生物检定统计法(三)

标题 生物检定统计法(三) 附录序号 附录ⅩⅣ 内容全文 生物检定统计法
例3量反应平行线测定随机区组设计(3.3)法
新霉素效价测定──杯碟法
S为新霉素标准品
稀释液ds<[1]>∶0.8u/ml
ds<[2]>∶10.0u/ml
ds<[3]>∶12.5u/ml
T为新霉素
标示量
ＡT∶670u/mg
稀释液dT<[1]>∶8.0u/ml
dT<[2]>∶10.0u/ml
dT<[3]>∶12.5u/ml
r＝1∶0.8
I＝0.0969
反应(y)∶抑菌圈直径(mm)
测定结果见表3-1。

                           表3-1新霉素效价测定结果        ────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬───        剂 量 │ds<[1]> │ ds<[2]>│ds<[3]> │dT<[1]> │dT<[2]> │dT<[3]> │∑ym         u/ml │8.0 │ 10.0 │ 12.5 │8.0 │ 10.0 │ 12.5 │        ────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───        │ 16.05│ 16.20│ 16.50│ 15.80│ 16.35│ 16.60│ 97.50        │ 16.20│ 16.45│ 16.65│ 16.20│ 16.45│ 16.70│ 98.65         y│ 16.00│ 16.45│ 16.70│ 16.05│ 16.35│ 16.70│ 98.25        │ 15.95│ 16.35│ 16.60│ 16.00│ 16.25│ 16.60│ 97.75        │ 15.70│ 16.25│ 16.60│ 15.85│ 16.25│ 16.60│ 97.25        │ 15.55│ 16.20│ 16.55│ 15.70│ 16.20│ 16.60│ 96.80        │ 15.65│ 16.20│ 16.40│ 15.80│ 16.15│ 16.40│ 96.60        │ 15.90│ 16.10│ 16.45│ 15.80│ 16.10│ 16.50│ 96.85        │ 15.90│ 16.00│ 16.30│ 15.70│ 15.95│ 16.30│ 95.85        ────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────        │142.60│146.20│148.75│142.90│146.05│149.00│ 875.50         ∑y(k) │S1│S2│S3│T1│T2│T3│        ────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────

随机区组设计(3.3)法，K＝6
不同双碟（碟间）是剂量组内所加的因级限制，共9个双碟，m＝9。
(1) 按(14)～(18)式计算各项差方和

                                                              875.5<2>        差方和(总)＝16.05<2>+16.20<2>+…+16.50<2>+16.30<2>－─────＝5.4709                9×6        f＝9×6-1＝53        (142.60)<2>+(146.20)<2>+…+(146.05)<2>+149.00<2>        差方和(剂间)＝─────────────────────────＝4.1926        9        (875.5)<2>－──────        9×6        f＝6-1＝5        (97.50)<2>+(98.65)<2>+…+(96.85)<2>+(95.85)<2>875.5<2>        差方和(碟间)＝────────────────────── － ────＝1.0018        69×6

f＝9-1＝8
差方和(误差)＝5.4709-4.1926-1.0018＝0.2765
f＝53-5-8＝40
(2) 剂间变异分析及可靠性测验
按表四(3.3)法计算，结果见表3－2、表3－3。

        表3-2新霉素(3.3)法剂间变异分析        ━━━━━━┯━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┯━━━━━━━━┯━━━━━━━━━━┯━━━━━━━━━━━━        │∑y(k)    │││                ├───┬───┬───┬───┬───┬───┤││ 差 方 和        变异来源│S<[1]>│S<[2]>│S<[3]>│T<[1]>│T<[2]>│T<[3]>│m·∑C<[i]><2>│∑［C<[i]>·∑y(k)］│ [∑（C<[i]>·∑y(k)）]<2>        │142.60│146.20│148.75│142.90│146.05│149.00│││ ──────────        ├───┴───┴───┴───┴───┴───┤││ m·∑C<[i]><2>        │ 正交多项系数(C<[i]>) │││        ──────┼───┬───┬───┬───┬───┬───┼────────┼──────────┼────────────        试品间│-1│-1│-1│+1│+1│+1│9×6│0.4000│0.002 963        回归│-1│ 0│+1│-1│ 0│+1│9×4│ 12.25│4.168        偏离平行│+1│ 0│-1│-1│ 0│+1│9×4│0.050 00│0.000 069 44        二次曲线│+1│-2│+1│+1│-2│+1│9×12 │1.250 │0.014 47        反向二次曲线│-1│+2│-1│+1│-2│+1│9×12 │0.8500│0.006 690        ━━━━━━┷━━━┷━━━┷━━━┷━━━┷━━━┷━━━┷━━━━━━━━┷━━━━━━━━━━┷━━━━━━━━━━━━
                    表3-3新霉素效价测定(3.3)法可靠性测验结果        ━━━━━━┯━━━┯━━━━━━━┯━━━━━━━┯━━━━━━┯━━━━━━         变 异 来 源│f │ 差方和 │ 方差 │F │ P        ──────┼───┼───────┼───────┼──────┼──────        试品间│1 │0.002 963 │ 0.002 963│ <1 │ >0.05        回归│1 │4.168 │ 4.168│ 602.9│ <0.01        偏离平行│1 │0.000 069 44│ 0.000 069 44 │ <1 │ >0.05        二次曲线│1 │0.014 47│ 0.014 47 │2.1 │ >0.05        反向二次曲线│1 │0.006 690 │ 0.006 690│ <1 │ >0.05        ──────┼───┼───────┼───────┼──────┼──────        剂间│5 │4.1926│ 0.8385 │ 121.3│ <0.01        碟间│8 │1.0018│ 0.1252 │18.1│ <0.01        误差│ 40 │0.2765│0.006 912 s<2>││        ──────┼───┼───────┼───────┼──────┼──────         总 │ 53 │5.4709│││        ━━━━━━┷━━━┷━━━━━━━┷━━━━━━━┷━━━━━━┷━━━━━━

结论：回归非常显著(P＜0.01),偏离平行、二次曲线、反向二次曲线均不显著(P＞0.05)，实验结果成立。 组内（碟间）差异非常显著（P＜0.01）,分离碟间差异，可以减小实验误差。
(3) 效价（ＰT）及可信限（FL）计算
按表十一(3.3)法及(30)～(33)、(3)、(8)式计算。
r＝1:0.8I=0.0969S<2>=0.006 912f=40t=2.02(P=0.95)
ＰT及其FL计算
1
V＝──(142.90+146.05+149.00-142.6-146.2-148.75)=0.1333
3
1
W＝──(149.0-142.9+148.75-142.6)=3.0625
4
2.02<2>×0.006 912×9
g＝───────────＝0.007
4×3.0625<2>
12.50.1333
R＝───. antilog（────×0.0969）＝1.01
12.53.0625
P<[T]>＝670×1.01＝676.70u/mg
0.0969
S<[M]> ＝ ────────×3.0625<2>
(1-0.007)
┌─────────────────────────
│21
│9×0.006 912［(1-0.007)─×3.0625<2>+─×0.1333<2>］＝0.006 469
√34

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