北京医科大学学报 2000年第3期第32卷 药学研究

作者：甘露王梁鸿赵玉英蒋凤池

单位：甘露王梁鸿赵玉英（北京大学药学院天然药化研究室,北京100083）；蒋凤池（江西师范大学化学系）

关键词：粗叶悬钩子；黄酮类；分离和提纯；蔷薇科；金丝桃甙；分离和提纯；粗叶悬钩子甙

［摘要］ 目的：研究粗叶悬钩子化学成分。方法：用色谱法和光谱解析方法对粗叶悬钩子叶的化学成分进行分离和结构测定。结果：共得到6个化合物：粗叶悬钩子甙（alcesefoliside,1），金丝桃甙（hyperoside ,2），3-氧化-6-羟基-紫罗兰醇（vomifoliol , 3），β-谷甾醇（β-sitosterol ,4），胡萝卜甙（daucosterol ,5），碳三十二醇（dotriacontyl alcohol ,6）。结论：化合物1为新化合物，其余化合物均首次从该植物中获得。

［中图分类号］R932.41［文献标识码］ A

［文章编号］ 1000-1530（2000）03-0226-03

chemical constituents from Rubus alceaefolius Poir

gAN Lu， wANG Bin， lIANG Hong， zHAO Yu-Ying

（ division of Natural Medicional Chemistry, School of

Pharmaceutical Sciences，Peking University,Beijing100083, China）

jIANG Feng-Chi

（ department of Chemistry,Jiangxi Normal: University）

aBSTRACT objective： to study the chemical constituents from the leaves of Rubus alceaefolius Poir. Methods: Chemical constituents were isolated and identified by the repeated chromatographies and spectral analyses. Results: Six compounds were obtained as alcesefoliside(1), hyperoside(2), vomifoliol(3), β-sitosterol(4), daucosterol(5), and dotriacontyl alcohol(6). Conclusion: Compound 1 was a new compound. The other compounds were obtained from this plant for the first time.

KEY WORDSRubus alceaefolius Poir； flavones/isol;Rosaceae; Hyperin/isol; Alcesefoliside▲

粗叶悬钩子(Rubus alceaefolius Poir）为蔷薇科悬钩子属植物，根和叶均可作为药用，具有活血祛瘀、清热止痛之功效，治急慢性肝炎，肝、脾肿大，乳腺炎，口腔炎，行军性血红蛋白尿，外伤出血等症。我们的研究也发现其有抗炎活性，故对其化学成分进行了研究，从其叶中分离鉴定了5个三萜类化合物^［1］，现又鉴定了6个化合物，结构如下：粗叶悬钩子甙（1），金丝桃甙（2），3-氧化-6-羟基-紫罗兰醇（3），β-谷甾醇（4），胡萝卜甙（5），碳三十二醇（6）。

化合物1为黄色粉末，分解点为260～262 ℃。TLC水解显示其糖为半乳糖和鼠李糖。UVλ^MeOH_maxnm：257,352,说明其可能是黄酮或黄酮醇3-糖甙；NaOMe:270,392,强度不随时间下降，带I红移了40nm,示有4′-OH；NaOAc:269,378,带Ⅱ红移了12 nm,示有7-OH；NaOAc/H₃BO₃：261，359，示有邻二酚羟基；AlCl₃:271,413,AlCl₃/HCl:268,353,390,示结构中有邻二酚羟基和5-OH。

FAB-MS给出：755（M⁺-1），610（M⁺-146），464（M⁺-146-146）以及301（M⁺-146-146-162），说明化合物1有3个糖，可能为2个鼠李糖和1个半乳糖。

¹HNMR谱显示甙元中有6.13(1H,br.s,6-H), 6.34(1H,br.s,8-H),6.76(1H,d,J=7.5Hz,5′-H), 7.50(1H,br.s,2′-H), 及7.61(1H,d,J=7.5 Hz,6′-H)质子信号，以上说明化合物1的甙元为3,5,7,3′,4′-五羟基黄酮,并证明糖与甙元3位成甙。

