文章编号1001-7399(2000)02-0165-01
经典的髓鞘染色方法所需时间长、易脱片且难于掌握。笔者通过反复摸索,发现利用超声波进行髓鞘染色能克服上述缺点,获满意结果,现介绍如下。
1材料与方法
1.1材料取外周坐骨神经和尸检大脑组织各5例。所有组织均经10%福尔马林液固定,常规石蜡包埋;在AO切片机上切取5 μm厚连续切片,于65℃烤箱烘烤4 h备用。所有试剂配制均参考凌启波〔1〕的方法进行。采用江苏常州中威电子有限公司生产的DCSK-多功能超声波组织处理仪。
1.2方法切片常规脱蜡至水→3%重铬酸钾中,于超声波组织处理仪处理(76℃)10 min→蒸馏水洗2×1 min→4%硫酸铁铵媒染液中,于组织处理仪处理(76℃)30 min→蒸馏水洗后,切片入碳酸锂苏木精,在超声波组织处理仪中染色(76℃)10 min→自来水清洗2×5 min→4%硫酸铁铵分化(镜下控制)至背景呈淡黄色,髓鞘深蓝色→自来水清洗后,Loyez分化液中分化2 min,流水洗2 min→脱水、透明、封片。
1.3对照采用凌启波〔1〕介绍的经典碳酸锂苏木精染色法和郑辉〔2〕报道的微波染色法作对照。
2结果
髓鞘呈深蓝色,背景为极浅的淡黄色。坐骨神经髓鞘环绕神经轴索外周,纵切面呈藕节状,横切面为小圆圈状(图1);脑组织中髓鞘呈深蓝色,神经轴突不着色(图2)。
3讨论
经典碳酸锂苏木精染色法的主要缺陷是染色时间长和易脱片〔1,2〕。郑辉等〔2〕利用粘附剂贴片,主要染色步骤采用微波处理,虽然可完全解决脱片问题,但微波处理过程中,试剂容易挥发,消耗大,而且基层病理科并非均有微波炉,故推广可能受到某些限制。我们利用超声波组织处理仪进行髓鞘染色,对切片没有任何要求,即一般的蛋白甘油粘附的石蜡切片亦未发现脱片现象,整个染色过程在1.5 h完成,而且超声波组织处理仪是基层病理科的常规设备,故利用超声波组织处理仪进行髓鞘染色特别适用基层病理科的临床病理诊断,值得推广。
根据笔者的经验,切片不宜太薄,否则髓鞘着色浅影响观察,我们认为切片厚度以5 μm比较合适。此外,在染色操作中,碳酸锂苏木精的染色可适当偏深,这样使分化容易控制,获得满意结果。
图1坐骨神经髓鞘纵切面呈藕节状。髓鞘染色×400
2大脑皮质髓鞘呈发丝状。髓鞘染色×400
作者简介:张革进,男,40岁,实验师
参考文献
1,凌启波.实用病理特殊染色和组化技术.广州:广东高等教育出版社,1989:158~161
2,郑辉.微波技术在髓鞘染色中的应用.临床与实验病理学杂志,1999;15(2):182
收稿日期:2000-02-01
