紫杉醇由中国医学科学院药物研究所提供。药物先以DMSO助溶,再以RPMI 1640培养基配制成浓度为0.1 mg/L,0.2 mg/L,0.5 mg/L的药液,作用于HeLa细胞。HeLa细胞最早来自美国ATCC,由中国医学科学院基础医学研究所细胞生物室保存复苏。实验结果如下:
1. 生长曲线的观察:以对数生长的1×105/ml的HeLa细胞接种于24孔培养板,然后分别加入上述不同浓度的药物,逐日计数细胞并绘制生长曲线图。结果表明,3种浓度的药物对HeLa细胞的生长从第3d起均有抑制生长的作用,并且随药物浓度的增加其抑制作用增强。
2. 分裂指数试验:细胞培养于含上述不同浓度药物的培养皿中,经24h、48h后计数分裂指数。24h后对照组分裂指数为20%,0.1 mg/L药组为10%,0.5mg/L药组为7.6%,48h后对照组为18%,0.1mg/L组为10%,0.5mg/L组为10%。可见该药能抑制HeLa细胞的分裂。
3.集落形成试验:每25ml培养瓶中分别接种300个细胞,14d后观察集落形成情况。结果显示,对照组的集落大而且多见,而加药组的集落小且少见,多数细胞散在,不形成集落。
4. 电镜观察:加药组细胞质浓缩,细胞及细胞核收缩变小,染色质浓缩并凝结成小块,出现染色质沿核膜内侧排列的核着边现象。
5. PI和Hochest 33342染色观察:未加药组细胞着均一的蓝色荧光,加药组细胞经不同时间培养后可见被Hochest 33342染成不均一的亮蓝色细胞,以及被PI染成红色的坏死细胞。可见药物对HeLa细胞有诱导凋亡和杀死的作用。
以上结果提示:紫杉醇对人子宫颈癌HeLa细胞有一定的抑制作用,并可诱导其发生细胞凋亡,其作用机制有待进一步探讨。
收稿 1998-05