糖上质子信号为：5.56(1H,d,J=7.5 Hz, gal 1-H), 5.04,4.37(各1H，br.s,分别为rha 1-H)。1.03，0.86(各3H,d,J=6.0 Hz,rha-CH₃), 3.0～3.8之间有糖上的多个氢信号，这进一步说明化合物1的糖为一个半乳糖和两个鼠李糖，且半乳糖甙键为β构型。归属化合物1的¹³CNMR数据，与已知化合物金丝桃甙(2)的数据比较，甙元部分碳信号数据一致，从糖部分碳信号可见：半乳糖2位碳向低场位移约4.0,6位碳向低场位移约5.0, 推测两个鼠李糖分别连接在半乳糖的2位和6位，与已知化合物isorhamnetin-3-O-α-L-dirhamnopyranosyl-(1→2,1→6 )-β-D-galactopyranoside-7-O-α-L-rhamnopyrano-

side(A)^［2］的糖部分碳信号比较，二者数据一致，说明推测正确。最后确定化合物1的结构为：3,5,7,3′,4′-五羟基黄酮-3-O-［（2-O-α-L-鼠李糖基）］-（6-O-α-L-鼠李糖基）-β-D-半乳糖甙。

1仪器及药材

熔点用X₄型显微熔点仪测定，温度计未校正。红外光谱用Perkin-Elmer 983型仪器测定，KBr压片。紫外光谱用Shimadzu UV-260型分光光度仪测定。核磁共振用Bruker AM-500型核磁共振仪测定，TMS作为内标。质谱用Kyky-ZHP-5^#型质谱仪测定。以上测试由本校重点实验室及分析仪器测试中心进行。

粗叶悬钩子叶采于广西笆宁县五圹镇同仁村，经北京大学药学院天然药物学系陈虎彪教授鉴定为Rubus alceaefolius Poir。

2提取和分离

粗叶悬钩子叶10 kg,10倍量95%(体积比)乙醇渗漉，乙醇提取物水悬浮，石油醚萃取，分为石油醚层，水层和不溶物。水层正丁醇萃取得正丁醇萃取物和水萃取物。

正丁醇萃取物（170 g）经硅胶色谱柱分离，CHCl₃-MeOH-H₂O(体积比为4∶1∶0.2)洗脱得16流份。流份16经反复正反相硅胶色谱及Sephadex LH-20色谱分离得到化合物1（15mg）。流份11～15经D101大孔吸附树脂柱色谱（体积分数为50%的MeOH洗脱）及硅胶柱色谱［CHCl₃-MeOH-H₂O（体积比为12∶2∶0.1）洗脱］得到化合物2（30 mg）。流份4经D101大孔吸附树脂柱色谱（体积分数为50%的MeOH洗脱）及硅胶柱色谱［CHCl₃-MeOH（体积比为99∶1）洗脱］得到化合物3（20mg）。

不溶物（150 g）经反复硅胶柱色谱，EtOAc-EtOH-H₂O(体积比为80∶2∶1)洗脱得到化合物5（80 mg）。

石油醚萃取物经硅胶柱色谱，石油醚-丙酮梯度洗脱得到化合物4（120 mg）及6（50 mg）。

3结构鉴定

化合物1：黄色粉末，分解点260～262℃。TLC水解显示其糖为半乳糖和鼠李糖。UVλ^MeOH_max nm：257,352；NaOMe:270,392；NaOAc:269,378；NaOAc/H₃BO₃：261，359；AlCl₃:271,413；AlCl₃/HCl:268,353,390。FAB-MS（m/z）：755（M⁺-1），610（M⁺-146），464（M⁺-146-146），301（M⁺-146-146-162）。

¹HNMR(DMSO-d₆,)：6.13(1H,br.s,6-H),6.34(1H,br.s,8-H),6.76(1H,d,J=7.5Hz,5′-H), 7.50(1H,br.s,2′-H), 7.61(1H,d,J=7.5Hz,6′-H)，5.56(1H,d,J=7.5Hz,gal 1-H), 5.04,4.37(各1H，br.s, rha 1-H)。1.03，0.86(各3H,d,J=6.0Hz,rha-CH₃),3.0-3.8 （糖上其它氢）。

¹³CNMR数据见表1。

表1化合物1和2的碳谱数据

table 1¹³CNMR data of compound 1 and 2（DMSO）

aglycone 1 2 sugar 1 a 2 2 156.3 156.2 gal 1 100.5 101.5 101.8 3 132.5 133.4 2 75.0 75.1 71.1 4 177.0 178.0 3 73.3 73.3 73.1 5 161.1 161.1 4 68.6 68.1 67.8 6 99.0 98.6 5 73.9 73.5 75.6 7 166.3 164.0 6 65.0 64.9 60.0 8 94.0 93.4 rha 1 99.0 98.3 9 156.3 156.2 2 70.3 70.0 10 103.4 103.8 3 70.6 70.5 1′ 121.6 121.7 4 72.0 70.7 2′ 115.1 115.0 5 68.6 69.7 3′ 144.8 144.7