【摘要】目的研究693株细菌的药物敏感状况与其质粒的关系。方法用改良Birnboim法提

取质粒，对1986～1990年693株细菌进行药敏试验。结果金黄色葡萄球菌的1.9 U质粒带有10种耐

药基因，此耐药质粒在我院烧伤病室广泛传播；致病性大肠杆菌(EPEC)O₁₂₇∶H₆的60 U质粒带有3种耐

药基因；鼠伤寒沙门菌的98kb质粒带有5种。1986年庆大霉素、苯唑西林、红霉素、头孢噻肟对金黄色

葡萄球菌均100%敏感，但1989年已分别降至48.1%、46.9%、9.9%、7.4%，对阿米卡星仍有97.5%敏感；

阿米卡星对鼠伤寒沙门菌、EPEC O₁₂₇∶H₆、绿脓杆菌的敏感率分别为96.9%、95.5%、94.3%。

结论阿米卡星适用于国内新生儿败血症的治疗。

Plamsid analysis and antibiotic susceptibility testing of 693 strains of bacteria

Wu Shixiao, Shen Li, Yu jialin, et al.

Children′s Hospital, Chongqing Medical University, Chongqing 400014

【Abstract】ObjectiveTo study the antibiotic susceptibility of 693 strains of bacteria and its relation to the plasmid.MethodsA modified Birnboim method was used for plasmid extraction.ResultsA 60 U plasmid of

EPEC O₁₂₇: H₆ carried multiresistant genes to 3 antibiotics; a 98 kb plasmid of S.typhimurium possessed multi-resistant

genes to 5 antibiotics; and a 1.9 U plasmid of S. aureus carried multi-resistant genes to 10 antibiotics. The sensitivity rates

of S. aureus to gentamicin, oxacillin, erythromycin and cephalothin were all 100% in 1986, but they dropped to 48.1%,

46.9%, 9.9% and 7.4%, respectively, in 1988-1989. During this peroid, however, 97.5% of S. auerus continued to be sensitive to amikacin. The sensitivity rates of S. typhimurium, EPEC and P. aeruginosa to amikacin were 96.9%, 95.5%,

and 94.3%, respectively.ConclusionAmikacin may be the drug of choice in treatment of neonatal septicemia in China.

【Key words】Microbial sensitivity testsPlasmidsAmikacin

很多细菌对庆大霉素等抗生素的耐药性在逐年增高，但对阿米卡星(丁胺卡那霉素)至今仍较敏感。

现将1986年3月～1990年12月从我院、重庆市第三人民医院及妇幼保健院和南充专区医院分离出的693株

细菌对阿米卡星等抗生素的药物敏感试验(简称药敏试验)结合质粒分析报道如下。

资料和方法

一、标本来源 一、标本来源

1.甲产婴室：1986年3～5月从1 358份标本分离出的金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)中挑选105株(产

婴

鼻孔与脐部61株，脓疮、眼及脐脓液23株、医护人员手指和鼻孔20株，母亲阴道1株)。

2.乙产婴室(重庆市第三人民医院)1986年6月从98份标本中分离出金葡菌22株(患儿鼻孔6株、脓疱液5株、血液3株，医护人员鼻孔7株、手指1株)。

3.我院外科病房：1986年7月～1987年2月从20例新生儿检出49株金葡菌，皮下坏疽部位(25株)及其鼻

孔(10株)、手指(8株)及血液(1株)，陪伴家属鼻孔(5株)。

4.南充专区医院新生儿室：1987年4～5月从264份标本中分离出鼠伤寒沙门菌32株(患儿粪便19株及其血液7株，首例患儿母粪便，外科病儿及一产妇粪便、病室地面、奶瓶外表、护士手各1株)。

5.重庆妇幼保健院及我院新生儿室：1987年5～6月从359份标本中分离出大肠杆菌(EPEC)O₁₂₇∶H₆ 66株(患儿粪便42株及其血及咽部各1株，首例患儿母亲粪便及其阴道各1株，尿布10株，地板4株，医护人员手指

6株)。

6.我院新生儿室：1988年～1990年2月从701份标本中挑选出75株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)(患儿血液68株、脑脊液5株、脓疮液2株)。

