文献标识码A文章编号1001-7399(1999)01-0067-01
成功的肾穿刺是获得足够多的肾小球,以满足光镜、电镜及荧光镜三镜检查需要。多种原因可致小儿肾穿刺组织少于成人的。因组织块小而影响病理诊断。为提高小儿肾穿刺病理诊断的准确率,除肾穿刺操作顺利,制片染色良好外,标本处理亦很重要。
1穿刺标本取出后,迅速判断是否为肾组织。暗红或灰白色,置于生理盐水内沉底者为肾组织。
2分清皮质和髓质部,一般靠针尖端为髓质部,靠针柄端为皮质部,但若穿刺过深而穿透肾下极时,则不能由此判断。
3我们使用TEMNO针穿刺。所取组织比Tru-cuf针穿刺所取标本稍细,因此不能纵剖分段。将所取肾组织从皮质部开始依序分为三段(电镜2 mm,荧光镜4 mm,余下为光镜标本),当标本较短时,应尽可能再取一条,否则应优先满足光镜检查。
4光镜标本以Duboscg-Brasil液固定4 h。电镜标本以2.5%戊二醛固定1 h后, 用0.1 mol*L-1PBS冲洗戊二醛,置4℃冰箱。荧光标本用生理盐水
湿润的纱布置4℃冰箱24 h或置于Michel保存液中10天以上。经以上处理的标本可互相转换使用。
5在光镜下确认有肾小球后再送电镜和荧光镜观察。如光镜下无肾小球,可将上述荧光镜或电镜标本作石蜡包埋,常可获得较好染色。不可直接用冷冻切片作光镜染色,因切片厚,导致细胞重叠、结构不清楚而影响光镜诊断。2.5%戊二醛固定时间过长,常致组织收缩而使结构模糊。
6光镜观察满意,而电镜下无肾小球时,可将剩余组织蜡块经二甲苯各级乙醇和PBS处理后再做电镜观察,可较好地观察肾小球基底膜改变及电子致密物沉积情况。
7光镜观察满意而荧光镜下无肾小球时,可用石蜡切片作免疫酶标,可确定肾组织内沉积物。
通过以上处理,可最大限度提高三镜检查率及诊断率。减少重复肾活检,减轻患儿及家长的精神与经济负担,但若三镜标本均无肾小球时,为明确诊断,则需进行重复肾活检。
收稿日期:1999-01-15
