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pH6.0醋酸-醋酸钠缓冲液的配制方法①0.1N醋酸钠：取8.204g无水醋酸钠溶于蒸溜水在容量瓶中加水至1000ml。②0.1N醋酸：取5.9ml冰醋酸加水至1000ml；再取0.1N醋酸10ml加0.1N醋酸钠190ml，使pH呈6.0即可。
染色方法与步骤①骨组织于10%甲醛水溶液固定；②用30%甲酸水溶液脱钙；③改刀后常规脱水、透明、浸蜡、包埋；④以6μm厚度切片；⑤切片脱蜡至水；⑥入pH6.0醋酸-醋酸钠缓冲液浸泡20～30分钟，然后水洗；⑦染HE或Masson三色染色，最后常规脱水、透明、封固。
结果各类组织细胞结构清晰，骨基质、骨小梁、骨细胞颜色鲜艳，核浆对比分明，与不浸泡缓冲液的切片对照，染色结果明显优良。
讨论本法只是在骨切片染色前加一步pH6.0醋酸-醋酸钠缓冲液浸渍，此液配制简单，应用方便，结果优良。但需要注意的是，缓冲液的pH值以6.0最好，我们也曾用6.0以下和6.0以上的pH值试染，其结果都没有6.0理想。偏酸时，切片发红，核浅蓝或不着色；偏碱时，细胞灰蓝，核深暗，基质小梁偏紫红。pH值6.0染色最佳的原因是由于核酸带有酸根，等电点pH值为1.5～2.0，因此，pH值＞2时核酸带负电，才能结合带正电荷的碱性染料。同时，酸性染料能与细胞浆中带相反电荷的蛋白质结合，使染色鲜艳，其pH值6.0时是个既对酸性染料，又对碱性染料最佳的亲和点。尤其是骨组织在处理过程中，必须用酸性试剂脱钙，尽管经过中和或碱化，但酸性试剂必竟还有残留，难免影响染色，通过pH6.0的醋酸-醋酸钠缓冲液的浸渍弥补了常规处理中的缺憾，因而取得较好染色效果。
2000-03-17收稿2000-05-12修回
