取空肠、回肠作光镜检查，观察肠粘膜改变。

2结果

2.1小鼠脱污染再感染过程中肠道菌群改变实验前小鼠大便涂片Gram染色观察到G⁺杆菌(+)、G^-杆菌(+)、G⁺球菌、G^-球菌(+)，总菌量Ⅲ，大便呈固状：经抗生素清洁肠道后，大便变稀或带粘液，Gram染色只看到G-杆菌和G⁺球菌，总菌量+，接种实验菌3日后，在大量G^-球菌存在及个别G^-小杆菌、G⁺球菌，总菌量Ⅲ。大便稀带粘液，小鼠进食不佳，大便细菌培养呈肺炎克雷伯氏菌纯培养，根据细菌生化反应及耐药菌谱判定为实验菌株，实验性小鼠肠道肺炎克雷伯氏菌感染成立。

对照组未经脱污染，经3日实验菌灌饲后，大便Gram染色：G⁺杆菌(+)，G^-杆菌(+)，G-球杆菌(+)，G⁺球杆菌(+)。

2.2脏器和血的肠道细菌易位及感染情况实验组：从肠系膜淋巴结中分离出实验菌5只，分离率0.63%；从肝组织中分离出实验菌的3只，分离率0.38%，从脾脏分离出实验菌的1只，未从心血中分离出实验菌。

对照组未在脏器和血中分离出实验菌。

2.3病理检查情况光镜：未见到明显肠粘膜缺损、绒毛脱落等形态学改变，但有轻度水肿。

3讨论

3.1在抗生素压力下选择出的耐药菌株是菌交替症中的关键因素。

近几年来，肠源性细菌感染作为一种重要病理现象已得到广泛的关注。广泛大量使用抗生素，使肠道正常菌群结构遭致破坏，降低了肠道定植抗力，促使了耐药菌的大量繁殖是肠源性感染发生的重要因素之一。由于这些耐药性细菌是在医院内使用抗生素选择出来的，它的毒力常常有很特异的性质。本实验菌分离于因大量使用多种抗生素而造成肠道菌交替症的患儿大便，发现该菌株对多种半合成青霉素和头孢类抗生素耐药，同时对庆大霉素、复方新诺明也有抗药性，使临床治疗困难，造成患儿顽固性腹泻达20余天。由此可见，在临床上大量使用抗生素的同时进行菌群检测，注意细菌耐药情况的改变，防止耐药细菌的大量繁殖，是防止肠道菌交替症发生的关键环节，也是防止肠源性感染的重要措施。

3.2肠道菌群失调一旦成立，在应激状态下，细菌将有可能迁移。首先是肠系膜淋巴结(MLN)，然后是肝、脾，造成肠源性感染。

鉴于抗生素的使用在临床上如此广泛和频繁，那么造成肠道菌交替症是难免的，实验证明，给动物口服抗生素，破坏其微生态环境，再大量植入耐药菌造成菌群失调，在这种细菌性肠道感染情况下，虽然肠粘膜没有明显的病理缺损，但存在的炎性水肿，会使肠壁通透性增高，在应激状态下，细菌则进一步扩大移居范围。我们在实验中见到，首先是肠系膜淋巴结，然后是肝脏、脾脏，其发生的迁移率为MLN0.67%、肝脏0.33%、脾脏0.13%、它们很可能是肠源性感染的易感脏器。提醒我们在大量使用抗生素的同时除了对肠道菌群的监测外，尚应注意患者的基础疾病的恶化合并其它创伤的应激状态，以防止肠源性感染的发生。

抗生素的大量使用导致肠道菌交替症及相关表现是临床常见的并发症之一。耐药菌的优势繁殖造成肠道菌群失调是肠源性感染的始动因素，应激状态则是促进了肠源性感染的发生。因而，怎样合理使用抗生素、预防肠道菌群失调以及肠源性感染的发生是医院感染的不容忽视的重要课题。

参考文献

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(1999-04-20收稿1999-06-10修回)