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寄生虫卵检查新方法(加藤氏玻璃纸厚层涂片法)

2022-07-29
来源:求医网
摘要:目前国内寄生虫卵的常规检查方法多采用盐水直接涂片法和饱和盐水漂浮法,直接涂片法阳性率低,饱和盐水漂浮法适用于比重较低的钩虫卵等虫卵检查,而对其他虫卵的效果较差。最近在厦门市举办的第32次日中医疗技术交流寄生虫卵检查讲习班上,日本国名古屋公众医学研究所介绍了在日本及其他国家普遍使用的加藤氏玻璃纸厚层涂片法,该法操作简单,阳性率高,特别适用于标本量大的体检等使用。

现根据讲习班资料整理介绍于下,供大家参考。

一、加藤氏玻璃纸厚层涂片法的特点

本法和以往直接涂片法的主要不同点在于:

1、用于检查的粪便量较多,大约为100毫克。

2、用经过一定处理的吸水性玻璃纸代替盖玻片。

3、不使用水或其他液体稀释,直接在载玻片上涂抹,压平。

4、显微镜观察前,使标本适当干燥以提高其透明度而易于识别虫卵。

二、玻璃纸(Cellophane赛路芬)

如上所述,制作一个标本需要粪便量比以往涂片法的量要多(约100毫克)。因此玻璃纸的大小也应考虑在加压时检查物不致逸出为度。一般加图所示的大小即可。

(实物大小)

注:玻璃纸的大小也应考虑以不影响镜检面积为度。因有吸水性及防水性两种,故应注意选用吸水性者。玻璃纸的规格为#300。

三、浸泡液

平时需配制下列处方的混合液。3%马拉凯绿(MalachiteGreen)6毫升甘油500毫升6%石炭酸溶液500毫升

四、浸泡玻璃纸

将前述玻璃纸充分揉开,放入浸泡液内。浸泡时间达24小时以上即可。

五、制作标本

先从采来的粪便标本采三个部位以上共约100毫克的粪便,放在载玻片上,然后再如图所示,用已浸泡过的玻璃纸复盖,用橡皮塞或软木塞轻今按压标本,使之均匀铺开到不致于逸出为度。经过一定时间,干后透明,即可得到适合于显微镜检查的标本。

制作标本方法如下图所示

六、标本的干燥

本法特点之一的“标本干燥”是使显微镜检查时标本透明度增高,虫卵识别度增大。制作标本后到充分干燥的时间,在室温为25℃、湿度75%以下的条件,约需一小时左右。因而,如果在温度较高的夏天,制作标本后要适当观察其干后透明度来掌握镜检时间。若是干燥后仍长时间放置,则可能因干燥过度而造成虫卵变形变性等,出现受损情况识别虫卵就困难了。龙其是在检查钩虫卵,东洋毛状线虫卵时更应注意。

以上是使标本自然干燥的要点。若需检查大量标本,可采用人工干燥的方法。

七、照片效果说明(温度25℃,湿度55%)

肉眼直观的标本透明度

上:标本制成后立即观察0分钟中:标本制成后20分钟下:标本制成后40分钟

经过不同时间的显微镜观察上:蛔虫卵标本制成后0分钟中:蛔虫卵标本制成后20分钟下:蛔虫卵标本制成后40分钟

上:钩虫卵标本制成后0分钟中:钩虫卵标本制成后20分钟下:钩虫卵标本制成后40分钟

八、显微镜检查

显微镜检查标本时,使用推进装置全面检查整个视野。为提高虫卵的识别度,需要视野的亮度,因此显微镜的反射镜面应保持高亮度,原则上以使用人工光源为宜。

九、玻璃纸浸泡液的意义

浸泡液中使用甘油的目的是为了使玻璃纸变柔软的同时,提高其透明度,也可防止虫卵因干燥而受损变形。用石炭酸水是为了灭菌,保护检查人员免受病菌感染。使用马拉凯绿,则是利用其绿色,减少眼晴疲劳,提高检查效率。

十、讨论

以往用的直接涂片法虽然方法简单,但其缺点是使用的粪便量少,因而虫卵检出率低。想要弥补其缺点,就需要增加标本量。标本厚度增加,又会使镜检困难,看不清楚。

本法虽然增加粪便量,却因水分蒸发标本变薄,且有甘油增加透明度,因而看得渭楚。只要镜检全面仔细,则无疑可以提高检出率。

另外,本法对于检查钩虫卵,东方毛状线虫卵时,检出率也比漂浮集卵法和冬季培养法要高。