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改良使用Carazzi苏木素染液的体会

2022-07-29
来源:求医网
H.E染色是组织切片最常用的染色方法,苏木素染液的配方甚多,染色效果也有差异,影响染色效果的因素颇多。未经氧化的苏木素无染色能力,氧化后的苏木素要使细胞核染色鲜蓝,还要借助媒染剂的作用。苏木素、氧化剂、媒染剂三者的搭配比例及染液的使用期限与染色效果都有着直接的关系。多年来,我们在探讨一种使用方便,染色效果好的苏木素染液。经过对原Carazzi苏木素染液配方的不断改良,摸索出一个比较合适的使用方法介绍如下。

1材料和方法

为了更好的优化组合苏木素、钾明矾、碘酸钠三者的比例和探讨染液的有效期,我们多次改良原Carazzi的配方,使这种苏木素染液达到最佳染色效果,其优化的配方是:

苏木素1.5克,硫酸铝钾20克,碘酸钠.2克,无水乙醇5毫升,甘油100毫升,蒸馏水400毫升。

制配方法:用5毫升无水乙醇溶解苏木素,蒸馏水溶解钾明矾(加温至90度,勿煮沸),离火后,将溶解的苏木素和碘酸钠同时加入钾明矾水溶液内,流水冷却至室温,再加甘油,震荡1小时后即可使用。染液在六个月内染色效果最好。

2 结果

2.1 经我们改良后的Carazzi苏木素染液的配方,既不会使苏木素过度氧化,给染色过程增添麻烦,也不会浪费试剂。

2.2 改良后的苏木素染液,使用方便,染色效果优于Ehrlich和Harris苏木素染液,细胞核染呈鲜蓝色,与伊红染色对比鲜明亮丽。特别是对于脱钙骨和长时间甲醛固定的组织染色效果同样满意。更适合冰冻切片作快速H.E染色的活检组织,染色1~2分钟,不需分化,自来水冲洗5~10分钟,即可染伊红,效果也不错。

3 讨论

3.1 配制苏木素染液所用的氧化剂、媒染剂最好用分析纯(AR),因其纯度高、杂质少才能保证苏木素的染色效果。

3.2 切片经苏木素染色后,经1%盐酸酒精分化,需用自来水冲洗30分钟以上,防止残留的盐酸使切片退色。

参考文献:

[1]芮菊生,杜 琴,陈海明,等编著.组织切片技术.上海;人民教育出版社,1980,38~71

[2]杜卓民主编.实用组织学技术.第二版.北京:人民卫生出版社,1998,36~57