近年来肝纤维化研究已有较大进展，业已公认，肝纤维化是一种慢性肝病的共同病理学基础，虽不同肝病致病机理不完全相同，但各种不同病因肝纤维化发生最终共同途径是肝星状细胞（hepatic stellate cell ,HSC;旧称贮脂细胞）的激活，转化为肌成纤维细胞，现认为，HSC的激活是关键。肝纤维化分子生物学研究的进展，人们已能从基因水平来认识，似乎可认为肝纤维化是种继发性基因调控失调肝病^[1]。许多酒精性肝病患者虽已戒酒，肝纤维化和肝硬化断续发展^[2]，迄今已有资料证明，去除原来引起肝细胞损伤的致病因子，肝纤维化进程仍可自行延续，这些更引起人们对肝纤维化研究的重视，本文就近年来肝纤维化研究主要进展作扼要介绍，供参考。

一、肝纤维化形成过程已趋明朗

1993年Hogemann和Domsche复习肝纤维化文献的基础上，以图示肝纤维化形成的新概念^[3]，经不断的完善，至今多认为致肝病因子造成肝细胞（HC）损伤，引起枯否细胞激活，分泌多种细胞因子，随同血小板、肝窦内皮细胞和HC等分泌的多种细胞因子，与某些化学介质共同作用于HSC，使其激活、转化为肌成纤维细胞。通过旁分泌与自分泌作用，使HSC增殖，合成大量的细胞外间质（ECM），ECM的分泌增加，降解减少，以致其在肝内大量沉积，肝纤维化逐渐形成。Gressmer认为HSC的激活可分3个阶段^[4]，即炎症前期、炎症期和炎症后期，虽有资料显示炎症前期已有HSC的激活，肝纤维化是发生在炎症后期，具有明显肝脏炎症的甲型肝炎却不发生肝纤维化，而无明显炎症的肝病者，仍可发生肝纤维化^[5]。近年研究较多的是酒精性肝纤维化，曾有报道75例确诊为酒精性脂肪肝患者，肝活检发现有40%存在静脉周围纤维化，而不伴酒精性肝炎，疑及肝炎已恢复。狒狒实验排除此可能性，但仍不能排除酒精引起肝脏极小炎症和坏死，直接作用胶原蛋白的代谢和通过介质导致肝纤维化。近认为铁过量造成肝纤维化和肝硬化，几乎没有炎症发生，是经过氧化产物活化KC，通过TGF-β、TNF-α激活HSC而发生肝纤维化^[6]。

二、参与肝纤维化形成的介质

1996年Gressner总结参与肝纤维化的介质分肽类与非肽类，其中细胞因子有20余种，分别来自肝内细胞、外周血单个核细胞、血小板、成纤维细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞等。非肽类主要为乙醛、乳酸、活性氧、铁、游离脯氨酸类等。合成ECM的主要细胞是HSC转化后的肌成纤维细胞。Knittel等研究认为生长因子是最主要的致肝纤维化介质，它对HSC激活、增殖及ECM抗蛋白酶、TGF-β受体的基因表达均有促进作用，并有剂量依赖关系、TGF-β₁具有调节HSC基因表达的作用^[7]。Lee等研究，首次证明了TNF-α对HSC亦有增殖作用^[9]。肌成纤维细胞具有分泌TNF-α和TGF-β作用，此更进一步说明在致肝纤维化病因除后肝纤维化仍可延续，其机理可能与肌成纤维细胞自分泌有关，Mallat等IFN-γ对HSC转化后的肌成纤维细胞增殖、胶原合成、分泌均有抑制作用，而TGF-β₁和血小板衍生物的生长因子BB均有刺激肌成纤维细胞作用^[10]。Napoli等报道，通过PCR加Dotblot定量法，测定进行性肝损伤的慢丙肝患者肝脏内Th1相关的细胞因子，IFN-γ、IL-2mRNA水平和Th2相关IL-4、IL-10mRNA水平，前者表达增加，后者表达降低，但在IL-4表达不完全一致。从炎症方面考虑，IFN-γ、TNF-α等均属主要前炎症因子，而TGF-β₁、IL-10是抗炎症因子。亦有报道肝脏与PBMC内的INF-γmRNA水平无显著差异，在慢性肝炎患者肝脏的mRNA水平与血清INF-γ含量均有明显增高^[12]。多种细胞因子对肝纤维化均有不同程度作用，上述者现研究较多，可能亦是主要的，随研究深入可能一一阐明。

