摘要目的：研究间变性大细胞性T细胞性淋巴瘤(anaplastic large T cell lymphoma, ALTCL)EB病毒表达情况及其与CD₅₆阳性表达间的关系。方法：采用免疫组织化学LSAB法检测15例ALTCL中Ki-1及CD₅₆的表达，并用原位杂交法检测其EBERs。结果：15例ALTCL中Ki-1均阳性(100%)，5例CD₅₆阳性(33.3%)，9例EBERs阳性。其中，3例ALTCL中EBERs和CD₅₆共同阳性。结论：ALTCL的发生同EB病毒感染有一定关系；部分ALTCL中有CD₅₆阳性表达，EB病毒是否感染ALTCL同CD₅₆表达无关。

中国图书分类号R733；R392.31文献标识码A文章编号1001-7399(1999)02-0130-02

Expression of Epstein-Barr virus and CD₅₆ in anaplastic large T cell lymphomas

Jiang Qingping

（Dept of Pathol, Zhujiang Hospital, First Military Medical University, Guangzhou510282）

Lin Hanliang

（Dept of Pathol, Sun Yat-Sen University of Medical Sciences, Guangzhou510089）

Rao Huilan

（Dept of Pathol, Tumor Hospital of Sun Yat-Sen University of Medical Sciences, Guangzhou510089）

ABSTRACTPurposeTo research the expression of EBERs and the relationship between EBV infection and CD₅₆-positive expression in anaplastic large T-cell lymphomas(ALTCL).MethodsFifteen cases of ALTCL were detected Ki-1 and CD₅₆ by immunhistochemistry (LSAB method) and EBERs by in situ hybridization.ResultsOf the 15 ALTCLs, all expressed Ki-1, and 5 cases CD₅₆ positive (33.3%). Whereas, 9 cases of 15 ALTCLs showed EBERs-positive (60%). Of 9 cases of EBERs-positive ALTCLs, 3 cases also showed expression of CD₅₆.Conclusion The findings suggest that EBV infection may be invoved in the neoplastic transformation for ALTCL; and some ALTCLs express CD₅₆, EBV infection is not surely related with CD₅₆-positive ALTCL.

KEY WORDS lymphoma, T-cell; herpesvirus 4, human; immunohistochemistry; in situ hybridization; antigens, CD₅₆

间变性大细胞性T细胞性淋巴瘤(ALTCL)因其特殊的病理学特征及免疫表型而越来越引起人们重视。其发生同EB病毒的关系各研究者意见不一。近年来，国外有学者认为T细胞性淋巴瘤中EB病毒感染和CD₅₆阳性表达有密切关系。作为T细胞性淋巴瘤的一个特殊类型，ALTCL是否表达CD₅₆及EB病毒感染和CD₅₆表达的关系尚未具体研究。我们将采用免疫组织化学法检测ALTCL表面抗原和原位杂交法检测EBERs，探讨ALTCL中EB病毒感染和CD₅₆的表达情况及它们之间关系。

1材料和方法

1.1标本来源收集中山医科大学病理教研室及中山医科大学附属肿瘤医院病理科1990～1997年存档ALTCL活检蜡块15例。

1.2试剂方法

1.2.1免疫组织化学法采用链菌素抗生物素蛋白-辣根过氧化物酶(LSAB)法检测Ki-1(Dako, M723)、CD₅₆(Monosan, MON1006)，经微波预处理13 min和一抗4℃过夜。

1.2.2原位杂交法探针为异硫氰酸荧光素(FITC)标记的脱氧寡核糖核酸(Dako， Y017)。主要步骤为：0.1 g*L^-1蛋白酶K于37℃消化30 min，95%乙醇脱水，滴加EBERs探针5～10 μl于37℃杂交2 h，50 μl碱性磷酸酶耦联的抗FITC(Dako，K0046)37℃孵育30 min，BCIP/NPT显色，甲基氯复染。阳性对照为B95-8细胞株。

2结果

15例ALTCL均Ki-1阳性(图1)。它们有共同病理学特点：瘤细胞个体大，呈多型性，圆或椭圆形，胞浆中等量，嗜双色。核异型多样，染色质粗，且凝聚于核膜，核仁大，分裂象易见。瘤细胞沿窦和滤泡间浸润，除散在分布外，有形成团块状倾向(图2)。

