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一种不易褪色的Masson三色染色方法及其应用

2022-07-29
来源:求医网
中国图书分类号R446文献标识码A

文章编号1001-7399(2000)03-0237-01

目前常用的Masson三色染色法染出的组织切片虽然颜色艳丽、色调对比分明,但容易褪色、难以长久保存。现介绍一种改良Masson三色染色法,经实践证明染色稳定且不易褪色,可长时间保存,现介绍如下。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1标本来自于中山医科大学法医病理学教研室及病理学教研室的解剖心脏200例及5例肿瘤标本。

1.1.2Bouin液饱和苦味酸水溶液75 ml,甲醛25 ml,冰乙酸5 ml。

1.1.3Ⅰ液1%比布列西猩红水溶液90 ml,1%酸性品红水溶液10 ml,冰乙酸1 ml。

1.1.4Ⅱ液磷钼酸2.5 g,磷钨酸2.5 g,蒸馏水100 ml。

1.1.5Ⅲ液苯胺蓝2.5 g,冰乙酸2 ml,蒸馏水100 ml。

1.2方法常规脱蜡至水;置Bouin液室温过夜或56℃ 1 h,流水冲洗至黄色消失,蒸馏水洗;Weigert铁苏木精染核10 min,盐酸乙醇分化,流水冲洗10 min,蒸馏水洗;Ⅰ液染2 min,蒸馏水洗;Ⅱ液染15 min;Ⅲ液染5 min,蒸馏水洗;1%冰乙酸溶液浸洗5 min,常规脱水透明,中性树胶封片。

2结果

对200例心肌及其传导系统进行改良的Masson三色法染色,清晰地显示心肌(包括特殊心肌-传导系统)及胶原纤维,结果心肌着红色,胶原纤维呈蓝色,细胞核蓝黑色,所染切片至今(已2年余)仍未褪色。此外,对5例间质细胞瘤(胃2例、腹壁1例、肝1例及淋巴结1例)进行改良的Masson染色,结果可见瘤细胞之间的胶原纤维呈蓝色,色彩鲜明。

3讨论

本法的优点:本法比现在国内常用的Masson三色法有很大优越性,即颜色鲜艳、对比分明且染色稳定。所染切片保存时间长且不见褪色。与原有Masson三色法有以下不同:(1)用比布列西猩红代替丽春红,同时它与酸性品红之比由7∶3改为9∶1,因比布列西猩红比丽春红与肌纤维结合更牢固。(2)使用磷钨酸与磷钼酸混合液作分化和媒染剂,其浓度比原法加大了5倍,分化和媒染时间15 min,比原法增加2倍,有利于胶原纤维和苯胺蓝的牢固结合。以上两点因素,可能就是促使切片不易褪色的原因。

本法在病理诊断的应用:心血管系统主要由肌肉(包括平滑肌和横纹肌)、胶原纤维和弹力纤维构成,而改良的Masson三色法能选择性地准确地显示胶原纤维和肌纤维,这不仅能把这两者正常比例结构清楚显现,且病变亦易于被认别,是观察心血管病变的首选染色方法,故在心血管病理学、尤其是科研工作上有着广阔的应用价值。

5例间质细胞肿瘤,经Masson三色法染色,可见瘤细胞分布在蓝染的胶原纤维中,这与其免疫组化染色vimentin阳性、keratin阴性、HHF35阴性、S-100蛋白阴性、actin阴性相一致。免疫组化方法在外科病理诊断中具有重要意义,但很多基层病理单位目前尚未有开展免疫组化检测的设备和条件。因而,组化方法仍有实用的意义。

作者简介:梁惠珍,女,45岁,技师宋一璇,女,62岁,教授

参考文献

1,凌启波主编. 实用病理特殊染色和组化技术. 广州:广东高等教育出版社, 1989:4

收稿日期:2000-01-12