三、细胞外间质研究迅猛发展，短期内可望用于临床^[13]

（一）间质新分类：在肝内不仅发现了更多的蛋白质成分，而且证明了它们具有一些独特的功能，有关ECM及其受体在信号传递和对细胞之间的相互作用，已形成诸多新的概念，迫使人们对其认识需不断更新。ECM对细胞增殖，分化与迁移的影响，在炎症、纤维化发生和肿瘤生长过程均起到重要作用，其研究将对肝纤维化，恶性肿瘤等难治之症早期诊断与有效治疗提供强有力的手段。关于间质既往多分四大部分，即胶原蛋白、弹性蛋白、非胶原糖蛋白和蛋白多糖。前二者均以纤维化形成存在，亦统称纤维，而后二者称基质，基质糖蛋白就由此而来，现已将细胞外间质与细胞外基质似为同义词。ECM新的分类在发展与完善中，初步认为分为（1）胶原蛋白，人体共有19种，肝中存在有Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ、Ⅹ、Ⅳ、Ⅷ等8种；（2）弹力纤维及相关蛋白；（3）非胶原糖蛋白，研究进展较大；（4）糖胺多糖，人体存在透明质酸、硫酸软骨素又有A和C之分、硫酸皮肤素或称硫酸软骨素B、硫酸角质素、肝素、硫酸乙酰肝素。现仅知HA是唯一能以自由链存在而不与蛋白链结合的GAG；（5）蛋白多糖由一核心蛋白侧链连接多个数目不等的GAG而构成，可存在于细胞表面，细胞内或与其它ECM结合。近年来不断有新的PG发现，其命名根据PG链上GAG的类型和组织来源而确定，例如基膜硫酸肝素蛋白多糖，或根据核心蛋白种类而确定的核心蛋白，含DC/CS侧链。Johnson将PG分为（1）基质相关PG包括aggrecanDC/CS、 decorin DC/CS、fibromodulinDC/CS、 perlecan DC/CS、betahlycanDC/CS、 lumican。它们的作用是组织的水合作用结合补体、结合生长因子、从而调节它们的生物利用度，例如通过核心蛋白decorin与TGF-β₁结合，还有调节胶原纤维形成和参与某些组织的间质成分；（2）膜相关PG，有跨膜PG之称，均含有跨膜组分，有Syndecan家族、glycipan家族及 thrombomodulin、betaglycan和 CD44，它们的功能是细胞间、细胞与基质间相互作用介质、生长因子受体和蛋白酶抑制者，也有专家认为应将（6）基质金属酶类；（7）与基质结合的生长因子；（8）组织trans--glutamine和（9）整合素亦列入ECM的分类中。整合素系ECM受体，它将ECM与细胞连接在一起，且将众多信息由细胞外传递到细胞内，它跨膜存在，可分细胞外、跨膜和细胞内3个片断组成，这方面进展亦甚快，颇受人们的重视。在前述诸多ECM中，因decorin和biglycan现知仅在肝受损时，HSC能大量合成，此为肝纤维化科研工作者最为关注的方面。

