摘要目的：在实验性大鼠心肌梗塞模型上、观察黄芪 对心 梗后左室功能及胶原改建影响。方法：心梗后腹腔注射黄芪注射液2或6周 ， 用放免法测定血浆、心肌血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)及血浆醛固酮(ALD)；动脉插管测定心功能 ；氯 胺T法测定非梗塞区(含梗塞周边区)左室心肌羟脯氨酸的水平；免疫组织化学法测量非梗塞 区左室心肌Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的比值。结果：与心肌梗塞对照组比较， 黄芪可降低6周时的血浆、非梗塞区心肌Ang Ⅱ及血浆ALD水平(P＜0.05)；2周及6周时 可明显升高+dp/dt_max及-dp/dt_max水平(P＜0.05)；减 少非梗塞区左室心 肌羟脯氨酸的含量；降低非梗塞区左室心肌Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的比值(P＜0.05)。[ HTH〗结论：黄芪对心梗后左室功能及胶原改建可产生有益的影响。

The effect of Huang Qi injection on cardiac function a nd left ventricular

collagen remodeling after myocardial infaction in rats

LUO Xin-Ping, SHI Hai-Ming, ZENG Zhi-Yu, FAN Wei-Hu, DAI Rui-Hong

Department of Cardiology, Hua Shan Hospitol, Shang Hai Medical University ,Shanghai(200040)

Abstract AIM：To observe the effect of Huang Qi injection on left ventricular function and collagen remodeling of noninfarcte d area myocardial infarction.Prolonged inotropic stimulati on with digoxin during healing after myocardial infarction increased infarct bu lging. Huang Qi is an inotropic durg, but its effect on left ventricular remodel ing is unknown.METHODS：Ten sham operated SD rats served as co ntro ls (sham). Eighty-eight rats with a moderate to large myocardial infarction were randomly divided into eight groups. The rats were treated with Huang Qi injecti on (2 mg/d intraperitoneal injection) and/or captopril (2g/L drinking water) .Acute myocardial infarction(AMI) group did not receive drug treatment. The anim als were sacrificed at 2 weeks or 6 weeks after coronary artery ligation. The le vels of plasma and myocardial angiotensin Ⅱ and plasma aldosterone (by RIA) and left ventricle function (by catheter measuring) were studied at different time. The collagen content(hydroxyproline levels) and the ratio of type Ⅰand Ⅲ coll agen (by immunohistochemical staining) of noninfarcted area were also assessed i n all rats at the second or the sixth week.RESULTS：Compared with AMI groups, both Huang Qi and captopril decreased the levels of plasma and myoca r dium angiotensin Ⅱ and plasma aldosterone at the sixth week (P＜0.05) and H uang Qi improved systolic and diastolic function (P＜0.05).Compared with sha m group,both collagen content (hydroxyproline levels) and the ratio of type Ⅰ/ Ⅲ collagen of noninfarcted area (including infarct border) increased in AMI2 an d AMI6 group (P＜0.05).The hydroxyproline levels and the ratio of type Ⅰ/Ⅲ collagen significantly decreased after Huang Qi and/or captopril treatment compa red with AMI group at the second or the sixth week(P＜0.05).CONCLUSIO N：Huang Qi can improve cardiac function after myocardial infarction and has beneficial effect on left ventricular collagen remodeling.

MeSHHuang Qi; Myocardial infarction; Collagen; Angiotensin Ⅱ

研究发现：急性心肌梗塞后使用强心剂可对心梗后左室重构产生部分 负面影响，导致左室扩张加剧、梗塞区变薄^［1］。黄芪是一种常用的中药、其良好 的正性肌力作用已为研究所证实，并广泛应用于心肌梗塞的治疗中^［2，3］。作为一 种强心药物，它对心梗后左室重构和功能有何影响却缺乏祥细的研究。本文就这一问题进行 了探讨。

材料与方法

一、动物分组及心肌梗塞动物模型的复制：

选用250～300 g雄性SD大鼠180只(中科院上海分院实验动物中心提供)，参照文献^［4］ 的方法，3%的戊巴比妥钠30 mg/kg(ip)麻醉、结扎冠脉形成心肌梗塞动物模型；结扎部位 于 左侧冠状动脉起源点下1～2 mm处。文献报道^［5］：中到大范围(＞20%)的实验性左 室心梗才能观察到左室重构的变化；为达到这一要求，本研究在造模前及造模后3 d描记常 规9导心电图(肢导+V1，V3，V5)；采用文献^［5］方法判断是否为中到大范围的实验 性心梗，符合标准者进入实验。

