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文章编号1001-7399(2000)03-0206-01
HE染色切片存放时间久远便会产生组织颜色褪变现象。陈旧HE染色切片的重染常遇到胞核难着色、染色对比差、组织易脱片的缺点。作者尝试用碱盐溶液处理，对135例陈旧HE染色示教切片进行重染，效果满意，现介绍如下。
1材料和方法
1.1材料选用1975～1985年颜色褪变的HE染色示教切片135张。
1.2试剂配制
1.2.1碱盐溶液取氯化钠饱和的80%乙醇液540 ml,加入1%氢氧化钠水溶液60 ml。临用时配制。
1.2.2高锰酸钾溶液1.5 g高锰酸钾溶于600 ml蒸馏水。
1.2.3草酸溶液3 g草酸溶于600 ml蒸馏水。
1.3方法
1.3.1切片入二甲苯浸泡至盖玻片自行滑落，清除盖玻片及树胶，置梯度乙醇清洗，再用蒸馏水洗。
1.3.2入高锰酸钾溶液氧化3 min。
1.3.3蒸馏水洗。
1.3.4草酸溶液漂白1 min。
1.3.5蒸馏水洗。
1.3.6置碱盐溶液内处理30 min。
1.3.7用滤纸吸干组织周边液体后，入Harris苏木精液3 min。
1.3.81%盐酸乙醇分色，自来水洗，流水蓝化。
1.3.9入0.5%水溶性伊红染液2 min。
1.3.10用自来水洗后，脱水、透明、封固。
2结果
切片着色均匀，无组织脱落现象。镜下：胞核呈深蓝色，核膜及核内结构清晰，核浆着色对比鲜明，背景透亮。
3讨论
3.1在常规HE染色中，习惯上称苏木精为碱性胞核染料，其实，苏木精经氧化变成酸性染料苏木红，并不具备染色能力，只有后者与铝离子结合形成一种带正电荷的碱性蓝色色精，才能与胞核内脱氧核糖核酸根经正、负电荷的极性吸附完成细胞核染色〔1〕。陈旧的HE染色切片颜色褪变，主要在于首次染色过程中酸性分色液(盐酸)在组织内残留。导致深蓝色的色精逐渐解离成无着色能力的苏木红。此时胞核颜色呈淡红色。作者运用碱盐溶液(含氢氧化钠0.1 mmol/L，pH值为8.5～9)在重染前对切片进行浸泡处理，一方面，中和了组织内残留的酸性分色液，另一方面使组织成分(等电点在3.6～5.2范围内)在碱性环境中带负电荷，增强了苏木精染液与细胞核的极性吸附作用，使细胞核着色变深，结构清晰。另一方面，氢氧化钠在重染前对伊红起褪色作用，与高锰酸钾配合褪片效果更佳。通常碱盐溶液处理时间应控制在25～40 min，以30 min者最佳。
3.2陈旧的HE染色切片重染极易脱片。在实践中，用乙醇溶液代替水溶液能够改善这一现象。另外，清除盖玻片及树胶过程中，应使盖玻片自行滑落为好，它既可保持组织完整，也可避免快速烘烤造成脱片。
作者简介：程国平，男，23岁，医师
参考文献
1，龚志锦，詹洲.病理组织制片和染色技术.上海：上海科技出版社，1994：49～50
收稿日期：1999-12-29
