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改良阿辛蓝染色显示硫酸化粘液物质

2022-07-29
来源:求医网
中图分类号R446.8文献标识码A

文章编号1001-7399(2000)03-0191-01

在胃粘膜上皮肠腺化生时,常采用阿辛蓝(pH 1.0~2.5)染色进行肠腺化生类型鉴别,特别是大肠型肠腺化生具有临床意义。但在阿辛蓝(pH 1.0)染色时,对大肠腺化生中含有硫酸化酸性粘液物质的大肠腺及杯状细胞着色浅,常为阴性或弱阳性表达,针对这一现象,我们采用醋酸钠-盐酸缓冲液配制阿辛蓝染液和在染色前用高碘酸氧化,以增强阿辛蓝的染色能力。取得了很好的效果,现介绍如下。

1材料与方法

1.1材料胃粘膜活检组织经病理诊断有肠腺化生者50例,组织经10%福尔马林固定,石蜡包埋,切片厚度5 μm。

1.2染色配制

1.2.10.1 mol/L醋酸钠-盐酸缓冲液(pH 1.0):取1.36 g结晶醋酸钠,1.26 ml 盐酸溶于250 ml蒸馏水。

1.2.2阿辛蓝染液(pH 1.0):取1 g Alcian Blue 8 GX溶于100 ml 0.1 mol/L醋酸纳-盐酸缓冲液中。

1.3染色步骤

1.3.1切片脱蜡入水,蒸馏水洗。

1.3.20.1 mol/L醋酸钠-盐酸缓冲液(pH 1.0)洗。

1.3.3置1% Alcian Blue 8GX,0.1 mol/L CH3 COO Na-HCl(pH 1.0)溶液内染色30 min。

1.3.40.1 mol/L醋酸钠-盐酸缓冲液(pH 1.0)洗。

1.3.51%核固红水溶液染核10 min。

1.3.60.1 mol/L醋酸钠-盐酸缓冲液(pH 1.0) 充分冲洗,滤纸吸干。

1.3.7常规脱水透明,中性树胶封固。

2结果

含硫酸化酸性粘液物质呈蓝色,胞核红色。

3讨论

阿辛蓝染液是显示酸性粘液物质特异性染料,酸性粘液物质在形态上具有相似性,利用阿辛蓝染液的不同pH值,可以区分酸性粘液物质内不同的化学组成。在pH2.5时含羧基化非硫酸性粘液物质染色良好,在pH 1.0 时羧基不能离子化,因而不能着色,硫酸化粘液物质却被显示出来,而酸性越强的硫酸化粘液物质着色反而越浅〔1〕

为了增强阿辛蓝染液的染色能力,我们试用了不同的酸类溶液和加大溶液摩尔浓度的方法来改善着色偏浅的问题,但效果不明显。然后我们根据加入电解质可以增强阿辛蓝染色能力的机制〔1〕,采用0.1 mol/L醋酸钠-盐酸缓冲液,既维持了溶液的pH值,又保证了阿辛蓝染液的稳定性,对增强染色起到了一定作用。

阿辛蓝在酸性环境下对羧酸化粘液物质比对硫酸化粘液物质亲和力大一些〔2〕,所以在显示硫酸化粘液物质时比羧基化粘液物质困难。有作者使用胃蛋白酶处理〔2〕或用铬酸氧化的方法〔1〕来增强阿辛蓝染色能力。我们采用能与胃蛋白酶处理作用互换应用〔3〕和同样具有铬酸氧化作用的高碘酸来增强阿辛蓝染色,收到了很好效果。

作者简介:胥维勇,男,42岁,主管技师

参考文献

1,Peares AGE 著(马仲魁译). 组织化学. 第2卷, 北京:中国医学科技出版社,1990:287~290,330

2,Gulling CFA 著(孔庆雷译). 组织病理学与组织化学技术手册.北京:科学出版社,1982:270~271

3,胥维勇,杨红,李科等. 改良PAMS染色法显示肾小球基底膜. 临床与实验病理学杂志, 1997;13(2):181

收稿日期:1999-09-06

修回日期:1999-11-29