共112只大鼠进入实验。动物随机分为9组：①假手术对照组(Sham)12只，开胸打开心包，相 当于结扎部位冠脉下穿线，然后立即缝合，常规饲养2周。②心肌梗塞对照组(acute myocar dical infarction, AMI 2和AMI 6)，心梗造模后分别常规饲养2周和6周。③黄芪2周组(HQ2 )及6周组(HQ6)各15只，心梗造模后立即用黄芪注射液(中科院成都地奥制药公司提供批号 970123) 2 g/d腹腔注射2～6周。④开搏通(captopril)2周组(CAP2)及6周组(CAP6)各15只， 参照文献^［5］方法，心梗造模后将开搏通(上海施贵宝制药公司提供批号6M002G) 按2 g/L的浓度溶解于水中，自由饮水2周或6周。⑤黄芪+开搏通2周组(HQ+CAP2)及6周组(HQ +CAP6)各15只，黄芪注射液2 g/d腹腔注射+2 g/L的浓度的开搏通液自由饮水2或6周。2周及 6周时分别称重并处死动物，进行下列指标测定。共98只大鼠完成实验。

二、血浆、非梗塞区心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及血浆醛固酮(ALD)测定：

采用放免法测定：AngⅡ试剂盒由中国北方生物技术研究所提供，ALD试剂盒由美国DPC公司 提供；按试剂盒说明书操作。心肌取材于左室非梗塞区，血浆及心肌标本的处理参照文献 ［6］方法，血浆AngⅡ单位为pg/mL，心肌AngⅡ单位为ng/g心肌，ALD单位为pmol/L。

三、血液动力学及心功能测定：

参照文献^［5］的方法，3%的戊巴比妥钠30 mg/kg(ip)麻醉大鼠、固定后分离右侧颈 总动脉，插入内充37℃肝素生理盐水1 mm径的塑料管至升主动脉，稳定20 min后用NIHON KO HOEN RM-6018型多道生理记录仪描记动脉收缩压(SBP)及舒张压(DBP)；然后插管至左室腔， 稳定20 min后测量左室收缩末压(LVSP)、左室舒张末压(LVDP)以及左室最大收缩、舒张期压 力微分( ±dp/dt_max)，以反映左室功能。所有电信号均用SMUP计算机软件分析处理( 本校生理教研室提供)。

四、非梗塞区(含梗塞周边区)左室心肌胶原含量测定：

参考文献^［7］的方法，以心肌羟脯氨酸水平来代表心肌胶原含量。称取非梗塞区左 室心肌组织(左室侧壁乳头肌水平上)100 mg，匀浆后将组织粉末置于3 mol/L的HCl液 中125℃酸解 5 h,加入氯胺T氧化变色、0.5～5 μg的羟脯氨酸制作标准曲线，752型分光光度计550 nm 处比色测定。

五、免疫组织化学技术测量非梗塞区(含梗塞周边区)左室心肌Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的比值：

参照文献^［7］的方法制作心肌Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的免疫组化切片。大鼠Ⅰ型及Ⅲ 型胶原单抗由本校病理教研室提供，BA-4000 ABC试剂盒购自美国Vector Laboratories公司 。

将左室乳头肌横切面水平下的心肌立即用甲基纤维树酯(OCT)包埋，标本置液氮中保存。连 续水平冰冻切片2张(5～8 μm)，一张用于Ⅰ型胶原蛋白染色、一张用于Ⅲ型胶原蛋白染色 。按标准技术进行免疫组化切片染色操作。然后在LEICA图象分析仪上进行Ⅰ型及Ⅲ 型胶原蛋白的相对定量分析。主要步骤为：每张切片在非梗塞区左室壁采样测量3处，读取 测量总面积(view area)、阳性染色区域面积(area)及平均光亮度(light);每只大鼠的Ⅰ及 Ⅲ胶原在同样的参数下测量，然后计算单位面积下的Ⅰ及Ⅲ胶原的光亮度(=area×light/vi ew a rea)。最后分别计算非梗塞区左室心肌Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的比值(=Ⅰ/Ⅲ型胶原的单位面 积下的光亮度)，以每只大鼠的比值进行统计分析。

六、统计处理：

所有计量资料均以均数±标准差(±s)表示，用SAS软件分析数据、进行两两均 数的比较，以确定差异的显著性。

结果

一、黄芪对心梗大鼠血浆、非梗塞区心肌血管紧张素Ⅱ及血浆醛固酮含量的影响：

如表1所示：与Sham组比较，AMI 2组的AngⅡ、ALD增加；AMI 6组的AngⅡ增加，ALD降低( P＜0.05)。与AMI 2组相比，HQ2组血浆、心肌的AngⅡ及ALD水平无明显改变(P＞0. 05)；CAP2及HQ+CAP2组上述指标水平均明显降低(P＜0.05)。与AMI6组相比，HQ6组的 血浆及心肌AngⅡ及ALD水平均显著下降(P＜0.05)；CAP6及HQ+CAP6组上述指标水平亦 明显下降(P＜0.05)，其中HQ+CAP6组AngⅡ的下降较HQ6组显著(P＜0.05)。