图1Ki-1阳性，阳性信号为细胞膜示棕黄色颗粒。LSAB×200

图2间变性大细胞性T细胞性淋巴瘤。HE×200

15例ALTCL中5例CD₅₆阳性(33.3%)。阳性信号为细胞膜显示棕黄或棕褐色颗粒(图3)。

图3CD₅₆阳性，阳性信号为细胞膜示综黄色颗粒。LSAB×200

15例ALTCL中9例EBERs阳性(60%)。阳性信号为细胞核内呈紫蓝色颗粒着色(图4)。其中3例EBERs和CD₅₆共同阳性。

图4EBERs阳性，阳性信号为细胞核内呈紫蓝色颗粒。原位杂交×200

3讨论

人们研究发现部分间变性大细胞性淋巴瘤继发于霍奇金淋巴瘤、多形T细胞性淋巴瘤等^〔1〕。国内外报道均证明霍奇金淋巴瘤、T细胞性淋巴瘤的发生均和EB病毒感染有一定关系^〔2，3〕。那么，EB病毒感染和ALTCL是否有关呢?1995年，Lopategui等^〔4〕报道14例香港间变性大细胞性淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma, ALCL)病例中3例阳性和20例美国病例中1例阳性，他认为EB病毒感染同ALCL无关。1997年，Shimakage等^〔5〕报道7例ALCL均检出EB病毒，证明EB病毒在ALCL细胞转化过程中起着重要作用。大部分ALCL为T细胞型，具体关于其和EB病毒的关系很少见报道。我们的研究中15例ALTCL中9例阳性(60%)，证明EB病毒感染和ALTCL的发生有一定关系。

CD₅₆是神经细胞粘附分子(neural cell adhesion molecule, NCAM)的一个异构体，是一种能被抗Leu-19、NKH-1单克隆抗体识别的糖蛋白，N端连有丰富唾液酸，主要表达于人类NK细胞上及少数介导人类主要组织相容性抗原非限制性细胞作用的T淋巴细胞上^〔6〕。序列免疫沉淀法证明CD₅₆同表达于神经母细胞瘤上的NCAM分子有类似的结构，提示CD₅₆可能同神经细胞上的NCAM有类似功能，即介导细胞粘附作用^〔7〕。近年来，有国外学者研究表明部分T细胞性淋巴瘤表达CD₅₆，并且CD₅₆的表达同EB病毒感染有100%密切关系，认为CD₅₆阳性TCL均感染EBV。CD₅₆在其中可能起着中介作用^〔8〕。

作为TCL的一个特殊类型，Akamatsu等^〔9〕检测了12例ALTCL中无1例CD₅₆阳性。我们的研究中，15例ALTCL中5例CD₅₆阳性(33.3%)，9例EBERs阳性，其中3例共同阳性。说明ALTCL也有一部分表达CD₅₆，但EB病毒是否感染ALTCL同CD₅₆表达并无明显关系。

作者简介：江庆萍，女，27岁，硕士，助教

林汉良，男，55岁，教授，主任医师

参考文献

1Herbst H, Dallenbach F, Hummel G et al. Epstein-Barr virus DNA and latent gene products in Ki-1 (CD₃₀)-positive anaplastic large cell lymphomas. Blood, 1991;78(10):2666～2673

2Weiss LM, Chen YY, Shibata D. Epstein-Barr virus and Hodgkins disease. Am J Pathol, 1991;139:1259～1265

3Stein H, Dienemann D, Dallennbach F et al. Peripheral T-cell lymphomas. Ann Oncol, 1991;2:163

4Lopategui JR, Gaffey MJ, Chan JK et al. lnfrequent association of Epstein-Barr virus with CD₃₀-positive anaplastic large cell lymphomas from American and Asian patients. Am J Surg Pathol, 1995;19(11):42～49

5Nakamura S, Shiota M, Nakagawa A et al. Anaplastic large cell lymphoma: a distinct molecular pathologic entity: a reappraisal with special reference to p80 (NPM/ALK) expression. Am J Surg Pathol, 1997;21(12):1402～1432

6Nitta T, Yagita H, Sato K et al. Involvement of CD₅₆ (NKH-1/Leu-19 antigen) as an adhesion molecule in natural killer target cell interaction. J Exp Med, 1989;