北京医科大学学报 2000年第3期第32卷 药学研究

作者：隆长锋王璇杨宇新蔡少青

单位：北京大学药学院天然药物学系，北京100083

关键词：大叶马蹄香；细辛属；化学；黄酮类；分离和提纯；查耳酮；分离和提纯

［摘要］ 目的：研究大叶马蹄香（Asarum maximum Hemsl.）根中的化学成分。方法：用溶剂提取、色谱法分离大叶马蹄香的化学成分，并用理化常数和波谱法鉴定其结构。结果：从大叶马蹄香根的乙醇提取物中分离到5个黄酮类成分，根据理化性质和波谱数据鉴定其结构分别为柚皮素（Ⅰ），柚皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（Ⅱ），柚皮素-5，7-O-β-D-2吡喃葡萄糖苷（Ⅲ），4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′,4′-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（IV）和4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（V）。结论：上述化合物均为首次从该植物中获得，其中化合物Ⅱ，Ⅳ，Ⅴ为首次从细辛属植物中获得。

［中图分类号］ R932.41［文献标识码］ A

［文章编号］ 1000-1530（2000）03-0229-03

Studies on flavonoids from the root of Asarum maximum

lONG Chang-Feng, WANG Xuan, YANG Yu-Xin, CAI Shao-Qing(Department of Natural Medicines, School of

Pharmaceutical Sciences, Peking University, Beijing100083, China)

aBSTRACT objective: To study the constituents of the root of Asarum maximumHemsl. Methods: The constituents were extracted and separated by various chromatographies , and the structures were identified on the basis of their chemical and physical properties and spectral analysis. Results: Five flavonoids were isolated from the ethanol extract of the roots of Asarum maximum, and their structures were identified as naringenin (Ⅰ),naringenin-5-O-β-D-glucopyranoside (Ⅱ),naringenin-5,7-di-O-β-D-glucopyranoside (Ⅲ), 4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′,4′-di-O-β-D-glucopyranoside (Ⅳ) and 4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′-O-β-D-glucopyranoside (Ⅴ). Conclusion: All of these compounds were separated for the first time from this plant and compoundsⅡ,ⅣandⅤfrom the genus Asarum.

KEY WORDS

KEY WORDSAsarum maximum；Asarum/chem; Flavones/isol; Chalcone/isol▲

细辛为常用中药，中国药典规定细辛为马兜铃科植物北细辛Asarum heterotropoids Fr. Schmidt var. mandshuricum (Maxim.)Kitag.、汉城细辛A.sieboldii Miq.var. seoulense Nakai或华细辛A .sieboldii Miq.的干燥全草，用于风寒感冒、头痛、牙痛、风湿痹痛、痰饮哮喘等症^［1］。商品调查^［2］发现细辛属植物大叶马蹄香(Asarum maximum Hemsl.)在湖北等地作为细辛使用，药理实验证明其具有镇痛作用^［3］，但未见有关大叶马蹄香的化学成分报道。为了阐明大叶马蹄香的有效成分，我们对其化学成分进行了研究。从中分离得到5个黄酮类化合物，分别为柚皮素（naringenin,I, 5,7,4′-三羟基二氢黄酮），柚皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（naringenin-5-O-β-D-glucopyranoside,Ⅱ）,柚皮素-5,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(naringenin-5,7-di-O-β-D-glucopyranoside,Ⅲ)，4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′,4′-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′,4′-di-O-β-D-glucopyrano-side,Ⅳ)和4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′-O-β-D-glucopyranoside,Ⅴ)。这些化合物均为首次从大叶马蹄香中获得，其中化合物Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ为首次从细辛属植物中获得。

1仪器及药材

熔点用XT_4A显微熔点测定仪测定，温度计未校正。IR光谱用Perkin-Elmer 983型红外光谱仪测定，KBr压片。NMR光谱用VXR300和VXR500型仪测定，TMS内标。MS用AEI-MS-50型质谱仪测定。柱色谱硅胶（100～200目，200～300目）和薄层色谱硅胶G，GF254，H（400目）均为青岛海洋化工厂产品；聚酰胺膜为浙江黄岩化学实验工厂产品，聚酰胺粉为江苏无锡县电化教具厂产品；Sephadex LH-20为 Pharmacia公司产品；D101型大孔吸附树脂为天津农药厂产品。薄层显色剂为90 g*L^－1 H₂SO₄乙醇溶液，50 g*L^－1磷钼酸乙醇溶液，10 g*L^－1 AlCl₃乙醇溶液。药材经本室蔡少青教授鉴定原植物为大叶马蹄香(Asarun maximum Hemsl.)。

2提取和分离

大叶马蹄香根（含根茎）粗粉经95%(体积分数)乙醇温浸4次，提取液减压浓缩后分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。药渣再经50%(体积分数)乙醇温浸4次，提取液减压浓缩后分别用乙酸乙酯和正丁醇萃取。将95%(体积分数)乙醇提取物的正丁醇部分与50%(体积分数)乙醇提取物的正丁醇部分合并，经大孔树脂处理，30%(体积分数)和50%(体积分数)的乙醇洗脱物进一步经反复硅胶柱色谱（CHCl₃-MeOH梯度洗脱），聚酰胺柱色谱(EtOH-H₂O梯度洗脱)和Sephadex LH-20色谱(MeOH洗脱)，得到化合物Ⅰ(20mg), Ⅱ ( 50mg), Ⅲ(9g), Ⅳ(300mg)和Ⅴ(200 mg)。

