关键词: 实验性变态反应性脑脊髓炎；超微结构

摘要：目的研究实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的病理变化。方法利用光镜、电镜观察豚鼠EAE模型的组织学改变。结果光镜下可见脑实质及珠网膜下腔小血管充血，血管周围炎细胞浸润，呈“袖套”状改变，侧脑室旁白质及脊髓后联合、侧角出现髓鞘肿胀、崩解或消失。电镜下可见血管周围明显脱髓鞘，髓鞘呈松散状，部分区域斑块状脱落，明暗相间结构消失，轴突细胞器消失，神经元细胞尼(氏)小体消失，内质网扩张脱颗粒。结论EAE的病理改变主要为血管周围炎性浸润及白质脱髓鞘。

中图分类号：R36文献标识码：A

文章编号：1006-2963(2000)01-049-03

Pathological Studies on Experimental Allergic Encephalomyelitis

LÜ Xue-yingZHANG Feng-yunWANG Li-qunYU Wei-ling

(Department of Immunology）

ZHANG Li

（Department of Electron Microscope,Harbin Medical University, Haerbin 150086, China)

ABSTRACT：ObjectiveTo investigate pathological characteristics of EAE model.MethodsThe pathological changes of EAE were studied in guinea pig with the aid of light and electron microscope.ResultsThe characteristic light microscopical findings are summarized in the following： congestion and inflammatory cuffs of small blood vessels were evident within cerebral parenchyma and subarachnoid cavity. Swelling, disintegration and disappear of myelin shealth were observed both in white matter of lateral ventricle and in lateral horn as well as posterior commissure of spinal cord. Electron microscopy showed evident demyelination around blood vessels. Nissle bodies in neurons were disappeared.ConclusionEAE is characterised by perivascular inflammatory cell infiltration and demyelination in white matter.

Key words： experimental allergic encephalomyelitis; ultrastructure

实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis, EAE)是由T淋巴细胞介导的发生于易感动物的自身免疫病，主要特征为中枢神经系统(CNS)血管周围单个核细胞浸润和白质脱髓鞘。由于鼠EAE模型在临床及组织学上与人CNS炎性脱髓鞘病多发性硬化(MS)的相似性，而使其成为MS的理想动物模型，对研究MS的发病机制具有重要作用。目前国内对EAE病理改变的研究甚少，本实验拟通过用髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein, MBP)免疫敏感动物豚鼠建立EAE模型，研究EAE动物在普通光镜及电镜下病理改变，从而获得一些有意义的发现。

1材料和方法

1.1 EAE动物模型的制备豚鼠由哈尔滨兽医研究所提供，2月龄，雌性，体重300g左右。实验分两组： (1) EAE组，21只，用本室按Kie方法自牛脑中提取且经SDS-PAGE证实的MBP加福(氏)完全佐剂(CFA)，乳化后按体重注入豚鼠后足掌，抗原量约为按体重0.66 μg/g^［1］。免疫后约8～9天发病，发病动物出现不同程度肢体无力，体重减轻，继之瘫痪，伴有尿便障碍，有的抽搐死亡。 (2) 对照组14只，注入等量生理盐水加CFA，此组动物不发病。

1.2 取材动物处死后立即将脑和脊髓取出，除留少量组织置于3%(体积分数)戊二醛中，其余均置于40 g/L的多聚甲醛中固定，固定后2周取材，取脑室周围的脑实质，脊髓分颈、胸、腰3段。

1.3 组织病理HE染色及Weil铁矾苏木素染色^［2］。

1.4 半薄切片及超薄切片哈尔滨医科大学电镜室制备。

2结果与讨论

2.1 光镜所见对照组的神经组织病理检查未见异常，这与此组未出现临床症状吻合。EAE动物大体脑组织可见脑膜血管充血，珠网膜下腔轻度混浊，脑横切面可见呈针尖状的小血管充血，弥漫分布。

EAE动物的组织病理学变化主要表现为急性血管炎伴周围髓鞘脱失，脊髓实质内、珠网膜下腔及侧脑室脉络丛小血管充血，管周有大量炎细胞浸润，形成“袖套”(cuffing)状改变(图1)， 发病初期主要为中性粒细胞浸润，继之以淋巴细胞浸润为主并有少量单核细胞。

Knobler

图1血管周围炎性浸润

Fig 1Inflammatory infiltration around blood vessels

图2白质脱髓鞘

Fig 2Demyelination in white matter

图3髓鞘呈松散状

Fig 3Structure of myelin sheath is divergent

等原位组织化学检测显示：病变部位浸润的淋巴细胞以辅助T淋巴细胞和巨噬细胞/小胶质细胞为主，而细胞毒性T淋巴细胞/抑制T淋巴细胞和B淋巴细胞罕见^［3］，小血管管壁增厚，管周间隙有浆液渗出。病灶播散在CNS白质内，病灶均累及小静脉，有的小静脉破裂，周围少量出血，可见白细胞附壁或正通过管壁，或进而游出血管向炎性区移动。脑膜和脊髓膜亦有炎细胞浸润。侧脑室旁白质尤其侧脑室角周围白质及脊髓后联合、侧角髓鞘肿胀，崩解消失，轴突肿胀，偶有轴突消失(图2)，并可见大量格子细胞存在。神经元细胞无明显改变，有的出现卫星现象。以上病理改变符合文献报道^［3，4］。

2.2 电镜所见电镜下观察EAE发病动物，病变分布不规则，脱髓鞘改变以血管周围明显，大部分髓鞘环形结构呈松散状，部分区域斑块状脱落，明暗相间消失(图3)，轴突细胞器消失，血管基膜增厚，部分区域局灶性坏死。神经元细胞尼(氏)小体消失，内质网扩张脱颗粒。

研究EAE动物CNS的病理改变是确定EAE动物模型成功建立的客观依据，以此为基础进行免疫组化研究对探讨EAE的发病机制，进而MS的发病机制具有重要的意义。

基金项目：黑龙江省自然科学基金资助项目（0-9622）

作者简介：吕雪莹（1972年生），女，黑龙江省五常县人，硕士，助教。

参考文献：

［1］周建年，杨贵贞. 髓磷脂碱蛋白的提取、鉴定及初步应用的研究［J］. 白求恩医科大学学报，1985,11：17-20.

［2］龚志锦，詹榕洲. 病理组织制片和染色技术［M］. 上海：上海科学技术出版社，1993. 114-116.

［3］Knoble RL, Marini JC, Goldowitz D, et al. Distribution of the blood-brain barrier heterotopic brain transplants and its relationship to the lesions of EAE［J］. J Neuropathal Exp Neurol. 1992, 51(1)：36-39.

［4］Raine CS. Biology of disease： the analysis of autoimmune demyelination： its impact on multiple sclerosis［J］. Lab Invest, 1984, 50：608-635.

收稿日期：1998-10-12

修稿日期：1999-01-05