摘要 用周围组织结构完整的大鼠垂体的连续切片，结合免疫组织化学方法，分析大鼠垂体前叶内SP-免疫阳性神经纤维与其周围组织结构中的SP-免疫阳性神经纤维的关系。结果显示：垂体前叶的周围脑膜中有着大量的SP-免疫阳性神经纤维和纤维束，并发出分支，进入垂体前叶内部。同时在垂体两侧的动、静脉壁上亦有着大量的

sP-免疫阳性神经纤维及纤维束，与走行在前叶表面的SP-免疫阳性神经纤维束相连。

此外，在垂体柄腹侧的门静脉壁上有大量的SP-免疫阳性神经纤维束与垂体前、后叶吻侧血管旁的SP-免疫阳性神经纤维或纤维束相连。

近来我们在哺乳动物垂体前叶内发现存在若干种肽能神经纤维，有的数量还较多^[1～4]。在我们之前未引起人们的注意。从光镜研究中发现这些肽能神经纤维多集中在垂体前叶的腺细胞之间而且双标显示这些纤维可和前叶中的多种腺细胞有较密切的接触^[4]。电镜研究证明：在狗垂体前叶中SP、CGRP-免疫阳性神经纤维可和前叶中的促肾上腺皮质激素和生长激素细胞形成突触^[4,5]。而在大鼠垂体前叶中SP-免疫阳性神经纤维主要和催乳素细胞形成突触^[6]。切除大鼠肾上腺，改变机体内分泌状态几天后，垂体前叶中的CGRP-和GAP-43-免疫阳性神经纤维都有了很显著的增加^[7,8]。据此鞠躬^[4,7]等提出了哺乳动物垂体前叶的神经-体液的双重调节假说。以往的研究多是孤立的研究垂体前叶内的肽能神经纤维，而哺乳动物垂体前叶中的肽能神经纤维的来源并不清楚，并且我们在研究大鼠垂体前叶肽能神经纤维时也发现垂体前叶周围有许多神经纤维可进入垂体前叶。因此本实验在取材时保持垂体前叶及周围组织结构的完整，并采取连续切片的办法，目的是对大鼠垂体前叶内的SP-免疫阳性神经纤维与周围组织结构中的SP-免疫阳性神经纤维的关系作一研究，以希望能对大鼠垂体前叶的神经纤维的来源和肽能纤维进入垂体前叶的可能的路径提供一些线索。

材料和方法

SD成年雄性大鼠6只，体重250g±10g,1%戊巴比妥钠2ml腹腔麻醉后，主动脉灌生理盐水150ml，然后用4℃，4%多聚甲醛PB液400ml持续固定1.5h后，取材，注意保持垂体周围脑膜血管完整及垂体柄与下丘脑的连续。将组织浸入20%蔗糖液中，4℃过夜。经恒冷箱连续切片，(厚20μm)。3只大鼠垂体采用矢状切面，2只采用冠状切面，

1只采用水平切面。将切片置于1∶5 000的抗P物质血清中(新西兰Watpa公司赠送)。于室温下24h，经ABC法后，用葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵法呈色。对照实验用无关的抗OXY抗体在1∶5 000的稀释度下替代SP抗体进行免疫染色。无关抗体对照的理由见参考文献[1]。用10^-6mol/L合成的P物质(Cambridge research Biochemical)，吸收SP抗体后再进行免疫染色。替代实验及吸收实验结果：大鼠垂体前叶内未见阳性结果。

结 果

1.大鼠垂体中间叶仅可见到几根SP-免疫阳性神经纤维，走行在中间叶的腺细胞团之间。而垂体后叶却满布SP-免疫阳性神经纤维。没有见到前叶与后叶、中间叶之间的

sP-免疫阳性神经纤维之间的联系。

2.在垂体的矢状切面上，前叶腺体表面与软脑膜之间有大量的SP-免疫阳性神经纤维和神经纤维束，沿吻-尾方向走行，并且能深入腺体内分成许多细支。在前叶吻侧，除脑膜上存在SP-免疫阳性神经纤维束外，还有许多神经纤维束附着前叶内的血管壁上(图1)。

在垂体的冠状切面上，可见到垂体前叶吻侧和尾侧端SP-免疫阳性神经纤维束在垂体前叶中横行，纤维束较长(图2，3)；而在垂体中段，则SP-免疫阳性神经纤维束分布于两翼边缘的脑膜上，纤维束较短。可见神经纤维束发出神经纤维进入到前叶中去。