7.我院烧伤病室：1988年4月～1989年2月从1 544份标本中分离出276株金葡菌，挑选出81株(患儿创面

41株，患儿及其家属与医护人员鼻孔和手指40株)。

8.我院儿科重症监护室(PICU)、烧伤病室与普通病房：1989年9月～1990年11月分离出绿脓杆菌159株

(环境及用具24株，患儿呼吸道分泌物及呼吸机18株来自PICU；患儿创面40株及环境用具19株来自烧伤病

室；患儿痰50株、用具8株来自普通病房)。

9.我院新生儿室：1990年10～12月分离出不动杆菌189株，从中挑选出104株(患儿血67株、工作人员手

指10株，医疗用具12株，空气15株)。

二、质粒分析

按改良Birnboim法^［1］提取质粒DNA。

三、药敏试验

EPEC、鼠伤寒沙门菌及绿脓杆菌的药敏试验采用微量稀释法^［2］，其他细菌的药敏试验采用改良Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法。14种抗菌药纸片及质控标准株大肠杆菌美国标准菌种(ATCC)25 922、金葡

菌ATCC 25 923、绿脓杆菌ATCC 27 853均购自上海医学化验所。

结果

一、药敏试验 一、药敏试验

1.693株细菌药敏试验结果表明，阿米卡星1986～1987年对金葡菌100%敏感，1988～1989年仍有97.5%

敏感，对CNS亦有76.0%敏感，仅次于万古霉素；对绿脓杆菌与头孢他啶(复达欣)相同，均94.3%敏感，对

鼠伤寒沙门菌、EPEC O₁₂₇∶H₆的敏感率亦分别为96.9%、95.5%；对不动杆菌的敏感率较差，只有43.3%，

仅次于头孢噻肟(62.5%)。

2.1986年3～5月105株金葡菌对苯唑西林、庆大霉素、红霉素、头孢噻肟均100%敏感，但1986年6月～1989年2月152株金葡菌对上述药物敏感率分别降至46.9%～48.1%、9.9%、7.4%。

3.万古霉素对金葡菌及CNS均100%敏感。

4.159株绿脓杆菌对阿米卡星94.3%敏感，但对庆大霉素仅23.3%敏感，对第一代头孢唑啉仅5.7%敏感，

第二代头孢呋新均耐药，对第三代头孢他啶、头孢哌酮、头孢三嗪、头孢噻肟的敏感率分别为94.3%、64.6%、49.1%、40.9%。对羧苄青霉素也44.1%耐药。对庆大霉素的耐药率烧伤病室(84.8%)与PICU(92.9%)

均明显高于普通病房(58.6%)(χ²=19.2，P＜0.01)。

二、质粒分析

1.甲产婴室：仅29.9%金葡菌含质粒，含1.4、1.7百万U质粒的流行株仅见于患儿病灶脓液(8株)及其

鼻孔与脐部(8株)、护士鼻孔(2株)及其手指(3株)^［3］。一医生鼻孔的金葡菌含1.9、2.8、5.0 U 3种质

粒，对6种抗生素耐药，一产婴鼻孔不含质粒的金葡菌仅耐青霉素。

2.乙产婴室：12株流行株含2.8 U质粒与另5株含1.65、2.0、3.4 U质粒金葡菌的耐药率均高于5株不

含质粒者，后者也耐青霉素。

3.儿外科病房：98%金葡菌含质粒，22株流行株含2.8、4.2、28.5～31千碱基对(kb)3种质粒^［4］，对

4～9种抗生素耐药，含两种质粒株(2.8、3.0 kb)仅耐青霉素、氨苄西林、红霉素；含一质粒者(28.5或31 kb)仅耐青霉素、氨苄西林；而一株不含质粒的金葡菌对14种药物均敏感，提示质粒与金葡菌的耐药性关系

密切。

4.南充专区医院新生儿室：30株鼠伤寒沙门菌含98、6.7、3.3 kb质粒，用5%十二烷基硫酸钠(SDS)+44.5℃消除98 kb质粒后，质粒消除株对氨苄西林、氯霉素、四环素、链霉素、庆大霉素的耐药性消失

^［5］，表明98 kb质粒系耐药(R)质粒，它编码了对上述5种抗生素的耐药基因。

5.重庆妇幼保健院及我院新生儿室：66株EPEC O₁₂₇∶H₆ 含60、1.5 U质粒，用溴化乙锭(50 μg/ml)

消除60 U质粒后，对氨苄西林、氯霉素、四环素从耐药变为敏感^［6］，其最小抑制浓度(MIC)从64、32、