关键词： 移植；移植物排斥；雷公藤；小肠

摘要：目的观察雷公藤多甙对小肠移 植急性排斥反应的治疗作用。方法选用近交系大鼠F344／N和Wistar/A进行全小肠异位移植，实验分3组，第1组：非治疗对照组(F344-Wistar）；第2组：CsA治疗对照组［F344-Wistar+Csa(6mg，肌肉注射）］；第3组：雷公藤多甙治疗组［F344 -Wistar+雷公藤多甙（50mg／kg，灌胃）］。观察动物存活及一般状况，并于术后第3、5、7d取移植肠标本进行病理学检查。结果第1组大鼠存活时间(6.83±0.41)d，第3组大鼠存活时间为(8.00±0.63)d，二者间有极显著差异（P＜0.01），第2组大鼠存活均超过10d，并于10d时处死。病理检查显示第1组术后第3d发生轻度排斥，第5d发生中度排斥，第7d发生重度排斥；第2组除部分标本在术后第5、7d发生轻度排斥外，无排斥征象；第3组与第1组改变相似，但排斥的病理改变发生较晚、较轻。结论对小肠移植急性排斥的治疗，在50mg／kg剂量水平上单独使用雷公藤多甙，其免疫抑制作用是明确的，但疗效有限。

The effect of Tripterygium wilfordii on acute rejection in small bowel transplantation in rats

LI Yuanxin, LI Ning, WU Bo

(Resear ch Institute of General Surgery, Nanjing General Hospital of PLA, Nanjing 210002, China)

Abstract：ObjectiveThe aim of the study is to assess the efficacy of Tripterygium wilfordii (TW) on the acute rejection in small bowel transplant.MethodHeterotopic small bowel transplants were carried out using inbred F344 (donor) and Wistar (recipient) rats. The recipients were divided into three groups:1) allograft control group, 2) cyclosporin A treated group (6mg/kg, im) and 3) TW treated group (50mg/kg, enteral). Post-transplant clinical course and survival rates were recorded. The grafts were harvested on post-operative day 3, 5 and 7. The specimens were subjected to histological examinati on.ResultsThe survival duration of group 3 (8.00+/- 0.63 days) was significantly longer than that of the group 1 (6.83+/-0.41 days) (P＜0.001). The average survival duration of group 2 rats was more than 10 days. The histology examination of the transplanted bowel specimen from group 1 rats showed mild, moderate and severe rejection on post-operative day 3, 5 and 7. Some of the specimens from group 2 showed mild rejection on day 5 and 7. Group 3 specimens showed similar changes as group 1 except that the changes were milder and occurred later.ConclusionTripterygium wilfordii, administered at the dosage of 50mg/kg, has limited but definite immuno-suppression effect on acute rejection in small bowel transplantation in rats.

Key words：Transplantation；Transplant rejection；Tripterygium wilfordii; Small intestine▲

与其他器官移植相比，小肠移植排斥反应发生较早、较严重、易于复发，且不易用免疫抑制 剂控制。而一些免疫抑制剂（如CsA、Aza等）本身就具有较大的毒副作用。再者，由于小肠 移植手术过程中造成移植肠淋巴回流中断，影响移植肠对脂溶性物质的吸收，使得通过口服 脂溶性CsA途径难以达到有效的血药浓度。此外，免疫抑制剂高昂的价格也是限制小肠移植 临床应用的原因之一，且有些免疫抑制剂在国内不易获得（如FK506）。因而，在祖国中药 宝库中寻找有效、低毒、廉价的免疫抑制剂具有十分重要的意义。我们选择雷公藤多甙，观 察其对大鼠小肠移植急性排斥反应治疗作用的疗效。

材料与方法

一、动物模型

选用体重在250～350g间雄性近交系F344/N大鼠(RT1^l,中国医学科学院实验动物研 究所提供)与雄性近交系Wistar/A大鼠（RT1-A^k,RT1-E^d,中国科学院上海实验动物 中心提供）进行全小肠异位移植^［1］。

二、实验分组

第一组：非治疗对照组(n=6)：F344→Wistar；第二组： CsA治疗对照组(n=6)：F3 44→Wistar+CsA；第三组：雷公藤多甙治疗组(n=6)：F344→Wistar+雷公藤多甙。

第二组移植术后便开始CsA（瑞士Sandoz公司生产)治疗，按6mg^．kg^-1．d^-1 进行肌肉注射。

第三组移植术前2d便开始灌服雷公藤多甙（江苏省泰州制药厂生产），剂量为50 mg^．kg^-1．d^-1。

三、观察指标

观察术后大鼠的一般状况及存活期。分别于术后第3、5、7d从移植肠造口拖出或剖腹 切取移植肠，进行病理学检查。对第三组死亡大鼠均进行尸检，取心、肝、肺、肾、脾及淋 巴组织进行组织病理学检查，观察有无雷公藤多甙毒性作用的发生。

