摘要目的：探讨T、B细胞非霍奇金淋巴瘤免疫表型染色的特异性和交叉反应性。方法：应用S-P免疫组织化学方法对62例非霍奇金淋巴瘤进行CD₂₀、CD₇₄、CD_45RO、CD₄₃和CD₃免疫表型测定。结果：发现B细胞表型抗体CD₂₀和CD₇₄对B细胞非霍奇金淋巴瘤染色阳性率达88.2%～100%，但CD₇₄的特异性不强，与T细胞有26.7%(4/15)～35.7%(5/14)的交叉反应，而CD₂₀表现出高度的特异性，交叉反应为0。T细胞表型抗体CD_45RO、CD₄₃和CD₃对T细胞非霍奇金淋巴瘤染色阳性率达85.7%～100%，但CD_45RO和CD₄₃对B细胞的交叉反应高达40%(6/15)～47.1%(8/17)，特异性不强，而多克隆抗体CD₃与B细胞仅有5.9%(1/17)的交叉反应，表现出明显的特异性。结论：提示在进行T、B细胞免疫表型划分时，应使用一组包括CD₂₀、CD₇₄，CD_45RO、CD₄₃和CD₃等抗体，CD₃是一种具有高度敏感性和高度特异性的T细胞标志抗体，值得推荐。

中国图书分类号R733.4； R392文献标识码A文章编号1001-7399（1999）01-0015-03

Specifity and reactivity of antibodies of B-cell and T-cell immunophenotype

¹Chen Linying, ¹Zhang Sheng, ²Wang Xiaoya

(¹Dept of Pathol, First Affiliated Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou350005; ²Fuzhou Maxim Biotech Inc, Fuzhou350002)

ABSTRACTPurposeTo investigate the specificity and reactivity of antibodies of B-cell and T-cell of NHL.MethodsSixty-two cases of NHL were examined for CD₂₀、CD₇₄、CD_45RO、CD₄₃ and CD₃ using S-P immunohistochemical methods.ResultsThe positivity rates of CD₂₀ and CD₇₄ in B-cell NHL were 88.2%～100%， and the reactivity of CD₇₄ with 26.7%～35.7% of T-cell NHL suggested that it may lack specifity; However, CD₂₀ as high specificity as its cross-reactivity was zero. The staining rates of CD_45RO，CD₄₃ and CD₃ with T-cell were 85.7%～100%. The cross-reactivity of CD_45RO and CD₄₃ with B-cell was 40%～47.1% and their specificities were lack, but the polyclonal CD₃ only reacted with 5.9%(1/17) B-cell NHL and had very high specificity.ConclusionFor determination of B-cell and T-cell immunophenotyping a panel of antibodies comprising CD₂₀、CD₇₄，CD_45RO，CD₄₃ and CD₃ is recommended. CD₃ is a antibody of T-cell marker with high sensitivity and specificity.

KEY WORDSlymphoma, B-cell; T-cell; lymphoma; immunophenotyping; immunohistochemistry

非霍奇金淋巴瘤的分类方法很多，通常以Lukes-Collins免疫功能分类为基础，也即以现代免疫学观念和新技术用于淋巴瘤的研究，产生以形态学与功能相结合的免疫功能分类，即将非霍奇金淋巴瘤分为B细胞、T细胞和组织细胞三大类的不同亚型。精确的表型划分对于恶性淋巴瘤的正确分类是非常重要的。通常是用一组可用于石蜡切片的抗体对淋巴瘤进行免疫分型，这包括许多种能识别B或T细胞抗原的试剂，包括CD₂₀、CD₇₄、CD₄₃、CD_45RO和CD₃等抗体。然而其中有些为大家所常用的淋巴瘤分类抗体，在进行免疫组化染色时表现很强的交叉反应性，这种现象很大程度上困扰着我们对淋巴瘤的分类。本文应用一组B、T细胞淋巴瘤，对这些试剂免疫组化染色的敏感性和特异性进行分析。