3结构鉴定

化合物I：无色针晶（氯仿-甲醇），mp:246～247℃，分子式C₁₅H₁₂O₅。盐酸-镁粉反应阳性。¹HNMR（CD₃COCD₃）:δ2.73(1H,dd, J=17, 2.4Hz), 3.19(1H, dd, J =17, 12.7Hz), 5.46(1H, dd, J =12.7, 2.4Hz)为一组偶合信号，显示此为二氢黄酮特征信号，分别为二氢黄酮母核上H-3e， H-3a, 和H-2; δ12.19(1H,S)为芳环上5位的酚羟基，δ6.90(2H, dd, J=8.5, 2.7Hz)和δ7.4(2H,dd, J =8.5, 2.7Hz)为B环上处于邻位相互偶合的H-3′,5′和H-2′,6′两组质子信号，所以B环为4位单取代；δ5.96(1H,d, J =2.2Hz)和δ5.95(1H, d, J=2.2Hz)为A环上的H-8，H-6两个质子信号，8.5(OH),9.6(OH), 12.2(5-OH)。EI-MS显示分子离子峰为272，可推断此化合物为含有3个羟基的二氢黄酮，其取代位置分别为5,7, 4′位。

¹³CNMR（CD₃COCD₃）:δ196.3为酮羰基碳信号，δ42.5和δ79.0为C环C-3，C-2信号，其余为芳环碳信号。根据以上数据，确定Ⅰ为柚皮素。

化合物Ⅱ：无色针晶（氯仿-甲醇），mp: 164～166℃，分子式C₂₁H₂₂O₁₀，盐酸-镁粉反应阳性。

¹HNMR（DMSO-d₆）: 显示δ6.79(2H, d, J=8.4Hz)和δ7.31(2H,d, J=8.4Hz)为B环上处于邻位相互偶合的H-3′, 5′和H-2′,6′两组质子信号，所以B环为4位单取代；δ6.40(1H,d, J=2.1Hz)和δ6.01(1H, d, J=2.1Hz)为A环上的H-6，H-8两个质子信号。δ3.1～3.7有多个氢为糖上质子，δ5.38(1H,dd, J=13.2, 2.7 Hz)为H-2, 3.07（1H, dd, J=17.1, 13.2 Hz, 3-α-H）, 2.62(1H,dd, J=17.1,2.7Hz, 3-β-H),δ4.6～5.2有多个质子为糖上羟基，端基质子5.1(1H, d, J=5.1Hz,glc 1-H)。碳谱数据显示δ44.5和78.1的峰，为二氢黄酮3-C和2-C信号，Ⅱ为二氢黄酮苷，与柚皮素碳谱比较，碳谱中显示比柚皮素多1个葡萄糖的碳信号，由于苷化位移，端基碳化学位移向低场位移至δ103.4,glc-2-C向高场位移δ1.7, 其它糖上数据与β-D-glc基本一致（表1）， B环部分基本一致，C-4～10化学位移变化为－6.3,－0.1,+3.7,－1.6,+3.8,－2.9,+3.2,具有9.6(OH),10.8(OH)信号, 5-OH信号消失。所以糖应取代在5位，故确定化合物Ⅱ为柚皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物Ⅲ：白色粉末（甲醇），mp: 182～184℃，分子式C₂₇H₃₂O₁₅，盐酸-镁粉反应阳性。IRυ(cm^－1):3392(-OH),1636(C=O),1202,1081(C-O)。¹HNMR（DMSO-d₆）显示δ6.79(2H,d, J=7.2Hz)和δ7.32(2H, d, J=7.2Hz)为B环上处于邻位相互偶合的H-3′,5′和H-2′,6′两组质子信号，所以B环为4位单取代；δ6.33(1H,s)和δ6.51(1H, s)为A环上的H-6，H-8两个质子信号。δ3.1～3.7有多个氢为糖上质子，δ4.6～5.5有多个质子为糖上羟基和端基质子。UVλ^MeOH_max nm, 278。碳谱数据显示δ44.6和78.5的峰，为二氢黄酮C-3，C-2信号。Ⅲ为二氢黄酮苷，与柚皮素碳谱比较，碳谱中显示比柚皮素多两个葡萄糖的碳信号，端基碳化学位移为δ99.4，102.4， B环部分基本一致，C-4～10化学位移变化为－6.2，－1.0， +4.5，－2.5，+3.2，－3.6，+4.6，说明两个葡萄糖在5,7位取代。FAB-MS显示433［M⁺-glc］，271［M⁺-glc-glc］。与文献［4］对照，数据一致，故确定其结构为柚皮素-5,7-O-β-D-二吡喃葡萄糖苷。

表1化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的碳谱数据

Table 1¹³CNMR data of compounds Ⅰ, Ⅱ and Ⅲ

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