制定大鼠小肠移植排斥反应的病理学诊断标准^［2］，轻度：肠粘膜绒毛轻度畸形， 间质有少量炎性细胞浸润，上皮细胞凋亡数目增加；中度：肠 绒毛畸形更明显，粘膜上皮开始有脱落，细胞浸润加重，上皮细胞凋亡数目显著增加；重度 ：肠绒毛结构消失，上皮脱落，肠壁变薄并坏死，间质大量炎性细胞浸润，血管炎显著。

实验数据采用统计软件Statistica5.0版本进行t检验。

结果

一、移植大鼠的一般状况及存活期

各组大鼠在麻醉清醒后即可正常活动，对外界刺激反应灵敏，移植肠造口开始有较多量稀薄 的肠液流出，2d后逐渐转稠，造口粘膜红润。第二组大鼠上述状态一直保持到动物被处死 前。第一组大鼠在术后第5d开始对外界反应下降，活动明显减少。至术后第6d，大鼠一 般表现为毛发零乱，呼吸急促，背部隆起，部分动物可见腹部包块形成，并发展至濒死 状态。第三组大鼠的临床表现与第一组相似，但症状出现的时间比第一组晚1～2d。第一 组大鼠存活时间为6.83±0.41d，而第三组大鼠存活时间为8.00±0.63 d，二者间有极显著差异（P＜0.01），第二组大鼠均于10d时处死。

二、移植肠标本的肉眼所见

第二组移植肠肠系膜血管搏动明显，移植肠红润，有肌张力，肠腔内有少量或无肠液分 泌，术后第10d仅有少量的纤维素样粘连。第一组术后第5d，移植肠略苍白，肌张力减 弱，肠腔扩大，有纤维素样粘连。术后第7d，移植肠严重粘连成包块状，移植肠苍白，无 肌张力，肠腔进一步扩大，肠壁薄，内有大量浓性、干酪样物质，移植肠系膜淋巴结肿大 。第三组大鼠移植肠肉眼观与第一组相似，但程度较轻。死后尸检发现移植肠粘连较第一组 重，但肠壁变薄及肠腔扩张则较第一组轻。

三、移植肠组织病理学改变

第一组大鼠术后第3d移植肠的病理改变符合轻度排斥诊断标准，第5d符合中度排斥诊断 标准，第7d符合重度排斥诊断标准。

第二组大鼠术后第3d无排斥反应发生，术后第5、7d仅有部分移植肠病理改变符合轻度 排斥诊断标准，术后第10d的病理改变较第7d有所改善，水肿消退，无排斥反应征象。

第三组大鼠移植肠在术后第3天病理学检查表现为绒毛数目减少，畸形，间质有少量炎性细 胞浸润，符合轻度排斥反应标准；术后第5d发展至上皮，开始有变性脱落；术后第7d， 绒毛数目少而低平，上皮细胞凋亡大量增加，间质炎症加重，固有腺体减少，符合中度排斥 反应诊断标准；死后尸检病理表现为绒毛结构基本消失，残存绒毛短而平，存在多处糜烂或 溃疡面，粘膜厚度显著变薄，固有腺体显著减少，间质纤维组织增加，大量炎性细胞浸润， 上皮细胞及固有腺体上皮凋亡现象常见，基本符合重度排斥反应诊断标准，但程度较第一组 尸检时移植肠病理改变轻。心、肝、肺、肾、脾及淋巴结组织病理学检查显示无严重的雷公 藤多甙毒性作用。

讨论

雷公藤多甙是雷公藤的一种提取物，它保留了雷公藤的免疫抑制作用，去除了某些毒性成分 ，因而显著地降低了毒副作用。但是雷公藤多甙仍然具有一定的毒副作用，且其免疫抑制疗 效在一定范围内与雷公藤的用药量存在着明确的剂量-效应关系^［3］。在大鼠的器官 移植实验中，文献报道雷公藤多甙的用药剂量多在25～50mg^．kg^-1．d^-1间 ^［4-6］，因此我们通过大量的预实验，选择了既能产生明确的抗排斥疗效又能不出 现严重的毒副作用的雷公藤多甙用药剂量50mg^．kg^-1．d^-1作为雷公藤多 甙治疗组的给药剂量。

研究表明雷公藤免疫抑制机理在于其可抑制T细胞的激活、IL-2的产生、IL-2R的表达和活 化T细胞对IL-2的反应性^［7］。在皮肤^［8］、心脏^［4］、肾 ^［5］、肺^［6