据文献报道，高糖、低脂、低蛋白饮食可致胆色素结石形成，并且在胆石形成过程中有活跃 的自由基反应，自由基有可能参与胆石的形成。正常机体内的谷胱甘肽(GSH)具有抗氧化作 用，不仅能在酶的催化下和脂质过氧化物反应抑制自由基形成，而且可和自由基直接反应使 之转变为稳定分子，成为体内一种重要的自由基消除剂。另外，我们曾观察到结扎胆总管使 其不完全狭窄导致胆色素结石形成的同时，胆汁中K⁺含量降低，Na⁺含量升高，其原因 不 详。我们利用小鼠来观察高糖饮食对肝脏、肾脏GSH含量及钠钾ATP酶活性的影响，以进一步 探讨其可能机理。

1材料与方法

(1)动物选择及处理 选用体重20～30 g昆明小鼠14只，雌雄各半，随机分成两组：对照 组(n＝7)，喂以标准混合饲料；高糖饮食组(n=7)，喂以高糖饲料(淀粉50％，葡萄 糖15％，标准混合饲料35％)。均正常饮水。饲养1个月后处死小鼠，立即打开腹腔，肉眼观 察其胆囊及胆汁情况，然后用4℃生理盐水静脉灌注冲洗后摘取肝脏及肾脏，冰上洗涤，吸 干水份。

(2)GSH含量的测定 分别称取100～200 mg肝、肾组织，按组织重量(g)：5％三氯乙酸( ml)=1：5加入5％三氯乙酸，冰上研磨后，3000 r／min离心5 min，取上清液，于-20℃冰箱 中保存，48 h内测量完毕。测量时吸取0．1 ml组织上清液，分别加入0．1 mol/L磷酸缓冲 液(pH 8．0)4．4 ml，DTNB显色液4.0 ml，柠檬酸钠 (1 g／100 ml)0．5 ml。空白管以H ₂O代替组织上清液。混匀各管5 min内，测其吸光率(波长412 nm)，代入GSH标准曲线回 归方程，求出肝、肾脏的GSH含量(mmol/100 mg组织)。

(3)钠钾ATP酶活性的测定 参照冯北元等报道的方法并加以改进。测得肝、肾吸光率后 ，根据标准曲线，换算成比活单位：释放的Pimmol/(mg pro*h)。所得结果均经统计学处理 。P＜0．05时为显著性差异。

2结果

(1)胆囊与胆汁的变化 打开腹腔，肉眼观察发现，高糖饮食组小鼠的胆汁混浊，但无明 显结石形成。而对照组小鼠胆汁清澈透明。

(2)肝脏及肾脏的GSH含量变化 高糖饮食组小鼠的肝脏及肾脏中的GSH含量均显著高于对 照组。对照组肝脏的GSH含量为73．33±23．86，肾脏的GSH含量为65±16．58。高糖饮食组 小鼠的肝脏及肾脏中的GSH含量分别为184．17±38．59和110±15．49。经t检验，均具有极 显著差异(P＜0．01)。

(3)肝脏及肾脏的钠钾ATP酶活性变化 高糖饮食可引起小鼠肝、肾组织中的钠钾ATP酶活 性升高，其中高糖饮食组小鼠肝组织钠钾ATP酶活性显著高于正常对照组(P＜0．05)。 对照组肝脏及肾脏的钠钾ATP酶活性分别为0．54±0．06和1．05±0．21；高糖饮食组 肝脏 及肾脏的钠钾ATP酶活性分别为2．54±0．58和1．80±0．81，其差异具有显著性(P＜0．05) 。

3讨论

李荣等报道，进食高碳水化合物、低脂、低蛋白饮食可导致胆色素结石，但具体成石原 因不详。推测胆石的形成与自由基的增多之间有一定关系。在胆石形成过程中，有活跃的自 由基反应，氧自由基促进胆红素钙沉淀的形成和聚集，从而有利于胆色素结石形成。此外， 氧自由基还可能通过对糖蛋白的作用，使糖蛋白与胆色素钙形成三元络合物，从而有利于胆 色素结石形成。

本实验中，高糖饮食组小鼠虽未出现成石现象，但胆汁比对照组明显混浊，且肝、肾GS H含量极显著增高(P＜0．01)，钠钾ATP酶活性明显增高，表明在高糖饮食中，伴随体内 代谢改变的同时，自由基的产生导致细胞内GSH含量的增加，细胞内GSH可通过清除脂质过氧 化物抑制自由基的生成，也可直接作用于自由基，使之转变为稳定分子。自由基浓度轻度增 高时能刺激钠钾ATP酶活性增加，对照组钠钾ATP酶活性在肾脏高于肝脏说明肾脏自由基生成 量有可能高于肝脏。在高糖饮食时，肝脏GSH代偿性增高使肝细胞内自由基浓度不至显著增 加。因此，肝脏钠钾ATP酶活性增加，也证明我们的推测：在胆结石形成过程中，胆汁中K +浓度下降与Na⁺浓度的增高与细胞的钠钾ATP酶活性改变有关。而在肾脏由于GSH增高不如 肝脏，故自由基清除率也较低，导致钠钾ATP酶活性虽有增加，但和正常相比无显著差异。 关于高糖饮食引起肝、肾GSH含量增加和钠钾ATP酶活性升高的具体环节，还有待进一步研究。

河南省教委自然科学基金资助项目,No.95476013

收稿日期:1998年9月28日;修回日期 :1999年8月25日