在水平切面上，可见垂体前叶最腹侧的切片上，有许多条长的SP-免疫阳性神经纤维和纤维束呈吻尾方向走行且相互平行，但其中也有短的，斜行的神经纤维和纤维束(图4)。

3.在垂体尾侧端冠状切面上，颈内动脉位于垂体的下方，硬脑膜外；而海绵窦在此处却紧贴于垂体前叶两旁(图5A)。海绵窦紧贴垂体前叶这一侧的窦壁上有大量的SP-免疫阳性神经纤维束(图6)，与横行于垂体前叶后端中的SP-免疫阳性纤维束相延续。而此时位于前叶下方颈内动脉壁上却没有见到SP-免疫阳性神经纤维。但在靠近吻侧的冠状切面上，颈内动脉位于垂体前叶两侧并与之相贴(图5B)。此时垂体位于动脉内侧，而动脉其余周边却被海绵窦占据。此处动脉(图7)、静脉壁上均可见到SP-免疫阳性的神经纤维，但它们却不是成束存在的，而此处海绵窦壁中的SP-免疫阳性神经纤维却是成束存在。

另外，在垂体四周的脑膜中间，有一些沟通左、右海绵窦的小静脉，其血管壁上有许多SP-免疫阳性神经纤维，呈放射状，或沿脑膜走行，或进入垂体前叶(图8)。

4. 在矢状切面上，可以清楚地看到下丘脑通过正中隆起与垂体后叶相延续。在正中隆起至垂体柄这一段腹侧的门脉血管壁上有许多SP-免疫阳性神经纤维束(图1)。这些血管位于正中隆起和垂体柄的外层，是一些较粗大的血管。它与垂体前叶正中粗大的门脉血管和后叶的血管相吻合。从连续切片的模式图上(图9)，可以清楚地看见正中隆起外层血管壁上的SP-免疫阳性神经纤维束也与前叶吻侧血管壁上的SP-免疫阳性神经纤维和后叶血管旁的SP-免疫阳性神经纤维相连续。这些血管壁上的SP-免疫阳性神经纤维多局限在正中隆起到垂体吻侧端这一狭窄的范围内。

5.三叉神经可发出一些SP-免疫阳性神经纤维进入到垂体周围的脑膜中。连续追踪观察这些纤维，发现这些SP-免疫阳性神经纤维仅局限于在脑膜中走行，仅有分支达垂体前叶的表浅部位，而不深入到腺体内部。

图5 颈内动脉海绵窦与垂体位置关系图

a：垂体尾侧段的冠状切面上，颈内动脉(CA)位于垂体前叶(AP)下方脑膜外，而海绵

窦(CS)位于前叶的两侧，P为脑桥，BA为基底动脉。图中框出的部位见图6。

b：垂体中、前段的冠状切面上颈内动脉(CA)，位于垂体前叶(AP)两侧、海绵窦(CS)

包绕着颈内动脉，MB为乳头体。图中框出的部位见图7。

fig.5 Diagram of the position between the carotid arteries(CA), the cavernous sinuses(CS)

and the anterior pituitary(AP).

a: In the frontal section of caudal pituitary the carotid arteries are under the anterior pituitary

in the outside of the meninges and the caverous sinuses attach the two sides of the anterior

pituitary. The squared area is seen in fig.6

b: In the frontal section of rostal pituitary the carotid arteries attach the two sides of anterior

pituitary and are surrounded by the cavernous sinus. The squared area is seen in Fig.7

图9 正中切面向一侧的连续切片的模式图上，正中隆起(ME)和垂体柄(PS)外层的SP-免

疫阳性神经纤维可和垂体前叶(AP)和后叶(PP)相连。PC为垂体裂，M为脑膜，V为

门脉血管

fig.9 Connection of the SP-immuoreactive nerve fibers in the exteral layer of the median

eminence and the pituitary stalk with the anterior pituitary (AP) and the posterior pituitary

(PP) in the Camera Lucida drawings of serial sections near the median section.

讨 论

以往在研究垂体前叶实验中，都是单独地将垂体从周围结构中分离出来去研究。

这样的取材方法必然丧失垂体周围组织中许多有用的信息，尤其是在垂体前叶的神经纤维来源以及神经纤维进入垂体的路径不清楚的情况下。而本实验在取材时，保留垂体周围组织的完整，包括脑膜和血管的完整，垂体柄与正中隆起、下丘脑的连续，并采用连续切片的方法，来研究垂体前叶中SP-免疫阳性神经纤维与其周围组织结构中的

sP-免疫阳性神经纤维的关系。

垂体周围的脑膜组织中有许多SP-免疫阳性神经纤维或纤维束包绕前叶的四周，在垂体腹侧呈吻尾方向走行，其来源并不十分明确。三叉神经节富含SP-、CGRP-免疫阳性神经元，三叉神经节发出的感觉纤维可分布于脑膜上。在大鼠垂体前叶周围的脑膜中也可见到三叉神经节发出的SP-免疫阳性神经纤维。但连续追踪这些神经纤维发现它们仅局限于脑膜或垂体前叶的浅表。在垂体前叶神经纤维起源的荧光金逆行追踪研究中，我们发现三叉神经节中仅有数个阳性细胞(未发表)。在对三叉神经节的顺行追踪中，也只有一些纤维位于脑膜和前叶浅层(未发表)。这同本实验观察到的三叉神节发出的SP-免疫阳性神经纤维仅分布于前叶表面的脑膜或腺体浅表的结果是一致的。

垂体前叶腹侧面的脑膜上有许多SP-免疫