1材料和方法

1.1组织标本收集福建医科大学附属第一医院1994～1998年常规活检标本62例，常规福尔马林固定，24 h内取材，4 μm厚连续切片，经病理诊断为淋巴瘤，参照修正后的Kiel分类方法^〔1〕。

1.2试剂CD₂₀(L₂₆)，CD₇₄(LN₂)，CD₃(多克隆)，CD_45RO(UCHL₁)，CD₄₃(MT-1)抗体及S-P(广谱)试剂盒均购自美国Maxim Biotech公司(由福州迈新公司提供)，操作按说明书进行。

1.3微波抗原修复组织切片常规脱蜡至水化，用微波炉(National家用微波炉)行抗原修复。先用中档4～6 min对柠檬酸缓冲液进行升温，待见到轻度沸腾后即用中低档保温10 min(可见到微小气泡)；一抗孵育2 h(室温25℃左右)，常规DAB-H₂O₂显色8 min，苏木素复染。

2结果

本组62例非霍奇金淋巴瘤患者，年龄19～77岁，平均46.4岁，其中男性37例，女性25例。按修正后的Kiel分类法，B细胞非霍奇金淋巴瘤33例，其中低度恶性17例，高度恶性16例；T细胞非霍奇金淋巴瘤29例，其中低度恶性14例，高度恶性15例。

总体观察微波抗原修复染色结果，在所有病例中免疫组化阳性染色为带有微弱的浆染色、细胞膜染色，组织结构清晰，未见明显背景染色。

62例非霍奇金淋巴瘤行免疫组化染色结果(图1～8)。

图1 低度恶性B细胞非霍奇金恶性淋巴瘤CD₂₀染色阳性。S-P×400

图2 低度恶性B细胞非霍奇金恶性淋巴瘤CD₃染色阴怀。S-P×400

图3 高度恶性B细胞非霍奇金恶性淋巴瘤CD₂₀染色阳性。S-P×400

图4 高度恶性B细胞非霍奇金恶性淋巴瘤CD₃染色阳性。S-P×400

图5 低度恶性T细胞非霍奇金恶性淋巴瘤CD₂₀染色阳性。S-P×400

图6 低度恶性T细胞非霍奇金恶性淋巴瘤CD₃染色阳性。S-P×400

图7 高度恶性T细胞非霍奇金恶性淋巴瘤CD₂₀染色阳性。S-P×400

图8 高度恶性T细胞非霍奇金恶性淋巴瘤CD₃染色阳性。S-P×400

2.1B细胞非霍奇金淋巴瘤17例低度恶性的B细胞非霍奇金淋巴瘤中，B细胞表型标志的CD₂₀和CD₇₄染色阳性率分别达94.1%(16/17)，88.2%(15/17)；而作为T细胞表型标志的CD_45RO，CD₃和CD₄₃对B细胞的染色交叉率分别为44.2%(7/17)，5.9%(1/17)，47.1%(8/17)。

16例高度恶性的B细胞非霍奇金淋巴瘤中，CD₂₀和CD₇₄染色阳性率分别达100%；而CD_45RO、CD₃和CD₄₃对B细胞的染色交叉率分别为43.7%(7/16)，0(0/15)，40.0%(6/15)。

2.2T细胞非霍奇金淋巴瘤14例低度恶性的T细胞非霍奇金淋巴瘤中，作为T细胞表型标志的CD_45RO、CD₃和CD₄₃阳性染色率分别为85.7%(12/14)，100%(14/14)，100%(14/14)；而作为B细胞表型标志的CD₂₀和CD₇₄对T细胞的染色交叉率为0(0/14)和35.7%(5/14)。

15例高度恶性的T细胞非霍奇金淋巴瘤中，CD_45RO；CD₃和CD₄₃ 阳性染色率分别为100%(15/15)，86.7%(13/15)，93.3%(14/15)；而CD₂₀和CD₇₄对T细胞染色交叉率为0(0/15