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文章编号1001-7399(2000)03-0183-01
骨组织质地坚硬，如不进行脱钙，要制出高质量的组织切片有一定的困难。对研究骨的生长发育、骨质疏松症、骨移植材料及内固定材料和骨愈合之间的关系，均要求在不脱钙的情况下观察。冷冻切片只能切较小的皮质骨切片，而不能做较大的切片，也不能对带金属的内固定材料的进行研究；而传统骨磨片法更费时费力。我们结合两法优点，制出较理想的切片，报道如下。
1材料与方法
1.1标本实验动物为成年兔的尺桡骨，取材前2周肌注或口服四环素80 mg/kg，连续（肌注或口服）3天，间隔1周后再用同法给土霉素，停药3天后处死。
（1）取所需骨组织一段，固定于4%甲醛或4%多聚甲醛液内12～24 h。
（2）方法，用恒冷式冷冻切片机，D刀缓慢修平组织块的一个平面取下。再把修平的一面向下冻在持片台上，另一面修至最薄时取下。用自来水、蒸馏水洗数次，镜下观看无污点。
（3）用502瞬间粘合剂（山东省禹王实业公司禹城化工厂产品）贴于处理好的载玻片上，约20 min或更长。
（4）用细研磨石研磨至在光镜下完全能看到骨的结构，再用蒸馏水反复冲洗干净。
1.2染色方法（1）磨片用4%铁明矾处理10 min，蒸馏水洗。（2）0.1%吖啶橙黄水溶液染2 min，蒸馏水洗。（3）0.1%伊文蓝水溶液染2 min，蒸馏水洗。（4）用滤纸吸干、二甲苯透明、中性树胶封片。
2结果
四环素荧光呈黄色，背景绿色。
3体会
该方法具有省时，易掌握之优点。先用D刀修平骨块的一个平面，切成薄片，再进行磨片，这样可节省磨片时间。在磨片过程中，先粗磨，后细磨，用力要均匀。边磨边在镜下观察，直至能清晰的看到骨结构。用水反复冲洗，使磨片干净，无污点。染色剂内加抗体（免疫荧光），背景应为红色。单用伊文蓝染色，背景则为绿色。
作者简介：吕荣，男，46岁，副主任技师。研究方向：硬组织、大组织切片，神经染色
参考文献
1，龚志锦，詹洲著. 病理组织制片和染色技术. 上海：上海科学技术出版社，1994:281
2，吕荣, 南耘，胡蕴玉等. 骨切片固定液和脱钙剂的筛选及效果观察. 临床与实验病理学杂志,1992; 8(3):229
收稿日期：1999-11-10