（二）非胶原糖蛋白 非胶原糖蛋白目前已发现非胶原蛋白已有10余种，主要有（1）纤维连结蛋白和副纤维连结蛋白（vitronectin,VN）。FN已有较多报道不赘述。 vN分布同 FN ，它们含有RGD细胞结合序列和胶原、 GAG结合部位，促进成纤维细胞和某些上皮细胞的迁移；（2）层连蛋白和副层连蛋白，两者密切相互作用，均存于基底膜内，通过组织转氨酶交联形成克分子相等的副层连蛋白-LN复合物，副层连蛋白亦能与Ⅳ型胶原、FN和细胞结合，有助于基底膜组织形成；（3）粗调节素，曾用于诊断的研究，有人认为在各型肝纤维化早期，当Ⅲ型前胶原肽未增高时，血清中已见有增高，此尚待更多资料证实；（4）细胞粘合素曾有报道显示仅在血窦周围纤维化之肝病时可见增高；（5）血栓粘合素Ⅰ和Ⅱ；（6）SPARC是分泌蛋白，富含酸性半胱氨酸又称骨粘连蛋白及BM-40，与含矿物质组织例如骨与牙相关，但在无矿物质组织中亦有发现，特别与细胞增殖，组织重建关，与各型胶原、白蛋白和TSP-1相互作用，特别是结合PGDF-BB，在急性、慢性肝损害时SPARCmRNA在HSC中呈高表达；（7）Von willebrand因子，是多聚蛋白由血管内皮细胞和巨核细胞产生，可存在血浆内、上皮细胞和血小板内，亦可存在基底膜与纤维间隔中，特别与血管增生有关。

四、重视间质降解的研究，需建立简易可行的血清学检测方法

现已有资料可证实，在肝损害的急性期已有ECM合成的增加，并无肝纤维化的形成，此阶段合成与降解二者之间处于平衡状态，随病程进展而慢性化，降解速度减慢，ECM在肝内大量沉积，肝纤维化则形成。因此在某种意义上讲，研究降解应较研究合成更为重要，事实上这方面研究尚少，专家们均认为应重视ECM降解的研究。降解ECM的酶是间质金属蛋白酶家族的主要成员之一。MMP家族锌与钙依赖的肽链内切酶。通常提及ECM降解酶是锌依赖的MMP。1989年在美国佛罗里达州举行的MMP专题会议上，确定以阿拉伯数字将其名称系统化，从而结束了ECM相关酶类研究中混乱、不系统命名的局面，系统命名为MMP-1、MMP-2、MMP-3……。MMP在组织中浓度很低，与间质结合紧密，具有活性的MMP难于从组织中提取出来，组织中又有MMP抑制剂，哺乳动物的众多MMP之间氨基酸序列仅有50%左右的同源。引用CDNA作探针时需考虑种属之间交叉性，这些均为MMP的研究带来较大困难，由于人们已重视其研究，故仍有较大进展^[14]，现扼要述之。

（一）间质金属蛋白酶分类，来源及作用底物现已知锌依赖MMP至少有11种即MMP-1-MMP-11，肝脏有8种。研究较多的有（1）间质胶原酶，1962年被发现，可分为纤维细胞型和中性粒细胞型，MMP-1分子量55kDa，来源于结缔组织细胞，肝骨HSC、HC、KC均有分泌，分解底物为胶原Ⅲ＞Ⅰ＞Ⅱ；MMP-8为75kDa，来源于中性粒细胞，抗MMP-8抗体可识别MMP-1，而抗MMP-1抗体则不能识别MMP-8。胶原酶以前体分泌，激活因子的蛋白酶及有机汞作用下激活。在最适条件下，间质胶原酶选择作用于肽链中甘氨酸-异亮氨酸肽链和α₂肽链中的甘氨酸-亮氨酸肽链，将胶原的肽链切成3/4和1/4两个阶段，（2）基质分解素又称为蛋白多糖酶或中性金属酶Ⅳ，可分为分解素1，2，3和Matrilys，分别属MMP-3、MMP-10、MMP-11和MMP-7，仅有MMP-3在肝脏中存在，有CT、Mφ、HSC分泌、分解Ⅲ、